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专题17 发酵工程
一、单选题
1、（2024·天津北辰·三模）以野生型大肠杆菌为材料，诱变选育赖氨酸缺陷型大肠杆菌
（失去产生赖氨酸能力，在基本培养基上不能生长）的过程如下图所示，数字代表培养基，
字母表示操作步骤。有关说法错误的是（ ）
A．紫外线属于物理诱变因素，可诱导大肠杆菌发生基因突变
B．将①中的菌液接种到②上的方法为稀释涂布平板法
C．①②④培养基中需添加赖氨酸，而③培养基中不能添加赖氨酸
D．从④培养基中挑取乙菌落进行纯化培养即可获得所需突变株
2、（2024·河北承德·三模）（2024·河南·三模）我国酿酒技术历史悠久，《唐书》记载
“葡萄酒，西域有之……及破高昌……京中始识其味”。下列叙述正确的是（ ）
A．酵母菌是真核、兼性厌氧型生物，而醋酸菌是原核、厌氧型生物
B．酿酒发酵初期通入氧气可促进酵母菌进行有氧呼吸，大量增殖
C．在利用葡萄汁制作葡萄酒的过程中，发酵液的pH 逐渐增大
D．当糖源充足时，醋酸菌即将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸
3、（2024·河北秦皇岛·三模）堆肥指利用自然界广泛存在的微生物，有控制地促进固体废
物中可降解有机物转化为稳定的腐殖质的生物化学过程。下图为堆肥处理时材料内部温度
的变化曲线。若要从堆肥材料中筛选出能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，
下列相关叙述错误的是（ ）
1
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A．微生物呼吸作用释放的热量积累，导致堆肥内部温度逐渐升高
B．与a 点相比b 点时微生物的数量较多，与c 点相比b 点时微生物种类较多
C．c 点时，可对堆肥取样并用角蛋白为唯一氮源的培养基对微生物群进行培养和筛选
D．若采用平板划线法分离微生物，需对取样获得的原液进行适当稀释后再划线
4、（2024·河北邯郸·三模）微生物在生物技术中被广泛应用，下列有关说法正确的是（
）
A．天然微生物能用于传统发酵但不能用于发酵工程
B．灭菌能杀死微生物的芽孢，而消毒不能杀死芽孢
C．有的微生物灭活后能使细胞膜上的物质重新排布
D．微生物能为重组DNA 技术提供两种“分子工具”
5、（2024·河北沧州·三模）在利用泡菜坛为容器制作泡菜时，泡菜坛盖盖好后，需向坛盖
边沿的水槽中注满水。下列相关叙述正确的是（ ）
A．泡菜发酵初期，乳酸菌进行有氧呼吸大量增殖
B．泡菜发酵过程中泡菜坛制造无菌环境且利于排气
C．可从泡菜汁中筛选耐高盐、耐强碱的优良乳酸菌
D．工业化生产泡菜时发酵设备需严格灭菌后再接种
6、（辽宁省部分学校2024 年高三临考押题考试（三模））某生物活动小组分别用3 种不
同浓度的食盐制作泡菜，该活动小组记录的亚硝酸盐含量与发酵天数的关系如图所示。下
列说法正确的是（ ）
A．该实验自变量只有发酵时间，因变量是亚硝酸盐含量
B．检测亚硝酸盐含量的目的是了解乳酸菌的生长状况
C．泡菜腌制过程中，腌制时间过短和食盐用量过少都可能导致亚硝酸盐含量增加
D．泡菜制作时，发酵液表面可能会产生一层白膜，该膜是由乳酸菌繁殖形成的
7、（2024·辽宁沈阳·三模）辽宁盛产南国梨，以南果梨为主要原料制酒，开创了世界“果
2
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粮混合固态发酵酒”之先河，该酒以果香为体、粮香为魂。下列叙述错误的是（ ）
A．“果粮混合固态发酵酒”的发酵全过程均需严格的灭菌操作
B．制作该酒所需的酵母菌的代谢类型为异养兼性厌氧型
C．将南国梨先用清水冲洗再去除果柄，沥干后用于发酵
D．南国梨和粮食中的多种糖类作为发酵的物质和能量来源
8、（2024·辽宁沈阳·三模）下列操作方法与使用目的不一致的是（ ）
A．干热灭菌法——耐高温和需保持干燥物品的灭菌
B．巴氏消毒法——牛奶等不耐高温液体的消毒
C．平板划线法——分离并统计培养基上的活菌数目
D．过滤、沉淀的方法——发酵产品中菌体的分离
9、（2024 届辽宁省高三联考三模）人类有意无意地利用微生物发酵制作果酒或其他食品，
已经有几千年的历史。下列关于传统发酵技术的叙述正确的是（ ）
A．制作泡菜时加入的“老汤”中含有纯度较高的酵母菌时加速发酵进程
