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第 5 部分 专生题2物0 技 发 术 酵工 与 程 工 2 程 25
专题 20 发酵工程
学生用书P352
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学生用书P352
考点 1 传统发酵技术
一、传统发酵技术:直接利用原材料中天然存在的微生物 或利用前一次发酵保存下来的面团 卤汁等发酵物中的微生物进行
, 、
发酵 制作食品的技术 传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主 通常是家庭式或作坊式的
、 。 , 。
二、传统发酵食品的制作
1.制作腐乳和泡菜
多种微生物参与了豆腐的发酵 如酵母 曲霉和毛霉等 其中起主要作用的是毛霉
腐乳 菌种 , 、 , 。
毛霉 真核生物 真菌 代谢类型为异养需氧型 营腐生生活
的 :(1) , ;(2) ,
制作
发酵原理 豆腐中的蛋白质被微生物产生的蛋白酶分解成小分子的肽和氨基酸
菌种
泡菜 ——— 原核生物 细菌 常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌 代谢类型为异养厌氧型 营腐生生活
乳酸菌 (1) , ;(2) ;(3) ,
的
制作 酶
发酵原理 乳酸菌无氧呼吸产生乳酸 乳酸 能量
:C6H12O6 →2C3H6O3( )+
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及检测 _U& U UU "!F9U N*
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泡菜 ND !
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的
制作 盐水要煮沸冷却后使用 煮沸的目的是杀灭杂菌 除去氧气 冷却的目的是防止高温杀死蔬菜表面的乳酸
(1) , 、 ;
菌等
注意 。
盐水要浸没全部菜料 目的是为乳酸菌发酵创造无氧环境
事项 (2) , 。
盖好坛盖后 向坛盖边沿的水槽中注满水 原因是阻止空气进入 为乳酸菌发酵提供无氧环境
(3) , , , 。
泡菜 咸而不酸 的原因可能是食盐浓度过高 发酵温度过低等导致泡菜未能正常发酵
(4) “ ” 、
小表达 (选择性必修 改编)泡菜发酵时,常常会向泡菜坛中加入“陈泡菜水”,其原因是 “陈泡菜水”中含有较多的乳酸菌,
3P8
加入“陈泡菜水”相当于接种乳酸菌
。2 26 5年高考3年模拟 B版 生物学(教师用书)
2.制作果酒和果醋
菌种 真核生物 单细胞真菌 代谢类型 异养兼性厌氧型 在有氧和无氧的条件下都能生存 营腐生生活
果酒
——— (1) , ;(2) : ( ), ;
酵母菌 酿酒酵母的最适生长温度约为
的
(3) 28 ℃
制作 发酵原理 酵母菌无氧呼吸产生酒精和 酶 酒精 能量
CO2:C6H12O6 →2C2H5OH( )+2CO2+
菌种
——— 原核生物 细菌 代谢类型为异养需氧型 营腐生生活 多数醋酸菌的最适生长温度为
醋酸菌 (1) , ;(2) , ;(3) 30~35 ℃
果醋
酶
的 当氧气 糖源均充足时 乙酸 能量
(1) 、 :C6H12O6+2O2 →2CH3COOH( )+2H2O+2CO2+
制作 发酵原理 酶
当氧气充足 缺少糖源时 乙酸 能量 直接将乙醇转化为乙醛 再将
(2) 、 :C2H5OH+O2 →CH3COOH( )+H2O+ ( ,
乙醛变为乙酸
)
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果酒
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果醋 0*"" F U
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制作 + % +11U! +/K U, *, U2 _UK
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步骤 *
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葡萄应先冲洗再去除枝梗 避免去除枝梗时葡萄破损 引起杂菌污染
(1) , , 。
瓶中留约 的空间 可为发酵初期酵母菌大量繁殖提供 并防止发酵中产生的 造成发酵液溢出
(2) 1/3 , O2, CO2 。
注意 果酒发酵过程中会产生 使瓶内气压升高 需拧松瓶盖放气 但不要完全打开 否则可能会被杂菌污染
(3) CO2 , , , 。
事项 先酿制果酒再生产果醋的优势
(4) :
先酿制果酒 发酵液能够抑制杂菌生长 有利于提高果醋产率
① , , ;
果酒有利于溶出水果中的风味物质并保留在果醋中
②
考点 2 微生物的培养技术及应用
一、培养基
一般都含有水 碳源 提供碳元素的物质 氮源 提供氮元素的物质 和无机盐等营养物质
、 ( )、 ( )
功能 构成细胞物质 有机碳源既是碳源又是能源
;
碳源 无机碳源 等
培养 来源 (1) :CO2、NaHCO3、CaCO3 ;
有机碳源 糖类 脂质 蛋白质 有机酸 牛肉膏 蛋白胨等
基的 (2) : 、 、 、 、 、
功能 用于合成蛋白质 核酸及其他含氮的物质
成分 氮源 、
来源 无机氮源 硝酸盐 等 有机氮源 蛋白胨 尿素 氨基酸等
(1) :N2、 、NH3 ;(2) : 、 、
生长
微生物自身不能合成或合成量不足 但又是微生物生长和代谢所必需的小分子 如某些维生素 氨基酸 嘌呤 嘧啶等
因子 , , 、 、 、
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培养 6 ')
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基的 B
8.G G .G@
分类
注 与液体培养基相比 固体培养基及半固体培养基还需要加入凝固剂 如琼脂
: , ,
概念 允许特定种类的微生物生长 同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基
,
基础培养基 青霉素 分离酵母菌等真菌
(1) + → ;
选择 无碳源培养基 分离自养微生物
应用 (2) → ;
培养基 实例 无氮源培养基 分离固氮微生物
(3) → ;
以尿素为唯一氮源的培养基 分离分解尿素的细菌
(4) → ;
以纤维素为唯一碳源的培养基 分离纤维素分解菌
(5) →专题20 发酵工程 2 27
续表
在基础培养基中 加入某种特殊的化学物质 这种物质会与某种微生物的代谢物发生反应 产生明显的特
内容 , , ,
