文档文本内容
2026 年高考第二次模拟考试（广西专用）
高三生物
（考试时间：75 分钟 试卷满分：100 分）
（适用地区：广西）
注意事项：
1.答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在试卷、答题卡上。
2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如
需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡
上，写在本试卷上无效。
3.考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
一、选择题:本大题共16 小题，共40 分。第1~12 小题，每小题2 分;第13~16 小题，每小
题4 分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1．（社会热点）梅花鹿感染大肠杆菌后会出现腹泻、脱水甚至死亡，使用抑制细菌细胞壁
形成的某种抗生素可达到抑菌效果。下列叙述正确的是（ ）
A．梅花鹿心肌细胞和大肠杆菌细胞都含有核糖体和中心体
B．大肠杆菌细胞与自身组织、器官共同起作用
C．原核细胞是梅花鹿生命活动的基本单位，梅花鹿的生命活动离不开细胞
D．抑制大肠杆菌细胞壁形成的抗生素对支原体一般不起作用
【答案】D
【分析】原核生物：无以为核膜为界限的细胞核；除支原体以外均有细胞壁，具有的细胞
壁主要成分是肽聚糖；只含核糖体这一种细胞器。
【详解】A、大肠杆菌细胞为原核细胞，不含中心体，梅花鹿心肌细胞和大肠杆菌细胞都
含有核糖体，A 错误；
B、大肠杆菌是单细胞生物，不含有组织和器官，B 错误；
C、梅花鹿的遗传和生命活动都以真核细胞为基础，原核细胞不是梅花鹿遗传的基本单位，
C 错误；
D、支原体不具有细胞壁，因此抑制细胞壁形成的抗生素对支原体不起作用，D 正确。
故选D。
2．（联系生产实践）产黄青霉菌生产青霉素的发酵流程如下图所示，其中“补料”是指补
充培养基，其成分有花生饼粉、玉米浆、葡萄糖、磷酸二氢钠等。下列关于该发酵过程的
叙述，错误的是（ ）
A．对产黄青霉菌分离纯化时采用的接种方法是稀释涂布平板法
B．“母种培养”时采用液体培养基有利于增加产黄青霉菌的数量
C．产黄青霉菌为异养需氧型真菌，发酵过程中添加的磷酸二氢钠仅有补充P 元素的作
用
D．因为环境条件会影响青霉素的形成，发酵过程中需要向主发酵罐添加pH 调节液
【答案】C
【分析】稀释涂布平板法统计菌落数目：①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面
生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测
出样品中大约含有多少活菌。
【详解】A、由图中平板上菌落的分布可推知，分离纯化菌种时采用的接种方法是稀释涂
布平板法，A 正确；
B、由于发酵过程中需要的菌种数量大，因此将分离后的菌种先进行“母种培养”，采用
液体培养基有利于增加产黄青霉菌的数量，B 正确；
C、培养基中含有花生饼粉、玉米浆、葡萄糖等有机碳源,且发酵过程中需要通入无菌空气,
可推知产黄青霉菌的代谢类型为异养需氧型,磷酸二氢钠是培养基中的无机盐之一,除此之外
还可以作为缓冲剂调节培养基的pH，C 错误；
D、环境条件会影响微生物的生长、繁殖和发酵产物（即青霉素）的形成，所以要严格控
制，发酵过程中需要向主发酵罐添加pH 调节液，D 正确。
故选C。