B．酵母菌和醋酸杆菌均以无丝分裂的方式进行增殖
C．酿制果酒和果醋的发酵过程中控制的通气情况相同
D．以果酒制作果醋时，发酵液产生的气泡量明显少于制作果酒时产生的气泡量
10、（2024 届辽宁省高三·三模）蛋白S 为菌株C（一种细菌）的分泌产物，可被广泛应用
于医药、食品和化工工业。某小组通过实验比较不同碳源对菌体生长和蛋白S 产量的影响，
结果如表所示。下列说法正确的是（ ）
碳源
细胞干
重/（g·L-1）
蛋白S 产
量/（g·L-1）
葡萄糖
3.12
0.15
淀粉
0.01
0
制糖废液
2.30
0.18
A．菌株C 的培养基的pH 一般要调节至酸性
B．培养基中碳源物质浓度越高，菌株合成蛋白S 越多
C．适合菌体生长和生产蛋白S 的碳源均为葡萄糖
D．菌株C 可能因不能合成淀粉酶而无法利用淀粉
11、（2024·辽宁抚顺·三模）实验小组用抗生素对大肠杆菌进行筛选，如图所示。挑取抑
菌圈边缘的菌落进行扩增培养，然后重复图示实验进行筛选，最后定量分析连续传代细菌
群体中抑菌圈的半径变化，结果如表所示。下列有关叙述错误的是（ ）
3
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抗生素
抑菌圈半径平均值/cm
抑菌圈缩小百分比
第一代筛选
第二代筛选
0
0
0
青霉素
0．95
0．74
22%
四环素
1．31
0．70
47%
阿奇霉
素
0．19
0
100%
A．用稀释涂布平板法将大肠杆菌接种在筛选培养基上
B．抑菌圈边缘生长的菌落可能对抗生素不敏感
C．用抗生素多代培养对大肠杆菌有定向选择作用
D．第二代培养后，阿奇霉素能完全抑制大肠杆菌的繁殖
12、（2024·吉林·三模）大酱是东北的传统美食，可以生食、或做烹饪的调料。在附唐时
期就有记载，制作流程如下： 黄豆煮熟→搅碎→做酱块→酱块晚上放到荫凉的地方， 白
天放到阳光下面晒→盐水煮开凉透→酱块弄碎装入酱缸→用细纱布盖上放在阳光下发酵→
每天用酱粑子打粑， 每天早晚各一次，直到酱发透。以下叙述不正确的是（ ）
A．家庭制作大酱需要接种特定微生物才能进行发酵
B．制作过程中加盐不仅能调味， 还能杀灭杂菌
C．黄豆富含蛋白质，制酱时分解成小分子的肽和氨基酸，可以平衡饮食结构
D．对大酱中某微生物进行纯培养，可用平板划线法和稀释涂布平板法进行接种
13、（2024·黑龙江大庆·三模）研究者从某种海洋微生物中分离出一种新的抗真菌药物，
为治疗真菌感染提供新思路。下列有关药物研制或生产的叙述错误的是（ ）
A．按海水的成分和浓度添加相应的无机盐配置的培养基具有选择作用
B．用接种环在固体培养基表面对样品连续划线、逐步稀释分散，可获得纯培养物
4
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C．用固体培养基培养微生物获得大量次生代谢产物，可用于抗真菌活性检测
D．获得目的菌株后，可进一步利用基因工程的方法调节代谢途径进而提高药物产量
14、（2024·黑龙江双鸭山·三模）为纯化菌种，在鉴别培养基上接种尿素分解菌，培养结
果如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A．用平板划线法接种可获得图示培养结果，接种过程中接种环需要灼烧3 次
B．用高压蒸汽灭菌法灭菌结束后，待培养基冷却至50℃左右开始倒平板操作
C．可在该培养基上生存并使酚红指示剂变红的菌落可能是固氮菌形成的
D．用液体培养基能提高目的菌对营养物质的利用效率以及分离的成功率
15、（2024·黑龙江双鸭山·三模）家常酱菜采用了乳酸自然发酵的传统工艺，无添加剂，
但生产周期长。下列有关叙述正确的是（ ）
A．酱菜制作初期通入无菌空气，后期密封，有利于乳酸菌繁殖和发酵
B．酱菜制作前要对发酵用的器皿及蔬菜进行严格灭菌以避免杂菌污染
C．乳酸自然发酵属于多菌种发酵，生产周期较长
D．酱菜发酵过程中加入抗生素可以抑制杂菌生长
16、（2024·江苏南通·三模）发酵乳中含有丰富的乳酸菌。科研人员利用CaCO3-MRS 培养
基（蛋白胨10g、牛肉膏粉5g、酵母膏粉 4g、葡萄糖 20g、磷酸氢二钾 2g、乙酸钠5g、
柠檬酸三铵2g、硫酸镁 0.2g、硫酸锰0.05g、琼脂15g、碳酸钙25g）从发酵乳中分离纯化
乳酸菌，相关叙述正确的是（ ）
A．能为乳酸菌提供碳源的有蛋白胨、牛肉膏粉、酵母膏粉、葡萄糖、琼脂
B．接种前应将发酵乳置于121℃、100 kPa 条件下处理15~30 min