征性变化 根据这种特征性变化 将该种微生物与其他微生物区分开来
, ,
伊红 亚甲蓝琼脂培养基鉴别大肠杆菌 菌落呈深紫色 并带有金属光泽
鉴别 (1) — → , ;
应用 加入酚红指示剂的培养基鉴别分解尿素的微生物 菌落周围变成红色
培养基 (2) → ;
实例 加入刚果红的培养基鉴别纤维素分解菌 菌落周围产生透明圈
(3) → 。
注 根据透明圈直径与菌落直径的比值 可以判断纤维素分解菌分解纤维素的能力 比值越大 分解能力
: , , ,
越强
知识归纳 ( )培养乳酸杆菌时,需要在培养基中添加维生素。 ( )培养霉菌时,一般需要将培养基调至酸性。 ( )培养细菌时,
1 2 3
一般需要将培养基调至中性或弱碱性。 ( )培养厌氧微生物时,需要提供无氧的条件。
4
知识拓展 基础培养基、完全培养基和补充培养基
( )基础培养基:含一般微生物生长繁殖所需要的基本物质,仅能满足野生型菌株生长需要的培养基。
1
( )完全培养基:能够满足各种营养缺陷型菌株生长需要的培养基。
2
( )补充培养基:能满足相应的营养缺陷型菌株生长需要的培养基。
3
小表达 ( )[ 湖南, ( )]若从植物根际土壤中筛选分解淀粉的固氮细菌,培养基的主要营养物质包括水和 无机盐、淀粉
1 2023 21 1 。
在液体培养基表面加入凡士林或液体石蜡 可以获得 厌氧型 微生物。
(2) ,
二、无菌技术
定义 使用较为温和的物理 化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物
、
煮沸消毒法 如制作泡菜时将盐水煮沸
消 (1) , ;
常见 巴氏消毒法 如对新鲜牛奶消毒
毒 (2) , ;
方法 化学药物消毒 如用酒精擦手
(3) , ;
紫外线消毒 如细胞培养室 培养箱 接种室 超净工作台等用紫外线消毒
(4) , 、CO2 、 、
定义 使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物 包括芽孢和孢子 注意 灭菌也会使实验所用的生物学材料灭活
, ( : )
湿热灭菌 可用高压蒸汽灭菌锅进行 适用于培养基等的灭菌
(1) :① ;② 。
灭
干热灭菌 使用干热灭菌箱进行 适用于玻璃器皿 如培养皿 金属用具等耐高温的和需要保持干燥的物品
常见 (2) :① ;② ( )、
菌
的灭菌
方法 。
灼烧灭菌 在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧 适用于接种工具 如涂布器 接种环 以及接种过程中的试管口
(3) :① ;② ( 、 )
或瓶口等容易被污染的部位
小表达 ( )(选必 改编)与煮沸消毒法相比,对鲜牛奶采用巴氏消毒法的优点是 可以杀死牛奶中的绝大多数微生物,并
1 3 P11
且基本不破坏牛奶中的营养成分
。
( )(选必 改编)利用紫外线消毒时,增强消毒效果的方法有 紫外线照射前,适量喷洒苯酚或煤酚皂溶液等消毒液
2 3 P11 。
三、微生物的纯培养
概念 由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物 获得纯培养物的过程就是纯培养
,
.(
接种
89
平板
微生 %&%8 ; 8" 3
划线
物的 ?A
法
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方法
; 8" 3 0 3 3+ 0
U,+5K+8E /FU8
889 892 28 5年高考3年模拟 B版 生物学(教师用书)
续表
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2/F "
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接种 稀释
微生 涂布
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物的 平板
方法 法 f
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实例:酵母 F U . + .+
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菌的纯培养
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注意 要将冷却凝固的平板倒置 以防止冷凝水滴落在培养基上造成污染
: ,
知识归纳 平板划线中不同阶段燃烧接种环的目的
( )第一次操作:杀死接种环上原有的微生物;
1
( )每次划线之前:杀死上次划线后接种环上残留的菌种,使本次划线的菌种直接来源于上次划线的末端;
2
( )划线结束后:杀死接种环上残存的菌种,避免微生物污染环境和感染操作者。
3
四、微生物的计数
用具 血细胞计数板 酵母菌 霉菌孢子等计数 或细菌计数板 细菌等计数
显微镜 (1) : ( 、 ) ( );
误差 计数活菌数时 该实验结果较实际结果偏大 原因是观察时无法区分死菌和活菌 将死菌计入
直接计 (2) : , , ,
总数
数法 ;
改进措施 可在计数前使用台盼蓝染液染色 死细胞会被染成蓝色 活细胞不着色
(3) : , ,
方法
活菌计
原理 当样品的稀释度足够高时 培养基表面生长的一个单菌落 来源于样品稀释液中的一个活菌
数 (1) : , , ;
——— 计算公式 每克样品的菌落数 C V M C 某一稀释度下 平板上生长的平均菌落数 V 涂布的稀释
稀释涂 (2) : =( / )× ( : , ; :
液体积 M 稀释倍数
布平 ; : );
误差 该实验结果较实际结果偏小 原因是当两个或多个细胞连在一起时 平板上只能观察到一个菌落
板法 (3) : , ,
只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素 脲酶能催化尿素分解产生 可以作为细菌生长所需的
(1) , NH3,NH3
原理 氮源
;
利用以尿素为唯一氮源的培养基可从土壤中分离出能分解尿素的细菌
(2)
实例:
分离 用稀释涂布平板法分离分解尿素的细菌
土壤中
分解尿 升高可使酚红指示剂变红 脲酶可将尿素分解成氨 使培养基 升高 故在培养基中加入酚红指示剂
鉴别 pH , , pH , ,
素的 若指示剂变红 则说明该细菌能分解尿素
,
细菌的
培养 恒温培养箱中培养 一般选择 4 5 6 倍稀释的稀释液进行平板培养
。 1×10 、1×10 、1×10
分离与
计数 一般选取菌落数为 的平板进行计数
计数 30~300
选取菌落数目稳定时的记录作为结果 为了防止因培养时间不足而遗漏菌落数目
注意 (1) → ;
在同一稀释度下 应至少对 个平板进行重复计数 取平均值 可减少偶然误差
事项 (2) , 3 , → ;
设置空白平板作对照组 排除平板被杂菌污染的可能性
(3) →