3．（生态热点）大丽花为菊科大丽花属，是多年生草本植物。大丽花为世界名花之一，除
具观赏价值外，还具有药用价值。大丽花在栽培过程中易受病毒感染，造成品质退化。研
究小组尝试通过植物组织培养技术获得脱毒苗，操作流程如图所示。下列相关叙述正确的
是（ ）
A．应选取大丽花植株无病毒的茎尖作为外植体，并用酒精溶液浸泡30min
B．过程①为再分化，目的是使细胞失去原特有的结构和功能，该过程无需光照
C．过程②的实质是基因选择性表达，该过程只进行有丝分裂，不进行细胞分化
D．2 号和3 号培养基中细胞分裂素与生长素用量的比值分别为等于1 和大于1
【答案】D
【分析】图示分析，①为外植体脱分化形成愈伤组织过程，②为愈伤组织经过再分化形成
丛壮苗的过程，③为丛壮苗在生根培养基中形成试管苗过程。
【详解】A、茎尖病毒很少或几乎不含病毒，作为外植体培养脱毒苗，外植体需要在酒精
中浸泡30s，A 错误；
B、过程①为外植体经过脱分化过程形成愈伤组织，目的是使细胞失去原特有的结构和功
能，该过程不需要光照，B 错误；
C、过程②为再分化过程，实质是基因选择性表达，该过程既进行有丝分裂，也进行细胞
分化，C 错误；
D、脱分化过程所用的培养基细胞分裂素与生长素用量的比值等于1，发芽培养基中细胞分
裂素与生长素用量的比值大于1，D 正确。
故选D。
4．（新考向）动物学家考察某牧区后，认为当地鹿群处于增长高峰期，今后还能增长十几
年才会停止。动物学家预测种群未来动态的信息更主要来自（ ）
A．鹿群的年龄结构
B．鹿群的出生率和死亡率
C．该牧区的气候条件
D．鹿群的性别比例
【答案】A
【分析】种群的特征：种群的密度、种群的出生率和死亡率、种群的年龄结构、种群的性
别比例。其中最基本的数量特征是种群密度，出生率和死亡率决定种群密度，年龄结构预
测种群密度，性别比例影响种群密度。
【详解】A、种群的年龄结构能够预测种群未来的数量变化，A 正确；
B、出生率和死亡率直接决定种群数量的变化，不是预测种群未来动态信息的来源，B 错误；
C、气候条件会影响种群的数量，但不能预测未来的种群数量，C 错误；
D、种群的性别比例会影响种群密度的变化，但无法预测种群数量的未来动态变化，D 错
误。
故选A。
5．（新考向）中国人历来把兰花看作是高洁典雅的象征，并与“梅、竹、菊”并列，合称
“四君子”。但兰花自然繁殖率极低，利用植物组织培养的方法可以快速繁殖兰花。下列
叙述不正确的是（ ）
A．过程①容易受到培养条件中诱变因素的影响而产生突变
B．过程③不需要更换培养基，但需要增加光照
C．兰花不同部位的细胞经培养获得的②的核基因数目可能不同
D．组培苗移植前需用流水清洗掉根部的培养基，再转移到消过毒的珍珠岩等环境中
【答案】B
【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官
或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、
无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。
【详解】A、过程①是离体的组织细胞形成愈伤组织的脱分化过程。在植物组织培养过程
中，培养细胞一直处于不断增殖状态，容易受到培养条件中诱变因素（如射线、化学物质
等）的影响而产生突变，A 正确；
B、过程③是愈伤组织再分化形成幼苗的过程。在植物组织培养的不同阶段，对营养物质
和植物激素的需求不同，所以需要更换培养基。再分化过程中，幼苗要进行光合作用，因
此需要增加光照，B 错误；