C．涂布接种后应在培养皿盖上标记接种日期和接种者，并倒置培养
D．挑取溶钙圈直径与菌落直径比值较大的菌落进一步划线纯化
17、（2024·江苏南通·三模）南通某兴趣小组按下图流程制作苹果醋。相关叙述正确的是
（ ）
A．菌种甲、乙都具有线粒体，都能进行有氧呼吸
5
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B．加糖的目的是直接为菌种甲、乙提供碳源和能源
C．菌种甲、乙发酵过程中，发酵液pH 下降、温度上升
D．发酵结束后取苹果醋加酸性重铬酸钾检测发酵效果
18、（2024·安徽·三模）生活废纸的主要成分是木质纤维，也可用于生产乙醇。下图是工
业上利用微生物分解纤维素生产乙醇的基本工艺流程，下列叙述正确的是（ ）
A．环节①需要的微生物可用纤维素为唯一氮源的选择培养基从土壤中分离获得
B．环节④常用的菌种是酵母菌，其代谢类型是异养需氧型
C．环节⑤所得发酵产物需经过滤、沉淀等措施，才能获得纯化的乙醇
D．利用秸秆来生产乙醇，可以提高能量利用率
19、（2024·安徽·三模）除了少数人工培育的蘑菇外，很多野生蘑菇味道更加鲜美醇厚。
可以通过微生物培养技术来纯化可食用野生蘑菇菌种，大致步骤如下：培养基配制→培养
基灭菌→子实体分离或孢子分离等→培养→转管纯化培养→母种→扩大培养。下列相关叙
述正确的是（ ）
A．纯化野生蘑菇菌种的过程都要用选择培养基
B．一般都是采用干热灭菌法对培养基进行灭菌
C．用稀释涂布平板法接种菌种后培养皿要倒置
D．培养基灭菌后调到弱酸性利于蘑菇菌种生长
20、（2024·安徽马鞍山·三模）青霉素的发现和产业化生产推动了发酵工程在医药领域的
应用和发展。下列有关青霉素发酵工程的叙述正确的是（ ）
A．发酵过程中，pH 会改变，进而影响菌种的生长繁殖
B．发酵完成后，需对菌体进行破碎，才能分离得到青霉素相关产物
C．产青霉素的菌种代谢类型为异养厌氧型，发酵过程中需隔绝氧气
D．产青霉素的菌种为原核生物，发酵液的pH 应调成中性偏碱
21、（2024·安徽马鞍山·三模）我国卫生部门规定饮用水标准，1ml 自来水检出的菌落总数
不可以超过100 个，不得检出总大肠菌群。为检验某品牌冰激凌中大肠杆菌含量是否超标，
研究小组利用配制的伊红-亚甲基蓝琼脂培养基进行检测。下列有关叙述正确的是（ ）
A．检测中用到的接种方法为平板划线法
B．检测中冰激凌原液应进行适当的梯度稀释
C．检测中应设一个不接种的平板作为阴性对照和一个接种大肠杆菌的平板作为阳性对
6
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照
D．检测的培养基为固体培养基，大肠杆菌在该培养基上会形成红色且有金属光泽的菌
落
22、（2024·福建宁德·三模）微生物与人类生产生活密切联系，下列关于微生物的叙述正
确的是（ ）
A．培养霉菌时一般需要将培养基调至中性或弱碱性
B．醋酸菌在有氧条件下发酵产生乙酸
C．肺炎链球菌、酵母菌和支原体都有细胞壁
D．颤蓝细菌的叶绿体中含有与光合作用有关的酶和色素
23、（2024·福建宁德·三模）某兴趣小组欲从土壤中筛选出分解尿素的细菌，下列相关实
验操作正确的是（ ）
A．所用培养基及接种工具分别用巴氏灭菌和灼烧灭菌
B．采集的土壤样本需经多次稀释后才能划线接种
C．培养该细菌时，可选用牛肉膏蛋白胨固体培养基
D．根据菌落的颜色、形状和大小等进行初步判断
24、（2024·福建·三模）分离、纯化细菌的实验中，平板划线法接种（甲）及培养结果
（乙）如图所示，a、b、c、d 是划线的四个区域。下列叙述正确的是（ ）
A．实验所用培养基一般用干热灭菌法进行灭菌
B．图中d 区域的划线操作是从c 区域划线的末端开始的
C．为了防止杂菌污染，接种环灼烧后立即蘸取菌液进行划线
D．图示划线接种过程中至少需要对接种环灼烧5 次
25、（2024·福建漳州·三模）福建红曲酒闻名于世，红曲酒是用红曲霉菌发酵制成，生产
流程如图。有关说法错误的是（ ）
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A．糖化是指淀粉水解，为红曲霉菌提供发酵的底物
B．开耙有助于控制发酵温度和及时通气
C．煎酒会使酶失活，终止发酵活动，不利于红曲酒的储存
D．工业化生产红酒过程中要随时监测发酵液中的微生物数量和产物浓度
26、（2024·福建泉州·三模）下列关于利用微生物制作传统发酵食品的叙述，正确的是（