小表达 [ 全国 , ( )]单个细菌在平板上会形成菌落,研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分
2019 Ⅲ 37 3
不同种的微生物,原因是 在一定的培养条件下,不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征
。专题20 发酵工程 2 29
考点 3 发酵工程及其应用
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基本 /+(7U 3'
环节
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食品工业 生产传统发酵产品 食品添加剂 酶制剂等
(1) : 、 、 ;
应用 医药工业 生产抗生素 氨基酸 激素 免疫调节剂 疫苗等
(2) : 、 、 、 、 ;
农牧业 生产微生物肥料 微生物农药 微生物饲料 如单细胞蛋白 等
(3) : 、 、 ( )
*M 3
实例: F . S7 "1 U3 F F 8 D$A
啤酒的 "1F & 6U - .1 2 ?U 9 +E 2D "*'U3
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7 & "1F . 2" & *U2 F F J F
工业化 " "%8 1 $0 F
生产
主发酵 完成酵母菌的繁殖 需要氧气 大部分糖的分解和代谢物的生成
流程 (1) : ( )、 ;
后发酵 主发酵后发酵液不适合饮用 需在低温 密闭环境下储存一段时间进行后发酵 才能形成澄清 成熟的啤酒
(2) : , 、 , 、
知识归纳 单细胞蛋白
( )以淀粉或纤维素的水解液、制糖工业的废液等为原料,通过发酵获得大量的微生物菌体,即单细胞蛋白。
1
( )单细胞蛋白应用实例:在青贮饲料中添加乳酸菌,可以提高饲料的品质,使饲料保鲜,动物食用后还能提高免疫力。
2
学生用书P193
考点 1 传统发酵技术 于线粒体
生产白酒 啤酒和果酒的原材料不同 但发酵过程中起主要
1( 湖北, , 分)制醋 制饴 制酒是我国传统发酵技术 D. 、 ,
. 2024 1 2 、 、 。 作用的都是酵母菌
醋酸菌属于好氧型原核生物 常用于食用醋的发酵 下列叙
, 。 5( 重庆, , 分)人类很早就能制作果酒 并用果酒进一
述错误的是 D . 2021 25 15 ,
( ) 步发酵生产果醋
食用醋的酸味主要来源于乙酸 。
A. 人们利用水果及附着在果皮上的 酵母 菌 在
醋酸菌不适宜在无氧条件下生存 (1) , 18~25 ℃
B. 无氧条件下酿造果酒 再利用醋酸菌在
醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶 (18~30 ℃)、 ; 30~
C. ,有氧 条件下 将酒精转化成醋 乙 酸酿得果醋 酿造
葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解发生在线粒体内 35 ℃ , ( ) 。
D. 果醋时 得到了醋 乙 酸产率较高的醋酸菌群 为进一步纯化
2( 山东, , 分)以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的 , ( ) ,
. 2023 12 2 4 获得优良醋酸菌菌种 采用的接种方法是 稀释涂布平板法
个处理 沸盐水冷却后再倒入坛中 盐水需要浸没全部菜 ,
:① ;② (平板划线法)
料 盖好坛盖后 向坛盖边沿的水槽中注满水 检测泡菜 。
;③ , ;④ 先酿制果酒再生产果醋的优势有 多选 填编号
中亚硝酸盐的含量 下列说法正确的是 C (2) ①③ ( , )。
。 ( ) 先酿制果酒 发酵液能抑制杂菌的生长 有利于提高果醋的
主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死 ① , ,
A.①
产率 酿制果酒时形成的醋酸菌膜 有利于提高果醋的产
的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌 ② ,
B.②
率 果酒有利于溶出水果中的风味物质并保留在果醋中
是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入 ③
C.③
果酒中的酒精含量对果醋的醋 乙 酸产率会产生一定的
可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低
(3) ( )
D.④
3 M ( 山东, , 分)果酒的家庭制作与啤酒的工业 影响 某技术组配制发酵液研究了初始酒精浓度对醋 乙 酸
。 ( )
. 2023 20 3
含量的影响 结果如图
化生产相比 共同点有 AB
, 。
, ( )
都利用了酵母菌无氧呼吸产生酒精的原理
A.
都需要一定的有氧环境供发酵菌种繁殖
B.
发酵前都需要对原料进行灭菌
C.
发酵结束后都必须进行消毒以延长保存期
D.
4( 湖北, , 分)关于白酒 啤酒和果酒的生产 下列叙述
. 2022 11 2 、 ,
错误的是 C
( )
在白酒 啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的氧气
A. 、
白酒 啤酒和果酒酿制的过程也是微生物生长繁殖的过程
B. 、
葡萄糖转化为乙醇所需的酶既存在于细胞质基质 也存在 该技术组使用的发酵液中 除酒精外还包括的基本营养物质
C. , ,
2 30 5年高考3年模拟 B版 生物学(教师用书)
有 氮源、无机盐、水(任写两种) 填写两种 据图可知 醋 筛选到目标菌的条件组合是 D
( )。 , ( )
乙 酸发酵的最适初始酒精浓度是 ( ) 酒精浓 点时取样 尿素氮源培
( ) 5%~7% 6% ; A.a 、
度为 时醋 乙 酸含量最低 此时 若要尽快提高醋 乙 养基
10% ( ) , , ( )
酸含量 可采取的措施有 适当降低初始酒精浓度,增加氧气 点时取样 角蛋白氮源培
, B.b 、
供给,适当提高温度 填写两个方面 养基
( )。
点时取样 蛋白胨氮源培
考点 2 微生物的培养技术及应用 C.b 、
养基
6 M ( 黑、吉、辽, , 分)某些香蕉植株组织中存在 点时取样 角蛋白氮源培
. 2024 19 3 D.c 、
的内生菌可防治香蕉枯萎病 其筛选流程及抗性检测如图 养基
, 。
下列操作正确的是 CD 11( 浙江 月选考, , 分)某同学想从泡菜汁中筛选耐
( ) . 2023 1 19 2
高盐乳酸菌 进行了如下实验 取泡菜汁样品 划线接种于一
FK " 8 " -. , : ,
定 浓度梯度的培养基 经培养得到了单菌落 下列叙
NaCl , 。
" 83 ' /F" 述正确的是 C
( )
*88"3 培养基需偏碱性
A.