C、兰花不同部位的细胞，如体细胞和生殖细胞等，其核基因数目是不同的。经培养获得
的②（愈伤组织）的核基因数目与外植体的细胞类型有关，所以不同部位细胞经培养获得
的②的核基因数目可能不同，C 正确；
D、组培苗移植前需用流水清洗掉根部的培养基，防止培养基滋生杂菌影响组培苗生长，
然后再转移到消过毒的珍珠岩等环境中，D 正确。
故选B。
6．如图表示人体的特异性免疫过程，请据图判断下列说法正确的是（ ）
A．⑤⑥两种免疫依次表示体液免疫和细胞免疫
B．能特异性识别抗原的细胞有a、b、c、d、f
C．在细胞免疫中，靶细胞参与b 细胞的活化过程
D．体液免疫与细胞免疫各自有其独特的作用，又巧妙配合、密切合作
【答案】D
【详解】A、⑤是细胞免疫，⑥是体液免疫，A 错误；
B、能特异性识别抗原的细胞有f（细胞毒性 T 细胞）、d（B 细胞）、b（辅助性T 细
胞）、g（记忆 T 细胞）、i（记忆 B 细胞）；而a（吞噬细胞）识别抗原不具有特异性，
B 错误；
C、在细胞免疫中，是辅助性 T 细胞分泌的细胞因子参与细胞的活化过程，而非靶细胞，
C 错误；
D、体液免疫通过抗体 “中和” 或 “标记” 病原体，细胞免疫通过细胞毒性 T 细胞裂
解靶细胞，二者各自有独特作用，又相互配合（如细胞免疫为体液免疫提供辅助），D 正
确。
故选D。
7．下图为机体初次感染某病毒后，体内病毒RNA、活病毒、两类相应抗体（IgG 和IgM）
的浓度变化。下列叙述错误的是（ ）
A．第28 天时机体基本康复
B．与核酸检测相比，抗体检测能做到早期诊断
C．与IgM 相比，IgG 对机体有更持久的保护能力
D．机体的 B 淋巴细胞和T 淋巴细胞能识别这种病毒
【答案】B
【分析】分析题图：病毒入侵后，最先可以检测到病毒及其RNA，机体发生免疫反应后先
出现IgM 抗体，之后再出现IgG 抗体。
【详解】A、第28 天时体内病毒RNA，IgM 处于不可检测水平，活病毒没有，表明机体基
本康复，A 正确；
B、据图可知，抗体产生的时间晚于核酸出现的时间，所以检测核酸能做到早期诊断，B 错
误；
C、据图可知，IgG 存在的时间大于IgM，所以与IgM 相比，IgG 对机体有更持久的保护能
力，C 正确；
D、辅助性T 细胞、B 淋巴细胞、记忆T 细胞和记忆B 细胞都能识别这种病毒，即机体的B
淋巴细胞和T 淋巴细胞能识别这种病毒，D 正确。
故选B。
8．酪氨酸酶缺陷会导致白化病，现对某白化病患的家庭成员进行基因测序，发现了两个酪
氨酸酶基因（TYR）的突变位点，如下图。M1 和M2 位点均在TYR 非模板链的编码区，
M1 在第649 位发生C→T 的碱基替换，M2 在第1037 位发生G→T 的碱基替换，任意一个
位点的突变都会导致表达得到的酪氨酸酶失去活性。各家庭成员中仅女儿1 患病，其他个
体均正常，若不考虑其他突变与互换，下列叙述正确的是（ ）
位点
父亲
母亲
儿子
女儿1
女儿2
M1
杂合
野
生
野生
杂合
待测
M2
野生
杂
合
野生
杂
合
待测
注：杂合表示在该位点检测到野生型和突变型两种序列，野生表示在该位点仅检测到野生
型序列。
A．父亲会产生失活的酪氨酸酶，该酶的第217 位氨基酸一定发生改变
B．女儿2 两个位点的检测结果中至少有一个杂合的概率为1/2
C．女儿1 与不携带致病突变的正常个体婚配，后代不会患白化病
D．人群中只有同时携带M1、M2 位点突变的个体才会表现出白化病
【答案】C
【分析】DNA 分子中发生碱基的替换、增添或缺失，而引起的基因碱基序列的改变，叫做
基因突变。