）
A．制作泡菜时，用水密封泡菜坛的目的是促进酵母菌的无氧呼吸
B．制作果酒时，定时松瓶盖的目的是适当促进酵母菌的有氧呼吸
C．制作果醋时，可以往果酒中加入醋酸杆菌将乙醇转化为乙酸
D．利用传统发酵技术制作食品时，都需要对菌种进行纯化培养
27、（2024·福建泉州·三模）兴趣小组对枯草芽孢杆菌进行纯培养，结果如图。下列叙述
正确的是（ ）
A．实验采用稀释涂布平板法进行接种
B．接种时，顺序应为①→②→③→④
C．培养时，应将接种后的平板倒置
D．获得单菌落的理想区域是②区域
28、（2024·江西南昌·三模）红曲霉作为发酵食品常用菌种在我国具有悠久的历史，接种
在一定量大米上通过发酵可得到红曲，红曲可用于酿酒、制醋、做豆腐乳的着色剂和调味
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剂等。红曲霉耐酸，古人接种时及培养过程中，会加入醋酸或明矾水调节酸度。下列说法
正确的是（ ）
A．蒸煮过的大米可为红曲霉的生长提供碳源和氮源
B．红曲霉接种到刚蒸煮好的热米饭上有利于提高酶的活性和发酵菌的代谢
C．接种时及培养过程中加入醋酸或明矾水调节酸度可抑制所有杂菌生长
D．接种的大米发酵时红曲霉种群数量呈现“J”形增长
29、（2024·江西南昌·三模）产志贺毒素大肠杆菌（STEC）是一种通过产生志贺毒素引起
人畜共患病的肠道致病菌。大多食品材料中携带STEC，因此食品加工中面临如何减少该
病原体和降低毒性的问题。毒素对细胞的损害程度是细菌产毒能力的指标，下图为对三种
STEC （ST462、ST378、D3146） 产毒能力的研究结果。下列分析错误的是（ ）
A．该实验目的为探究盐浓度和温度对三种STEC 产毒能力的影响
B．在检测三种STEC 产毒能力时，应保持各种菌的数量相同
C．无法判断25℃和37℃哪种温度更适合ST378 生长繁殖
D．根据实验结果分析，在食品加工中应适当提高盐浓度和温度
30、（2024·江西九江·三模）阅读下列材料，完成下面小题
某同学在进行动物细胞培养实验中遇到困惑：第一天将恶性的肿瘤细胞转入培养瓶中培养，
第二天在换液时发现约有近三分之一的细胞死亡，第三天发现死亡细胞的比例增多，第四
天发现培养的细胞基本死亡。该同学严格按照无菌操作要求，在培养过程中也未出现杂菌
污染。关于细胞的死因成为了该同学的困惑。
23．为保障动物细胞培养的无菌环境，下列叙述错误的是（ ）
A．操作者的双手在实验前需要用医用酒精消毒，以杀死所有的杂菌
B．需要对操作器皿及培养基进行灭菌处理，例如进行高压蒸汽灭菌
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C．可选择在酒精灯附近进行相关的实验操作
D．在培养液中可添加少量抗生素，以防止杂菌污染
24．有关细胞死亡的原因推测不合理的是（ ）
A．在培养细胞时，操作不当，造成细胞损伤
B．在配置培养基时，未加入血清，造成细胞所需营养不足
C．细胞分裂能力有限，大量细胞出现衰老和凋亡
D．细胞的培养环境不适宜，引起细胞大量死亡
31、（2024·山东潍坊·三模）传统发酵技术是人类在生活过程中，对微生物的运用。下列
叙述错误的是（ ）
A．米酒制作：发酵液中的气泡来源于酵母菌的无氧呼吸
B．果醋制作：醋酸菌在有氧条件下将糖或酒精转化为乙酸
C．腐乳制作：发酵温度为15～18℃，可抑制细菌、酵母菌和曲霉的生长
D．酸奶制作：乳酸菌厌氧发酵产生乳酸，使奶具有特别风味
32、（2024·山东潍坊·三模）青霉素是产黄青霉菌在有氧条件下利用发酵工程生产的一种
非常重要的抗菌药物，下列叙述错误的是（ ）
A．用稀释涂布平板法可以对产黄青霉菌菌种进行选育并计数
B．判别产黄青霉菌是否混入乳酸菌，应在无氧环境中培养稀释涂布的平板
C．发酵罐内的发酵液不仅要保持一定的溶氧量，还需pH 小于7
D．发酵结束后，采用过滤与沉淀的方法获得青霉素
33、（2024 山东省齐鲁名校第三次联合检测）野樱莓酒由野樱莓经破碎压榨、过滤、发酵
等多道工序酿造而成。下列关于野樱莓酒传统发酵流程的说法中，正确的是（ ）
A．野樱莓酒主要是酵母菌在 35℃、无氧条件下进行酒精发酵的结果
B．野樱莓酒发酵前，发酵瓶和榨汁机等需用体积分数为 70%的酒精灭菌
C．发酵过程中需定期打开瓶盖，目的是及时排出酵母菌细胞呼吸释放的 CO2
D．长时间开封的野樱莓酒产生酸味主要是醋酸菌将乙醇转化为乙酸导致的