泡菜汁需多次稀释后才能划线接种
B.
*88 需在无氧条件下培养
C.
分离得到的微生物均为乳酸菌
D.
" 12( 辽宁, , 分)利用某种微生物发酵生产 油脂
. 2023 13 2 DHA ,
在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内 从感病植株上采 可获取 一种不饱和脂肪酸 如图为发酵过程中物质
A. , DHA( )。
集样品 含量变化曲线 下列叙述错误的是 D
。 ( )
将采集的样品充分消毒后 用蒸馏水冲洗 收集冲洗液进行
B. , ,
无菌检测
将无菌检测合格的样品研磨 经稀释涂布平板法分离得到
C. ,
内生菌的单菌落
判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的
D.
病原菌菌斑大小
7( 河北, , 分)为筛选能平衡肠道菌群和降解胆固醇的
. 2023 12 2
乳酸菌 下列相关实验设计错误的是 B
, ( ) 油脂的产量与生物量呈正相关
从酸奶和泡菜中采样分离乳酸菌 A.DHA
A. 温度和溶解氧的变化能影响 油脂的产量
平板倒置培养为筛选乳酸菌创造无氧环境 B. DHA
B. 葡萄糖代谢可为 油脂的合成提供能量
对目的菌株进行胆固醇降解能力的测定 C. DHA
C. 油脂的合成对氮源的需求比碳源高
检测目的菌株对消化道环境的耐受力 D.12~60 h,DHA
D. 13( 湖北, , 分)灭菌 消毒 无菌操作是生物学实验中常
8( 辽宁, , 分)细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗 . 2022 5 2 、 、
. 2023 9 2 见的操作 下列叙述正确的是 D
粒物表面的细菌形成的 利用空气微生物采样器对某市人员密 。 ( )
, 动 植物细胞 的提取必须在无菌条件下进行
集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度 菌落数 3 A. 、 DNA
( /m )。 微生物 动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止
下列叙述错误的是 D B. 、
( ) 污染
采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理
A. 为防止蛋白质变性 不能用高压蒸汽灭菌法对牛肉膏蛋白
细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置 C. ,
B. 胨培养基进行灭菌
同一稀释度下至少对 个平板计数并取平均值
C. 3 可用高压蒸汽灭菌法对实验中所使用的微量离心管 细胞
稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高 D. 、
D. 培养瓶等进行灭菌
9( 重庆, , 分)垃圾分类有利于变废为宝 减少环境污
. 2023 9 3 , 14( 江苏, , 分)下列是某同学分离产脲酶菌的实验设
染 如图为分类后餐厨垃圾资源化处理的流程设计 下列叙 . 2022 3 2
。 。 计 不合理的是 D
述错误的是 D , ( )
( ) 选∙择∙农∙田或公园土壤作为样品分离目的菌株
A.
在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源
B.
适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落
C.
可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌株
压榨出的油水混合物可再加工 生产出多种产品 D.
A. , 15 M ( 辽宁, , 分) 苯乙醇是赋予白酒特征风
添加的木屑有利于堆肥体通气 还可作为某些微生物的碳源 . 2022 18 3 β⁃
B. , 味的物质 从某酒厂采集并筛选到一株产 苯乙醇的酵母
中需要添加合适的菌种 才能产生沼气 。 β⁃
C.X , 菌应用于白酒生产 下列叙述正确的是 ACD
为保证堆肥体中微生物的活性 不宜对堆肥体进行翻动 。 ( )
D. , 所用培养基及接种工具分别采用湿热灭菌和灼烧灭菌
10( 广东, , 分)研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效 A.
. 2023 10 2 通过配制培养基 灭菌 分离和培养能获得该酵母菌
降解羽毛 蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌 根据堆肥温度 B. 、 、
、 。 还需进行发酵实验检测该酵母菌产 苯乙醇的能力
变化曲线 如图 和选择培养基筛选原理来判断 下列最可能 C. β⁃
( ) , 该酵母菌的应用有利于白酒新产品的开发
D.