【详解】A、C→T 的替换可能导致密码子对应氨基酸改变（如CAA→UAA，UAA 为终止
密码子，会提前终止翻译，导致酶失活），但不一定是氨基酸改变（如密码子简并性可能
使氨基酸不变）；题干中“一定发生改变” 表述错误，A 错误；
B、父亲会产生杂合和野生两种配子，各占1/2，母亲会产生杂合和野生两种配子，各占
1/2，女儿2 两个位点的检测结果中至少有一个杂合情况为父亲提供杂合配子母亲提供野生
配子或父亲提供野生配子母亲提供杂合配子或父母双方同时提供杂合配子，故概率为
1/2×1/2+1/2×1/2＋1/2×1/2=3/4，B 错误；
C、任意位点需纯合突变才会致病（但女儿1 的配子中突变型为杂合，与正常个体野生型
结合后，子代均为杂合或野生纯合，无纯合突变），子代不会患白化病，C 正确；
D、题干明确条件，任意一个位点的突变（杂合或纯合）即可导致酶失活，进而致病。例
如M1 杂合（C/T）或纯合（T/T）、M2 杂合（G/T）或纯合（T/T）均会致病，D 错误。
故选C。
9．图1 表示兴奋通过神经——骨骼肌接头引起骨骼肌收缩的部分过程。突触小泡释放乙酰
胆碱（Ach）作用于A，产生动作电位，从而引起肌肉收缩。图2 是将蛙的离体神经纤维置
于生理盐水中，给予适宜刺激后，记录其膜内钠离子含量变化、膜电位变化。下列相关叙
述错误的是（ ）
A．能作为突触后膜的细胞除了神经元外，还有肌肉细胞和腺体细胞等
B．图1 中A 具有传递信息和运输物质的功能
C．生理盐水中 Na⁺的浓度降低会使图2 中曲线Ⅱ的峰值升高
D．图2 中曲线Ⅰ的B 点时细胞内外钠离子浓度不相等
【答案】C
【分析】①兴奋在细胞间的传递是通过突触来完成的。当神经冲动传到神经末梢时，突触
前膜内的突触小泡释放的神经递质，经扩散通过突触间隙与突触后膜上的受体结合，引发
突触后膜电位变化，信号就通过突触传递从一个神经元传递到另一个神经元。
②神经细胞内的Na+浓度比细胞膜外的低。神经细胞受刺激时，细胞膜对Na+的通透性增加，
导致Na+内流，这是形成动作电位的基础。
【详解】A、突触存在于神经元与神经元之间、神经元与肌肉细胞之间或神经元与腺体细
胞之间，因此能作为突触后膜的细胞除了神经元外，还有肌肉细胞和腺体细胞等，A 正确；
B、图1 中的A 受体可以特异性识别神经递质，所以能体现出细胞膜传递信息的功能，同
时该受体还可以运输钠离子，因此还能体现出细胞膜具有物质运输的功能，B 正确；
C、图2 中曲线Ⅱ的峰值代表动作电位的大小，动作电位是由钠离子内流形成的，所以生
理盐水中的钠离子浓度降低，则图2 中曲线Ⅱ的峰值也会降低，C 错误；
D、Na+内流是形成动作电位的基础，图2 中曲线Ⅰ的B 点时细胞外钠离子浓度仍高于细胞
内，D 正确。
故选C。
10．水库是生命共同体“山水林田湖草沙”的重要组成部分，某山地水库生产者以蓝细菌、
绿藻等浮游藻类为主，高等水生植物占比很小。研究人员对该生态系统的能量流动情况进
行了调查，部分结果如图。下列叙述正确的是（ ）
A．第Ⅰ、Ⅱ营养级间能量传递效率只有1.2%，该水库可能存在水体富营养化
B．营养级Ⅲ包括多个种群，同化的能量有10%用于其生长发育和繁殖
C．根据能量传递逐级递减原理，营养级Ⅲ、Ⅳ之间的能量传递效率比Ⅱ、Ⅲ之间的小
D．流经该水库的总能量是四个营养级同化能量的总和
【答案】A
【分析】生产者同化的能量=生产者呼吸消耗的能量+生产者自身生长发育繁殖的能量=生
产者呼吸消耗的能量+流向分解者的能量+流向下一营养级的能量+未被利用的能量。消费
者（除最高级消费者）同化的能量=摄入量-粪便量=呼吸消耗的能量+自身生长发育和繁殖