34、（2024 山东省齐鲁名校第三次联合检测）研究人员用刚果红培养基从蔗渣堆肥中筛选、
分离出 4 株具有降解纤维素能力的真菌（图示①~④）。下列说法正确的是（ ）
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A．图中培养基应在灭菌后调节pH
B．④号真菌降解纤维素的能力最强
C．实验中应将接种后的平板直接静置培养
D．可使用平板划线法对 4 种菌株进行培养和计数
35、（2024·湖北·三模）油炸臭豆腐闻着臭吃着香，是有名的风味小吃。臭豆腐制作时需
要将豆腐浸入含乳酸菌、毛霉菌等微生物的卤汁中发酵。下列叙述正确的是（ ）
A．制作臭豆腐时，豆腐相当于微生物生长的培养基
B．乳酸菌发酵产生了乳酸和二氧化碳，需定期排气
C．豆腐发酵时需要密封处理，有利于毛霉菌的生长
D．豆腐发酵时不会有杂菌的繁殖，故无需严格灭菌
36、（2024·湖北襄阳·三模）科学家按照如图所示的流程分离牛瘤胃中的纤维素分解菌，
并在刚果红培养基平板上筛选到有透明降解圈的菌落。下列叙述正确的是（ ）
A．微生物的纯培养物是指不含有任何代谢废物的微生物培养物
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B．空白平板使用前已进行灭菌，接种后未长出菌落的平板可以直接丢弃
C．过程②所使用的接种方法是稀释涂布平板法，统计结果往往比实际值偏低
D．培养基表面均加入一层无菌的石蜡主要是为了防止杂菌的污染
37、（2024·湖北襄阳·三模）某垃圾处理厂发现一种有害的、难以降解的化合物X，科学
家用化合物X、磷酸盐、镁盐和微量元素等配制了培养基，成功地筛选出能高效降解化合
物X 的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示，下列叙述错误的是（ ）
A．在培养基中加入化合物X 的目的是筛选出能降解化合物X 的细菌
B．培养若干天后，应选择培养瓶中化合物X 含量低的培养液，接入新的培养液中连
续培养，使目的菌的数量增多
C．若要研究目的菌的生长规律，可挑取单个菌落进行液体培养，再采用平板划线方法
进行计数
D．将目的菌用于环境保护实践时，还要对目的菌进行研究，检测其是否会产生对环境
有害的代谢物
38、（2024·湖南衡阳市祁东县·三模）牛奶中富含多种营养物质，但牛奶也是多种病原体
的传播载体，比如牛奶中可能存在金黄色葡萄球菌，该菌是一种高度耐盐的兼性厌氧微生
物，可引起人类肺炎和肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板（培养基中添加适量血液）
上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡
萄球菌，操作流程如图所示。下列说法错误的是（ ）
A．配制好的肉汤培养基应采用湿热灭菌法进行灭菌
B．振荡培养有利于微生物的生长繁殖
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C．在血平板上的接种方法是稀释涂布平板法
D．用7.5%NaCl 肉汤培养基进行培养可增加金黄色葡萄球菌的数量
39、（2024·广东茂名·三模）某科研小组欲分离及培养若干种微生物用来处理剩菜剩饭、
骨头、菜根菜叶等湿垃圾。从土壤中筛选淀粉分解菌时，向培养基加碘液染色后，培养基
上出现了A、B、C 三种菌落，结果如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．可选择菌落B 中的微生物用来处理菜根菜叶等湿垃圾
B．实验结束后，合适的菌株被保存下来，其余的可以直接丢弃
C．菌落A 的出现说明培养基中混入了淀粉以外的其他碳源
D．该实验用到的接种工具为涂布器，接种前应将其没在盛有酒精的烧杯中
40、（2024·广东·三模）有些单细胞藻类、酵母菌和细菌等微生物菌体干重中的蛋白质含
量可达到40%~80%，这些通过发酵获得的大量微生物菌体，即是单细胞蛋白，将其添加到
饲料中可提高饲料的蛋白质含量。下列叙述正确的是（ ）
A．在发酵之前需要对菌种进行扩大培养
B．培养基必须经过严格的灭菌，发酵设备则只需要消毒处理
C．发酵生产的废弃液可直接排放到外界环境中
D．发酵结束之后，采取适当的提取、分离、纯化等方法获得单细胞蛋白
41、（2024·广东·三模）荧光假单胞菌野生型菌落为平滑型（SM），突变后可产生皱缩型