专题20 发酵工程 2 31
16( 江苏, , 分)为纯化菌种 在鉴别培养基上划线接种纤 假设一: 菌释放可溶性物质溶解 菌。 假设二: 菌被 菌
. 2020 19 2 , P A P A
维素降解细菌 培养结果如图所示 下列叙述正确的是 B 刺激后释放可溶性物质溶解 菌。 (两假设任写一个即可)
, 。 ( ) A
19( 全国乙, , 分)某研究小组设计了一个利用作物秸
. 2023 37 15
秆生产燃料乙醇的小型实验 其主要步骤是 先将粉碎的作
。 :
物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中 喷水浸润 接种菌 培
, 、 T,
养一段时间后 再用清水淋洗秸秆堆 清水淋洗时菌 不会
, ( T
流失 在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌 进行乙醇发酵 酒
), , (
精发酵 实验流程如图所示
倒平板后需间歇晃动 以保证表面平整 )。 。
A. ,
图中 区的细菌数量均太多 应从 区挑取单菌落
B. Ⅰ、Ⅱ , Ⅲ
该实验结果因单菌落太多 不能达到菌种纯化的目的
C. ,
菌落周围的纤维素被降解后 可被刚果红染成红色
D. ,
17( 江西, , 分)聚对苯二甲酸乙二醇酯 是一种
. 2024 17 12 (PET)
聚酯塑料 会造成环境污染 磷脂酶可催化 降解 为获
, 。 PET 。
得高产磷脂酶的微生物 研究人员试验了 种方法 回答下 回答下列问题
, 2 。 。
列问题 在粉碎的秸秆中接种菌 培养一段时间后发现菌 能
: (1) T, T
方法 从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物 够将秸秆中的纤维素大量分解 其原因是 菌 能分泌分解
(1) 1 。 , T
以磷脂酰乙醇胺 一种磷脂类物质 为唯一碳源制备 选择 纤维素的酶(纤维素酶)
( ) 。
培养基 可提高该方法的筛选效率 除碳源外 该培养基中 采用液体培养基培养酵母菌 可以用淋洗液为原料制备
, 。 , (2) ,
至少还应该有 氮源 水 无机盐 等营养物质 培养基 培养基中还需要加入氮源等营养成分 氮源的主要
、 、 。 , ,
方法 采用 转基因(或重组 或基因工程) 技术定 作用是 为酵母菌合成蛋白质、核酸等物质提供原料 答出
(2) 2 DNA ( 1
向改造现有微生物 以获得高产磷脂酶的微生物 除了编码 点即可 通常 可采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌
, 。 )。 , 。
磷脂酶的基因外 该技术还需要 限制酶 连接酶 载 在使用该方法时 为了达到良好的灭菌效果 需要注意的事
, 、 DNA 、 , ,
体 等 分子工具 项有 排净锅内冷空气,使锅内均匀升温;蒸汽压力必须保持
“ ”。
除了上述 种方法之外 还可以通过 诱变育种 技术非 一段时间;灭菌包不宜过大过紧,以免影响蒸汽的渗入等
(3) 2 ,
定向改造现有微生物 筛选获得能够高产磷脂酶的微生物 答出 点即可
, 。 ( 2 )。
将酵母菌接种到灭菌后的培养基中 拧紧瓶盖 置于适宜
将以上获得的微生物接种到鉴别培养基 在牛肉膏蛋白
(3) , ,
(4) (
胨液体培养基中添加 的琼脂粉和适量的卵黄磷脂 平板
温度下培养 发酵 拧紧瓶盖的主要目的是 创造无氧环境,
、 。
2% )
上培养 可以通过观察卵黄磷脂水解圈的大小 初步判断微
利于酒精发酵,同时可防止杂菌(好氧菌)污染 但是在酵
。
, ,
母菌发酵过程中 还需适时拧松瓶盖 原因是 排出瓶内气体
生物产磷脂酶的能力 但不能以水解圈大小作为判断微生物
, , 。
,
发酵液中的乙醇可用 酸性重铬酸钾 溶液检测
产磷脂酶能力的唯一依据 从平板制作的角度分析 其原因
。
。 ,
可能是 培养基的卵黄磷脂的含量、 和灭菌是否彻底等都 本实验收集的淋洗液中的 (纤维素的分解产物)葡萄糖
(4)
pH
会影响水解圈的大小 可以作为酵母菌生产乙醇的原料 与以粮食为原料发酵生产
。
。
18( 北京, , 分)自然界中不同微生物之间存在着复杂 乙醇相比 本实验中乙醇生产方式的优点是 不需要消耗粮食,
,
. 2023 16 12
的相互作用 有些细菌具有溶菌特性 能够破坏其他细菌的
降低粮食短缺风险;促进秸秆的回收利用,提高能量利用率
。
。 ,
结构使细胞内容物释出 科学家试图从某湖泊水样中分离
。 考点 3 发酵工程及其应用
出有溶菌特性的细菌
。 20( 山东, , 分)在发酵过程中 多个黑曲霉菌体常聚集
用于分离细菌的固体培养基包含水 葡萄糖 蛋白胨和琼 . 2024 14 2 ,
(1) 、 、
成团形成菌球体 菌球体大小仅由菌体数量决定 黑曲霉利
脂等成分 其中蛋白胨主要为细菌提供 碳源、氮源 和维生 , 。
,
用糖类发酵产生柠檬酸时需要充足的氧 菌体内铵离子浓
素等 。
。
度升高时 可解除柠檬酸对其合成途径的反馈抑制 下列说
菌通常被用作溶菌对象 研究者将含有一定浓度 , 。
(2)A 。 A
法错误的是 D
菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上 凝固形成薄层 培 ( )
, 。
相同菌体密度下 菌球体越大柠檬酸产生速率越慢
养一段时间后 薄层变浑浊 如图 表明 菌大量繁殖 A. ,
, ( ), A 。
发酵中期添加一定量的硫酸铵可提高柠檬酸产量
B.
发酵过程中 下降可抑制大部分细菌的生长
C. pH
发酵结束后 将过滤所得的固体物质进行干燥即可获得柠
D. ,
为分离出具有溶菌作用的细菌 需要合适的菌落密度 因 檬酸产品
(3) , ,
此应将含菌量较高的湖泊水样 梯度稀释 后 依次分别涂布 21( 江西, , 分)井冈霉素是我国科学家发现的一种氨
, . 2024 11 2
于不同的浑浊薄层上 培养一段时间后 能溶解 菌的菌落 基寡糖类抗生素 它由吸水链霉菌井冈变种 一种放线
。 , A , (JGs,
周围会出现 透明圈 采用这种方法 研究者分离 培养并 菌 菌体呈丝状生长 发酵而来 在水稻病害防治等领域中得
。 , 、 , ) ,
鉴定出 菌 到广泛应用 下列关于 发酵生产井冈霉素的叙述 正确
P 。 。 JGs ,
为探究 菌溶解破坏 菌的方式 请提出一个假设 该 的是 D
(4) P A , , ( )
假设能用以下材料和设备加以验证 ∙∙ 可发酵生产井冈霉素 因为它含有能够编码井冈霉素
。 A.JGs ,
主要实验材料和设备 菌 菌 培养基 圆形滤纸小片 离 的基因
:P 、A 、 、 、
心机和细菌培养箱 接入发酵罐前需要扩大培养 该过程不影响井冈霉素
。 B.JGs ,
2 32 5年高考3年模拟 B版 生物学(教师用书)
的产量 糯米 蒸熟 与大米 蒸煮 的目的是利于糖化和灭菌
A. “ ” “ ”
提高 发酵培养基中营养物质的浓度 会提高井冈霉素 发酵原理是利用真菌的无氧呼吸与细菌的有氧呼吸
C. JGs , B.
的产量 醋酸发酵过程中经常翻动发酵物 可控制发酵温度和改善
C. ,
稀释涂布平板法不宜用于监控 发酵过程中活细胞数 通气状况
D. JGs
量的变化 啤酒酿造流程中适当增加溶解氧可缩短发酵时间
D.