的能量=呼吸消耗的能量+流向分解者的能量+流向下一营养级的能量+未被利用的能量；最
高级消费者没有流向下一营养级的能量。
【详解】A、一般情况下，相邻两个营养级之间的能量传递效率约为10%~20%。该水库中
第Ⅰ营养级的同化量为25000，第Ⅱ营养级的同化量为300，第Ⅰ、Ⅱ营养级间能量传递效
率=第Ⅱ营养级的同化量/第Ⅰ营养级的同化量×100%=300/25000×100%=1.2%，说明第一营
养级即生产者较多，而第二营养级较少，该水库可能存在水体富营养化，A 正确；
B、营养级Ⅲ是指次级消费者，包括多个种群，第Ⅲ营养级的同化量为21，呼吸消耗的能
量为12.9，所以第Ⅲ营养级用于自身生长发育和繁殖的能量=第Ⅲ营养级的同化量-呼吸消
耗的能量=21-12.9=8.1，第Ⅲ营养级同化的能量中用于生长发育和繁殖的能量占比=第Ⅲ营
养级用于自身生长发育和繁殖的能量/第Ⅲ营养级的同化量×100%=8.1/21×100%≈38.6%，B
错误；
C、营养级Ⅲ、Ⅳ之间的能量传递效率=第Ⅳ营养级的同化量/第Ⅲ营养级的同化量
×100%=1.9/21×100%≈9.0%，营养级Ⅱ、Ⅲ之间的能量传递效率=第Ⅲ营养级的同化量/第Ⅱ
营养级的同化量×100%=21/300×100%=7.0%，所以营养级Ⅲ、Ⅳ之间的能量传递效率比Ⅱ、
Ⅲ之间的大，C 错误；
D、流经该水库的总能量是生产者所固定的太阳能，D 错误。
故选A。
11．国家卫生健康委员会于2025 年3 月宣布，启动为期三年的“体重管理年”行动，鼓励
公众主动调理饮食、加强锻炼，防控肥胖，加强体重管理。生活节律紊乱会引起瘦素（一
种激素）分泌增加，长此以往容易形成瘦素抵抗，无法抑制食欲，导致体重增加。瘦素对
食欲的调节过程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．脂肪细胞分泌的瘦素通过导管运输至血管，再由血液运输至全身各处
B．瘦素作用于靶细胞后可催化相关代谢活动的进行，从而激活信号通路
C．节律中枢位于脊髓，节律紊乱使瘦素分泌过多，从而会抑制脂肪细胞分泌瘦素，此
过程属于负反馈调节
D．机体发生瘦素抵抗的原因可能是靶细胞上瘦素受体有异常
【答案】D
【详解】A、激素由内分泌器官或细胞分泌，直接进入腺体内的毛细血管，无导管，A 错
误；
B、激素对机体代谢活动起调节作用，无催化作用，B 错误；
C、节律中枢位于下丘脑，节律紊乱导致瘦素分泌过多，从而抑制脂肪细胞分泌瘦素，此
过程属于负反馈调节，C 错误；
D、瘦素抵抗时，机体瘦素含量较高，但瘦素无法正常发挥作用，可能是因为靶细胞上瘦
素受体减少（或受损），或对瘦素敏感性下降，D 正确。
故选D。
12．如图为pH 对胃蛋白酶、胰蛋白酶、胆碱酯酶活性的影响示意图。据图分析，下列判
断正确的是（ ）
A．胆碱酯酶的活性最强
B．必须在38℃条件下测定酶活性
C．测定酶活性时，必须保证反应底物足够
D．降解蛋白质可同时加入胃蛋白酶和胰蛋白酶
【答案】C
【分析】酶活性的高低可用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表
示。温度和pH 值影响酶活性，在最适温度和pH 值条件下，酶的活性最高。
【详解】A、通过图示可知，在一定pH 条件下，胆碱酯酶的活性最强，但是超出该pH 值
活性降低，A 错误；
B、在该实验中，温度属于无关变量，应保持相同且适宜，为人体温度37℃，B 错误；
C、一般用单位时间内产物的增加量或底物的减少量表示酶活性的大小，测定酶活性时，
必须保证反应底物足够，C 正确；