（WS）和模糊型（FS）菌落。科研人员在液体培养基中静置培养野生型，其种群增长曲
线如图1 所示；在液体培养基中振荡培养野生型，其种群增长曲线如图2 所示。下列叙述
正确的是（ ）
A．静置培养时，增大荧光假单胞菌的接种数量会增大SM 的K 值
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B．静置培养后期，SM 种群数量下降的原因可能与细胞密度过大有关
C．振荡培养时，WS 第4 天后在竞争中占有优势并会保持S 形增长
D．SM 在振荡培养时的突变和适应不利于物种生存
42、（2024·重庆九龙坡·三模）某校生物兴趣小组主要利用乳酸菌制作泡菜，在发酵的初
期，他们发现水槽内经常有气泡产生，请帮他们分析这些气泡产生的主要原因及成分分别
是（ ）
A．因腌制过程中的盐进入蔬菜使蔬菜体积缩小，气体被排出；气体为空气
B．发酵初期活动强烈的是酵母菌，其消耗O2，产生CO2；气体为CO2
C．乳酸菌在发酵过程中产生热量，使坛内温度升高，空气受热膨胀排出；气体为空气
D．乳酸菌是兼性厌氧型微生物，初期进行有氧呼吸产生CO2；气体为CO2
43、（2024·广西玉林·三模）若棒状杆菌中缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，不能在缺少
精氨酸的培养基上正常生长，则称之为精氨酸依赖型菌。野生型棒状杆菌经诱变、筛选获
得精氨酸依赖型菌的过程如图所示，过程①将紫外线照射处理过的菌液接种在甲培养基上，
待培养至菌落不再增加时，将甲培养基中的菌落转移到乙培养基中继续培养得到如图所示
的结果。下列相关叙述正确的是（ ）
A．实验过程中用到的培养基和培养皿必须采用高压蒸汽灭菌法灭菌
B．培养基乙中缺乏精氨酸，是一种选择培养基
C．下一步应从培养基乙中选出A 菌株作为所需菌种
D．紫外线照射还可以导致谷氨酸棒状杆菌发生染色体结构变异
44、（2024·广西柳州·三模）我国古代劳动人民利用发酵技术生产了许多传统食品，如腐
乳、果酒、果醋、泡菜等，下列有关分析，错误的是（ ）
选项
发酵食
品
发酵所需的主要菌种
该菌种分类地位
A
腐乳
毛霉
细菌
B
果酒
酵母菌
真菌
C
果醋
醋酸菌
细菌
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D
泡菜
乳酸菌
细菌
A．A
B．B
C．C
D．D
45、（2024·贵州·三模）酱油是以大豆、小麦或麦麸为原料，依靠微生物发酵而生产的一
种液态调味品。如图展示了某企业通过发酵制作酱油的过程，下列叙述错误的是（ ）
A．米曲霉发酵过程需要通入空气并搅拌，可判断米曲霉属于异养好氧微生物
B．在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌属于真核生物
C．添加的酵母菌在无氧条件下分解葡萄糖的产物是酒精和二氧化碳
D．发酵池中加入的食盐可以抑制杂菌的生长和繁殖
46、（2024·甘肃白银·三模）甜瓣子是豆瓣酱的重要成分，其风味既受蚕豆蛋白分解产生
的氨基酸的影响，也受发酵过程中不同微生物的多种代谢产物的影响，其生产工艺如图所
示。下列相关叙述错误的是（ ）
A．蚕豆中富含蛋白质，经曲霉发酵后，更易于消化吸收
B．制曲的过程有利于曲霉产生蛋白酶
C．蚕豆和面粉可以为微生物的发酵提供碳源和氮源
D．获得豆瓣曲后要进行灭菌处理以抑制杂菌的生长
二、多选题
1、（2024·河北承德·三模）瘤胃微生物移植是将符合要求的供体瘤胃微生物移植到受体动
物的胃中，从而重塑其瘤胃菌群结构，提高反刍动物生产性能或治疗动物疾病。瘤胃微生
物移植包括反刍动物的选择、瘤胃液的采集、瘤胃微生物冻干粉的制备等过程，如图所示。
下列叙述正确的是（ ）
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A．将供体反刍动物按照试验要求进行预饲，以富集瘤胃微生物
B．供体预饲期间以及受体在微生物移植前，不能使用抗生素
C．瘤胃微生物培养基配制完成后需煮沸去除氧气，通入二氧化碳
D．冻干粉溶解并梯度稀释后，平板划线接种于厌氧培养基上可进行计数
2、（2024·河北秦皇岛·三模）土壤中95%以上的磷为植物很难利用的无效磷。解磷菌能够
将磷矿粉等无效磷转化为植物易利用的速效磷。为研究解磷菌的解磷机理，科研人员将磷
矿粉制成培养液，培养从土壤中分离出的2 种解磷菌（M-3-01、B3-5-6），测定培养液的