22( 贵州, , 分)酵母菌 是一种产果胶酶工程菌 为 25( 山东, , 分)青霉菌处在葡萄糖浓度不足的环境中
. 2024 14 3 W 。 . 2022 14 2
探究酵母菌 的果胶酶产量与甲醇浓度 的关 时 会通过分泌青霉素杀死细菌 以保证自身生存所需的能
W (Ⅰ<Ⅱ<Ⅲ) , ,
系 将酵母菌 以相同的初始接种量接种到发酵罐 在适 量供应 目前已实现青霉素的工业化生产 关于该生产过
。 W , 。 ,
宜条件下培养 结果如图所示 下列叙述正确的是 C 程 下列说法错误的是 D
, 。 ( ) , ( )
U 发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖
-
6
N
A
B.
.
可用深层通气液体发酵技术提高产量
U
F C. 选育出的高产菌株经扩大培养后才可接种到发酵罐中
6 青霉素具有杀菌作用 因此发酵罐不需严格灭菌
D. ,
26( 湖北, , 分)废水 废料经加工可变废为宝 某工厂
. 2022 14 2 、 。
KUIU 利用果糖生产废水和沼气池废料生产蛋白质的技术路线如
发酵罐中接种量越高 酵母菌 的K值越大 图所示 下列叙述正确的是 A
A. , W 。 ( )
甲醇浓度为 时 酵母菌 的果胶酶合成量最高
B. Ⅲ , W
前 三组实验中 甲醇浓度为 时 产果胶酶速率最高
C.72 h , , Ⅱ ,
后 是酵母菌 用于工业生产中收集果胶酶的最佳时期
D.96h , W
23 E ( 河北, , 分)乳酸链球菌素 是乳酸链
. 2023 18 3 (Nisin) 该生产过程中 一定有气体生成
球菌分泌的一种抗菌肽 研究者对 发酵生产过程相关 A. ,
。 Nisin 微生物生长所需碳源主要来源于沼气池废料
指标进行了检测 结果如图 下列叙述正确的是 ABC B.
, 。 ( )
该生产工艺利用微生物厌氧发酵技术生产蛋白质
C.
沼气池废料和果糖生产废水在加入反应器之前需要灭菌
D.
处理
27 M ( 山东, , 分)啤酒的工业化生产中 大麦经
. 2022 20 3 ,
发芽 焙烤 碾磨 糖化 蒸煮 发酵 消毒等工序后 最终过
、 、 、 、 、 、 ,
滤 调节 分装 下列说法正确的是 ACD
、 、 。 ( )
用赤霉素处理大麦 可使大麦种子无须发芽就能产生 淀
适度提高乳酸链球菌接种量可缩短 发酵生产周期 A. , α⁃
A. Nisin 粉酶
发酵的中后期适量补加蔗糖溶液可促进菌体生长
B.
焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚并进行灭菌
向发酵罐内适时适量添加碱溶液可提高 产量
B.
C. Nisin
发酵结束后主要通过收获并破碎菌体以分离获得 产品 糖浆经蒸煮 冷却后需接种酵母菌进行发酵
D. Nisin C. 、
24 E ( 江苏, , 分)某醋厂和啤酒厂的工艺流程如 通过转基因技术可减少啤酒酵母双乙酰的生成 缩短啤酒
. 2023 16 3 D. ,
图所示 酒曲含有霉菌 酵母菌 乳酸菌 醋醅含有醋酸菌 的发酵周期
。 、 、 ; ;
糖化即淀粉水解过程 下列相关叙述正确的有 ACD
。 ( )
学生用书P199
1( 九省联考江西卷, )我国劳动人民利用传统发酵技术 腐乳和果醋都是在厌氧条件下发酵产生的传统食品
. 2024 10 B.
制作出大量美味食品 如酱油 腐乳 豆豉等 传承和发扬了中 水封泡菜坛的目的是隔绝空气 确保坛内乳酸菌发酵处于
, 、 、 , C. ,
华优秀传统饮食文化 随着科技的发展 现代发酵工程在食品 无氧环境
。 ,
领域的应用更加广泛 下列关于发酵的叙述 错误的是 B 泡菜 咸而不酸 是因为盐水浓度过高 抑制乳酸菌发酵所致
。 , ( ) D. “ ” ,
工业化生产啤酒时 酵母菌的繁殖主要在主发酵阶段完成 2( 辽宁鞍山二模, )山西老陈醋作为传统发酵食醋的代
A. , . 2024 11
专题20 发酵工程 2 33
表之一 其酿制过程一般包括制曲 淀粉糖化 酒精发酵 醋酸 7( 河北衡水一模, )某研究小组设计了一个利用秸秆中
, 、 、 、 . 2024 12
发酵四个阶段 下列叙述错误的是 A 的纤维素生产乙醇的实验 实验流程如图所示 下列叙述错
。 ( ) , 。
酿制过程中的发酵微生物均为原核生物 误的是 D
A. ( )
大曲中某些微生物可促进淀粉糖化过程 ""
B. .8" #!""
酒精发酵后需要提高温度进行醋酸发酵
C. 1-
通气条件下醋酸菌将酒精转变为乙酸
+/.
D.
3( 一联, )用蓝莓作为原料酿造的果酒和果醋 富含
. 2024 T8 12 , %8. F
花青素 维生素和微量元素等 被称为 液体黄金 具有养颜 """ F
、 , “ ”, F 8
美容 降压降脂等功效 下列有关叙述正确的是 C
、 。 ( ) 菌 属于腐生生物 能分泌纤维素酶分解秸秆中的纤维素
参与果酒和果醋发酵的主要微生物均为异养需氧型 A. A ,
A. 淋洗液主要为酵母菌的生长繁殖提供碳源和能源等
现代化发酵工程的中心环节是产物的分离与提纯 B.