D、由图可知，胃蛋白酶和胰蛋白酶的最适pH 不同，所以降解蛋白质不可同时加入胃蛋白
酶和胰蛋白酶，D 错误。
故选C。
13.某种蚊子具有杀虫剂(如DDT)抗性基因RR和RS，它们互为等位基因。下图表示某地
1965 年开始喷洒杀虫剂DDT，1968 年停止喷药后，单位空间内三种基因型蚊子的个体数
量。据图可推断
A．在1967—1968 年间，基因型为RRRS的蚊子最可能存活下来
B．自1968 年停止使用DDT 后，RRRR基因型的存活几率下降
C．1968 年，RS的基因频率大于RR的基因频率
D．停止使用DDT 后若干代后，RR基因将从种群中消失
【答案】B
【分析】自然选择能够定向的改变种群的基因频率，决定生物进化的方向。题中喷药前后
的选择是不同的。
【详解】A、分析题图，基因型为RRRR的个体，在喷药时数量增加，说明这种基因型的个
体最可能存活下来，A 错误；
B、自1968 年停止喷药后，基因型为RRRR的个体数量下降，说明存活几率下降，B 正确；
C、1968 年时，基因型为RRRR的个体大约为90，而RRRS的个体大约为20，基因型为RSRS
的个体非常少，因此RR的基因频率远大于RS的基因频率，C 错误；
D、停止使用DDT 若干代后，RRRS的个体增加，因此RR基因不会消失，D 错误。
故选B。
14．关于环境因素对生命活动的影响，下列叙述正确的是（ ）
A．荒漠植物通常具有发达的根系以适应缺水环境
B．处于高温环境中的正常人体产热量会大于寒冷环境中
C．重力通过影响生长素的合成导致植物根向地性生长
D．寒冷环境下，人体通过下丘脑—垂体—肾上腺皮质轴增加肾上腺素分泌
【答案】A
【详解】A、荒漠环境缺水，植物需要更高效地吸收水分，发达的根系可增大吸水面积，
是对缺水环境的适应性特征，A 正确；
B、正常人体产热量与散热量相平衡，寒冷环境中散热量加大，产热量也增加，大于高温
环境，B 错误；
C、重力引起生长素分布不均匀，从而导致根向地生长，C 错误；
D、下丘脑—垂体—肾上腺皮质轴调控分泌的是肾上腺皮质激素，D 错误。
15．去除取样法可估算动物种群的数量，该方法的原理是每次捕获的动物不放回环境，随
着连续捕捉，种群数量逐渐减少。将每次捕获数量作为y 值，先前捕捉积累数量作为x 值，
得到的方程y=ax+b，如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．据图可估算该动物种群的数量约为-a/b 只
B．调查生境相对开放的动物的种群密度不宜选择此法
C．该方法适用于调查个体小、不易标记的动物种群
D．调查时无需将种群中所有个体捕尽即可估算出种群数量
【答案】A
【分析】去除取样法：在一个封闭的种群里，用同样的方法连续捕捉被调查动物，随着连
续的捕捉，种群内个体数逐渐减少，每次捕获数逐次递减，当单次捕获数降到0 时，捕获
的总累积数就等该种群的总个体数。
【详解】A、去除取样法通过连续捕捉并不放回环境的方法，随着捕捉次数的增加，种群
数量逐渐减少。当单次捕获数降到0 时，捕获的总累积数就等该种群的总个体数，根据一
元线性回归方程y=ax+b，当y=0 时，x=-b
a
，此时x 值即为种群的总数量，A 错误；
B、去除取样法的原理是在一个封闭的种群里，用同样的方法连续捕捉被调查动物，所以
生境相对开放不适用此法，B 正确；
C、运用去除取样法时，每次捕获的动物不放回环境，随着连续捕捉，种群数量逐渐减少，
适用于个体小、不易标记的动物种群，C 正确；
D、去除取样法的原理是通过捕捉数量的变化来估算总数量，不需要将种群中所有个体捕
尽，D 正确。