上清液pH 及其中的速效磷含量，结果如图，下列叙述正确的是（ ）
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A．2 种解磷菌是用只含磷矿粉的培养基分离出来的
B．由图可知，168h 以内M-3-01 解磷能力较强
C．B3-5-6 转化无效磷的能力与培养溶液pH 显著相关
D．据图推测B3-5-6 可能借助分泌酸性物质溶解磷矿粉
3、（辽宁省部分学校2024 年高三临考押题考试（三模））油菜籽中有一种有机化合物
L-5-乙基噁唑烷-硫酮（VOT），可诱发甲状腺疾病。研究发现反刍动物瘤胃中的部分细菌
可以分解VOT，如图是研究人员从瘤胃提取物中分离VOT 分解菌的流程。下列叙述正确
的是（ ）
A．①为了分离得到单菌落，只能使用稀释涂布平板法接种，而不能用平板划线法
B．甲培养基中通常含有碳源、氮源、水和无机盐、琼脂等成分
C．要得到高效分解 VOT 的菌种，需要以 VOT 为唯一的碳源
D．若接种稀释倍数为105的菌液样品0.1mL，培养一段时间后，平板上的菌落数平均
值为50 个，则1 mL 原菌液样品中细菌数为5.0×107个
4、（2024 届辽宁省高三联考三模）由谷氨酸棒状杆菌（好氧细菌）发酵可以得到谷氨酸。
在发酵的过程中，需要不停地进行搅拌，并严格控制发酵条件，以提高谷氨酸的产量和品
质。下列叙述正确的是（ ）
A．发酵过程中添加新的营养液会改变培养条件，不利于增产
B．发酵过程中不停地搅拌可满足菌体对氧气需求和提高原料的利用率
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C．发酵过程中应控制pH，中性和弱碱性条件下有利于谷氨酸的生产和积累
D．利用液体培养基生产谷氨酸，通过平板划线法对谷氨酸棒状杆菌进行计数
三、非选择题
1、（2024 届河北省保定市十校高三下学期三模）酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，
可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为营养进行培养，这样既可减少
污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图
所示为操作流程，请回答下列问题：
(1)配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，并进行 灭菌，
待培养基冷却至约50 ℃时，在酒精灯火焰附近进行 ，待培养基凝固后倒置。
(2)图中③通过观察菌落特征获得各类酵母菌菌落，④用于进一步筛选和纯化的培养基从功
能上分析，特点是 。挑取分离平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线。下列叙述
合理的有 。
a.为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌
b.划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落
c.挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量
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d.图中接种环蘸取一次菌液后划5 次线，灭5 次菌
(3)步骤⑤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和 供应。假设实
验中初步估测图中锥形瓶中酵母菌细胞数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布100μL 稀
释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200 个，则至少应将锥形瓶中的菌液
继续稀释 倍。
2、（2024 届河北省部分高中三模）厨余垃圾常见处理方式为微生物高温堆肥处理和干法
厌氧发酵技术。图1 为高温堆肥时翻堆频率对厨余垃圾重量影响的相关曲线，图2 为干法
厌氧发酵技术流程。回答下列问题：
(1)由图1 可推测高温堆肥时所用主要菌种的代谢类型为 ，翻堆的意义在于
、 。
(2)干法厌氧发酵过程中发酵罐需 ，以保证微生物能充分将厨余垃圾中的有机