B. 在发酵阶段不能打开瓶盖以保持厌氧环境完成酒精的生成
在果酒发酵基础上进行果醋发酵需要改变温度和通气条件 C.
C. 发酵结束后可通过过滤 沉淀等方法获得乙醇
对果醋发酵液进行稀释涂布平板计数 统计得到的数值往 D. 、
D. , 8 M ( 辽宁沈阳一模, )如图是研究人员从石油污
往比活菌实际数目多 . 2024 19
染的土壤中筛选高效降解石油的细菌 目的菌 的流程图 下
4( 河北石家庄二模, )关于培养基的叙述 错误的是 B ( ) 。
. 2024 13 , ( ) 列叙述正确的是 BCD
诱导愈伤组织的培养基中需添加有机小分子 ( )
A. F
在含有纤维素的培养基中加入刚果红 可作为纤维素分解
B. , . .
菌的选择培养基 E . E
分离自生固氮菌的无氮源培养基 在灭菌前应将培养基调 .
C. , E8
整为中性或弱碱性 8 8 U
" *-! F
动物细胞培养基中常加入血清 为动物细胞增殖提供特殊
D. ,
营养物质
培养皿等用具在使用前后均需在 热空气中
5( 四川成都二诊, )成都水井坊是我国古老的酿酒遗址 A. 160 ℃~170 ℃
. 2024 7 。 消毒
其特色之一是在小麦 高粱中先后拌入糖曲和酒曲 发酵后进
、 , 应选择 中培养瓶内 石油含量 显著降低的培养液继续
行 量质摘酒 以如图所示的生铁 天锅 把酒头摘出后 B. ② “ ” ③
“ ”——— “ ” , 操作
边摘边尝 优中选优 下列有关说法错误的是 B
, 。 ( ) 中可采用平板划线法对筛选得到的目的菌进行分离纯化
J C.④
,! F$ 若要研究目的菌生长规律 可用培养液培养目的菌并用细
D. ,
菌计数板计数
F
& 9( 九省联考甘肃卷, )我国十分重视对环境污染的治
! . 2024 21
理 随着生物技术的发展 利用微生物降解污染物成为环境治
F , ,
理的重要方法之一 工业污水中含有的多环芳烃化合物会造
。
成农田土壤污染 请围绕污染土壤修复的微生物筛选 回答
。 ,
下列问题
小麦 高粱中含有的淀粉为大分子化合物
。
A. 、
为了获得能降解多环芳烃化合物的菌株 配制的培养基中
天锅 材料中只含金属元素
(1) ,
B.“ ”
多环芳烃化合物 是唯一碳源 培养基配制好后需立即灭菌
如图中 摘酒 操作是指通过蒸馏分离出乙醇溶液
; ,
C. “ ”
目的是 防止杂菌污染 在目标菌株分离纯化过程中必须使
通过 量质摘酒 可得到不同酒精度的酒
;
D. “ ”
6( 山东青岛一模, )黄桃精酿啤酒的制作工艺与普通啤 用固体培养基
,
原因是 只有在固体培养基上才能形成单菌
. 2024 14
落,而液体培养基不能
酒有所不同 生产工艺流程为 麦芽 粉碎 糖化 过滤 煮
。
, : → → → →
在分离纯化过程中 土壤样品经梯度稀释后再涂布平板
沸 主发酵 后发酵 添加黄桃汁 低温冷藏 成品 罐
(2) , ,
→ → ( )→ → → 原因是 防止浓度过高,不便于分离菌落 如果分离纯化得
装 下列说法正确的是 D
。
。 ( )
到的菌株不是纯培养物 除稀释涂布平板法之外 还可以采用
利用大麦作原料时 淀粉是酵母菌的直接碳源
, ,
A. ,
平板划线 法进一步分离纯化
啤酒发酵过程中大部分糖的分解和代谢物的生成都在后发
。
B.
为进一步提高菌株降解多环芳烃化合物的效率 可采用物
酵阶段完成
(3) ,
理化学 如紫外线 亚硝酸钠等 等诱变方法进行微生物育种
糖化是让麦芽糖分解形成糖浆 煮沸能够使酶失活及对糖
( 、 ) ,
C. ,
其原理是 基因突变 也可采用 基因工程 等技术定向改造
浆灭菌
;
菌株
精酿 啤酒发酵完成后 通常不需要进行过滤和消毒处理
。
D.“ ” ,
学生用书P201
1( 安徽合肥二模, )人们很早就掌握了酿制果酒的方法 并 酿制的果酒能抑制杂菌生长 有利于提高果醋产率
. 2024 14 , C. ,
用果酒进一步发酵产生果醋 下列有关说法正确的是 C 可用酸性重铬酸钾检测果醋发酵过程中产生的乙酸
。 ( ) D.
果酒和果醋发酵所利用的微生物都是原核生物 2( 江西南昌二模, )江西有很多传统发酵技术制作出的
A. . 2024 10
由果酒发酵转为果醋发酵只需要适当提高温度 美食 如南酸枣果醋 贵溪捺菜 李渡烧酒 吉安霉鱼等都是名
B. , 、 、 、
2 34 5年高考3年模拟 B版 生物学(教师用书)
动一方的特产 下列关于发酵技术的叙述 正确的是 A .F
。 , ( )
992
醋酸菌最适生长温度在 八月份南酸枣开始收
A. 30 ℃~35 ℃, 342 -952
获 正是酿南酸枣果醋的好时候 .FF .FF
, 8
贵溪捺菜是将芥菜揉搓 晾晒后配以佐料密封存储约 天 = F
B. 、 60 L +
后制成的 其酸味主要源于乙酸 992
, 342 ,J"1
C. 李 其 渡 制作 烧 全 酒 过 以 程 大 应 米 严 和 格 高 隔 粱 绝 为 空 原 气 料 , 保 经 证 发 无 酵 氧 、 蒸馏等步骤制成 , 3 ! 4 ? 2 F + F 8 = L " 1 F
, L F
342 J"1
已知霉鱼的制作工艺和腐乳相同 可推测其中起主要作用
D. , /. 36;+ "1
的是曲霉
注 酵母增殖的适宜温度为 适宜 为 酵
3( 河北石家庄一模, )啤酒是以大麦为主要原料经酵母 : 28~32 ℃, pH 4.0~5.0;
. 2024 13 母发酵的适宜温度为 适宜 为
菌发酵制成的 下列叙述错误的是 B 24~35 ℃, pH 5.0~5.8
。 ( ) 面包酵母的增殖能促进纤维二糖水解及淀粉合成
用赤霉素处理大麦 可以使大麦种子无须发芽就能产生 A.