故选A。
16．人类基因a 和基因b 均可独立导致某遗传病的发生，两对基因位于非同源染色体上。
某家系中该遗传病的系谱图及相关成员有关基因的电泳结果如图所示（不考虑其他变异，
不考虑性染色体同源区段，基因A、B、a、b 基因均只电泳出一个条带），已知条带②对
应的是基因A，基因A 位于常染色体上。下列叙述错误的是（ ）
A．条带③与基因b 相对应
B．Ⅱ-1 的基因型为Aabb
C．Ⅱ-2 与Ⅱ-3 基因型相同的概率为1/8
D．Ⅰ-1 与Ⅰ-2 再生一个正常孩子的概率为3/4
【答案】C
【分析】由题可知，人类基因a 和基因b 均可独立导致某遗传病的发生，两对基因位于非
同源染色体上，故两对基因遵从基因的自由组合定律。
【详解】AB、由图甲可知，I - 1 和I - 2 均正常，II -1 为女性患者，说明该病为常染色体上
的隐性遗传病，即A/a、B/b 均在常染色体上，已知条带②对应的是基因A，结合图乙可知，
若II -1 为AABb，则其不可能患病，说明II -1 为Aabb，II -2 正常，则说明其基因型为
AABB，结合II -1、II -1 基因型可推知，I - 2 为AABb，即条带①-④依次表示B、A、b、
a，AB 正确；
C、I - 1 和I - 2 分别为AaBb、AABb，II -2 为AABB，II -3 正常，为A_B_，则其为AABB
的概率为（1/2×1/4）/（1×3/4）=1/6，C 错误；
D、I - 1 和I - 2 分别为AaBb、AABb，再患病孩子A_bb（不可能有aa）的概率1×1/4，则
再生一个正常孩子的概率为3/4，D 正确。
故选C。
二、非选择题:本题共5 小题，共60 分。
17．（11 分）图 1 为多个神经元之间的联系示意图。用同种强度的电流分别刺激结构
A、B、C，Ⅰ表示分别用单次阈下刺激刺激 A 或 B；Ⅱ表示以连续两个相同强度的阈下
刺激刺激 A；Ⅲ表示单次刺激 C。将一示波器的两极连接在 D 神经元膜内侧和外侧，记
录不同刺激下 D 的电位变化，结果如图 2 所示。回答下列问题：(注：阈电位是指使膜上
Na+通道突然大量开放从而引起动作电位的临界电位值，达到阈电位的刺激强度就是阈强
度)
(1)图 1 中未给予刺激时，示波器显示的电位值为 (填“静息电位”或“动作电位”)
的电位值。
(2)神经元处于静息状态时，细胞外 Na+浓度 (填“高于”或“低于”)细胞内。神经
元之间兴奋的传递只能是单向的，原因是 。
(3)图 2 中Ⅰ、Ⅱ的实验结果表明 。
(4)重症肌无力是一种神经肌肉接头功能异常的自身免疫病。研究人员采用抗原—抗体结合
法检测患者 AChR(乙酰胆碱受体)抗体，大部分呈阳性，少部分呈阴性。AChR 抗体呈阳
性的患者的病因是
。AChR 抗体阴性者仍表现
出肌无力症状可能是此类型患者 AChR 基因突变，不能产生 ，使神经肌肉接头功能
丧失，导致肌无力。为验证该假设，应以正常人为对照，在分子水平上检测二者的 。
【答案】（11 分，除标记外，每空1 分）
(1)静息电位
(2) 高于 神经递质只存在于突触小泡中，只能由突触前膜释放，然后作用于突触后
膜（2 分）
(3)单次阈下刺激不能引起动作电位，连续的两次阈下刺激可以叠加，从而引起动作电位
（2 分）
(4) AChR 遭到抗体攻击结构受损(或与抗体结合后)，无法与乙酰胆碱结合产生兴奋
（2 分） AChR AChR 基因的碱基序列（2 分）
【分析】题图分析，图1 中神经元A、神经元B、神经元C 分别与神经元D 构成突触，且