物分解成CH4和CO2，该过程产生的沼气可作为能源物质，沼渣可肥田，从能量流动的角
度分析，其意义是 。
(3)与高温堆肥相比，干法厌氧发酵技术中所用的菌种单一、性状优良，这些菌种可以从自
然界中筛选，也可以通过 育种获得。分析从垃圾处理站能筛选出所需目的菌的
理由是 。获得的目的菌可用平板划线法纯化，操作划线时要注意不要将最后一
次的划线 。
(4)为检测筛选出的目的菌的发酵效果，还需对沼渣接种目的菌后进行C/N（碳/氮）比的检
测，理论上，与发酵前相比，发酵后的C/N 比值 ，原因是
。
3、（2024·安徽·三模）利用金属硫蛋白启动子（PCUP1）和绿色荧光蛋白（CFP）基因等
构建重组质粒PCUP9K-CFP，并通过氯化锂法转化毕赤酵母，获得工程菌株，工程菌细胞
及其发酵液中可检出绿色荧光蛋白。发酵液中分别加入不同浓度的铜离子处理2h 后，结果
如图1；分别加入10μmmVL 的铜、铬、镉和砷离子处理2h 后，结果如图2（CK 为对照
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组）。请回答下列问题：
(1)根据图1 结果可知，GFP 基因表达可以被一定浓度的铜离子促进，说明PCUPI 属于
启动子，构建基因表达载体需要的工具酶有 ，重组质粒pCUP9K-GFP 上不需
要携带特殊抗性基因等充当标记基因，理由是 。
(2)培养工程菌的过程中，在接种环节要严格遵从无菌操作，如何确定接种操作达到无菌要
求? 。
(3)含pCUP9K-GFP 的毕赤酵母菌可以指示水体中铜离子的污染程度，理由是 。
用铬、镉和砷离子处理该工程菌的目的是 。
4、（2024·湖南衡阳·三模）白色污染是人们对难降解的塑料垃圾（多指塑料袋）污染环境
现象的一种形象称谓。它是指各类生活塑料制品使用后被弃置成为固体废物，由于随意乱
丢乱扔，难于降解处理，以致破坏环境，严重污染的现象。研究人员从土壤中筛选出能降
解塑料的细菌（目的菌）的流程如图1 所示。回答下列问题。
(1)配制用于目的菌富集的培养基其成分特点是 ，该培养基属于 培养基。
(2)培养过程中需要无菌操作，为避免被杂菌污染，需要注意的事项有 （答出2 点即
可）。
(3)若培养后的平板上菌落过于密集，则应该进一步 ，以便于菌落计数与分离。
(4)将筛选到的菌株用于治理“白色污染”时，有可能造成其他的环境污染问题，原因可能
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是 （答出一点即可）。
(5)为了筛选出高效降解塑料的目的菌，可比较单菌落周围透明圈的大小。实验结果如图2
显示的A~E 五种菌株中， 是最理想菌株。
(6)研究人员欲获取上述目的菌相应基因进行后续研究，该过程中需要用到RT-PCR（反转
录PCR）技术，即以已转录的mRNA 为模板，来获取大量目的基因，一般要加入4 种脱氧
核糖核苷三磷酸（dNTP）而不是脱氧核苷酸的原因是 。研究人员为什么不用普通的
PCR 技术而是选择RT-PCR 来获取相关基因，原因是 。
5、（2024·重庆渝中·三模）某化工厂的污水池中有一种有害的难以降解的有机化合物X，
研究人员用化合物X、磷酸盐、镁盐以及微量元素等配制培养基，成功筛选得到能高效降
解X 的细菌（目的菌），实验的主要步骤如图所示（含化合物X 的培养基不透明）。回答
问题：
(1)培养基中加入化合物X 作为唯一碳源的目的是 。实验过程中进行振荡培养
的作用是 。
(2)实验过程中获得纯净“目的菌”的关键是 。实验人员应该挑取图2 乙中
菌落重复图1 所示实验过程，将固体培养基得到的目的菌重复多次上述图1 过程的目的是
。
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(3)图2 甲所示接种方法是平板划线法，1 是起始区，在图中 （填图中序号）
区域更易获得单菌落；运用该方法接种得到单菌落需要注意的事项有： （答
两点）。
(4)实验人员将一段人工合成的
转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解化合物X 的酶
（酶Y），为了比较酶Y 与天然酶（酶W）降解X 能力的差异，利用含有一定浓度化合物
X 的固体培养基进行实验，请写出简要实验思路： 。
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