A. , α⁃ 生产单细胞蛋白时选择 的条件为宜
淀粉酶 B. 26 ℃、pH5.5
本生产过程最宜在不加通气和搅拌的啤酒发酵罐中进行
使用耐热的酿酒酵母 不会降低发酵时冷凝的成本 C.
B. , 生产前培养基高压蒸汽灭菌的条件可为
加大酵母菌种的接种量 可缩短生产发酵周期 D. 121 ℃、20 min
C. , 7( 广东广州二模, )柑橘酸腐病是由白地霉引起的柑橘
酵母菌的繁殖 大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发 . 2024 21
D. 、 储藏期常见的病害之一 抗菌肽是一种抑菌活性强 无环境
酵阶段完成 。 、
污染的生物多肽 目前已用于多种农业病菌的防治 研究人
4( 九省联考黑龙江、吉林卷, )鸡蛋表面污染的细菌会逐 , 。
. 2024 8 员研究了抗菌肽对白地霉的抑菌效果 并且对其作用机制进
渐侵入蛋内 缩短鸡蛋保质期 对某地不同季节及不同养殖 ,
, 。 行了探究 回答下列问题
模式下生产的鸡蛋取样 按每克鸡蛋用 无菌生理盐水清 。 :
, 1 mL 利用基因工程合成抗菌肽时 基本流程 克隆目的基因
洗鸡蛋表面 收集清洗液 培养计数结果如表 注 取 (1) , : →
, , ( : 0.1 mL 导入枯草杆菌 筛选菌种 诱导抗菌肽表达 分离纯化 功
菌液涂布平板 下列叙述错误的是 A → → → →
)。 ( ) 能研究 利用 技术克隆目的基因的过程中 将温度冷却
。 PCR ,
菌株数(个·g-1)
至 的目的是 使引物与模板链结合
季节 55~60 ℃ 。
半封闭式养殖模式 全封闭式养殖模式 白地霉从柑橘中获得其生长繁殖所需的水 无机盐 碳源和
(2) 、 、
氮源 等营养物质
夏季 4 3 。
3.92×10 7.24×10
为研究抗菌肽对白地霉的抑菌效果 现用无菌打孔器在果
冬季 4 4 (3) ,
7.60×10 1.24×10 实相同部位打孔 每个打孔处接种相同体积的处理液 比较
, , 15
表中数据是对清洗液稀释 2 倍后涂布平板获得的 天后的病斑直径 各组处理及结果见表
A. 1×10 。 。
稀释涂布平板法得到的鸡蛋表面菌株数比实际数略少
B. 组别
比较两种养殖模式可知鸡蛋表面的细菌主要来自环境 1 2 3 4 5
C.
接种一 抗菌肽溶液 先加入抗菌 抗菌肽溶液
冬季鸡舍更需要消毒以减少鸡蛋表面的细菌污染
D.
定体积 与病原菌孢 肽溶液 与病原菌孢
5 M ( 山东青岛一模, )柠檬酸是一种广泛应用的 接种处 ,2 h
. 2024 20
的病原 子悬浮液混 后接种病原 子悬浮液混
食品酸度调节剂 如图为研究人员以红薯粉为原料经黑曲霉 理方式 X
。
菌孢子 合后 直 接 菌孢 子 悬 合 培养
发酵生产柠檬酸的简要流程图 下列说法错误的是 BD , 2 h
。 ( )
悬浮液 接种 浮液 后接种
U8 FF
I
天后
U I
15
S L . 病斑直
8. 41.3 13.9 29.3 28.7 11.2
径
/mm
" # $
表中数据表明抗菌肽对白地霉有一定的抑菌效果 且抑菌效
黑曲霉与生产果醋和腐乳时所用主要微生物的代谢类型 ,
A. 果与抗菌肽 病原菌孢子悬浮液接种顺序有关 表中 为 先
相同 、 , X
接种病原菌孢子悬浮液, 后再加入抗菌肽溶液 与第
将菌种接种至 培养基时 浸泡在酒精中的涂布器使用前 2 h 。 2
B. A , 组相比 第 组抑菌效果更好的可能原因是 相比第 组,第
需在火焰上灼烧 , 5 2 5
组混合后培养 ,使抗菌肽与病原菌孢子充分接触,更有效
将菌种转接至 培养基的目的是增加黑曲霉菌种数量 2 h
C. B 发挥作用
若发酵罐 中的原料为大豆粉 可利用黑曲霉水解大豆中 。
D. C , 一般情况下 电导率和离子浓度呈正相关 通过测量溶液
的淀粉制成酱油 (4) , ,
电导率可以反映出溶液中离子浓度的大小 研究人员将白地
6 M ( 九省联考黑龙江、吉林卷, )为保障粮食安 。
. 2024 18 霉孢子与抗菌肽在无菌水中混合 测定电导率 培养一段时间
全 我国科研人员以富含纤维素的农业残渣 秸秆 为原料 利 , ,
, ( ) , 后 再次测定电导率 结果发现电导率明显升高 据此推测抗
用基因工程改造面包酵母使其表面携带相关酶 可同时高效 , , ,
, 菌肽抑制白地霉孢子的作用机制可能是 抗菌肽破坏病原菌
生产人工淀粉和单细胞蛋白 部分生产工艺如图 下列叙述
。 。 孢子的细胞膜,细胞内容物释放
正确的是 AD 。
( )