神经元D 的细胞膜在突触中均为突触后膜；图2 中Ⅰ显示分别给予神经元A 和神经元B 一
个阈下刺激，神经元D 发生膜电位变化但不产生动作电位；Ⅱ显示连续给予神经元A 两个
相同的阈下刺激，神经元D 产生动作电位；Ⅲ显示给予神经元C 一个刺激，神经元D 产生
膜电位，且该电位导致膜内负电荷增加。
【详解】（1） 图1 中未给予刺激时，示波器显示的电位值为静息电位的电位值，表现为
外正内负。
（2） Na+在机体内的分布情况为膜外高于膜内，因此当神经元处于静息状态时，细胞外
Na+浓度高于细胞内。神经元之间兴奋的传递依靠突触，只有突触前膜所在的神经元的轴突
末梢中含有突触小泡，突触小泡中包裹神经递质，神经递质只能由突触前膜释放，作用于
突触后膜，故神经元之间兴奋的传递只能是单向的。
（3） 图2 中Ⅰ、Ⅱ的实验结果表明单次阈下刺激不能引起动作电位，连续的两次阈下刺
激可以叠加，从而引起动作电位，即动作电位的产生需要适宜的刺激。Ⅲ的波形显示刺激
神经元C 后，神经元D 的膜内负电位增大，说明存在阴离子内流，神经元D 的兴奋性下降，
说明神经元C 释放的神经递质为抑制性神经递质。
（4）AChR 抗体呈阳性的患者的病因是AChR 遭到抗体攻击结构受损（或与抗体结合后），
无法与乙酰胆碱结合产生兴奋。AChR 抗体阴性者仍表现出肌无力症状可能是此类型患者
AChR 基因突变，不能产生AChR，使神经肌肉接头功能丧失，导致肌无力。为验证该假设，
应以正常人为对照，检测患者AChR 基因的碱基序列，进而确定病因是否是因为基因突变
导致。
18．（12 分）光照条件下，叶肉细胞中的O2和CO2竞争性结合C5，O2与C5结合后经过一
系列反应释放CO2的过程称为光呼吸。相关学者将四种酶（GLO，CAT，GCL、TSR）的
基因导入水稻叶绿体，创造了一条新的光呼吸代谢支路（GCGT 支路，如图中虚线所示），
得到转基因水稻。回答下列问题：
(1)光呼吸时C5与O2的结合发生在叶绿体的 中。图示PGA 的具体名称是 ，
其接受ATP 和NADPH 释放的能量并经 还原最终形成部分糖类物质。影响卡尔文
循环的外因有 （答出两点即可）。
(2)实际生产过程中，常通过 （填“适当升高”或“适当降低”）O2和CO2的浓度
比来达到增产的目的，请分析并解释其原理（从光合作用原理和光呼吸两个方面作答）
。
(3)研究发现，构建了GCGT 支路的转基因水稻，不仅产量增加，叶片中的氮素含量也显著
提高，由图分析，氮素含量提高的原因是
。
(4)某研究小组发现，构建了GCGT 支路的转基因水稻，在光饱和点条件下水稻的光合作用
强度无明显变化，其原因可能是
（答出两点即可）。
【答案】 （12 分，除标记外，每空1 分）
(1) 基质 3—磷酸甘油酸 NADPH 温度、CO2 浓度等（2 分）
(2) 适当降低 CO2 浓度升高可促进光合作用暗反应的进行，进而提高光合作用强
度，同时还可促进更多的C5与CO2结合，减少C5与O2的结合，从而降低光呼吸速率，减
少ATP 的消耗，所以适当降低O2和CO2的浓度比能达到增产的目的（2 分）
(3)构建GCGT 支路可以减少光呼吸引起的NH3释放到胞外（或叶片中含氮的酶含量增加），
从而增加叶片中的氮素含量（2 分）
(4)酶的活性达到最大，对CO2的利用率不再提高；受到ATP 以及NADPH 等物质含量的限
制；水稻体内光合色素的量有限等（2 分）
【分析】光呼吸是植物利用光能，消耗O2并释放CO2的过程。由图可知，光呼吸代谢支路
（GCGT 支路）可以将部分碳重新回收进入卡尔文循环，有利于降低光呼吸消耗。
【详解】（1）由图可知，光呼吸时C5与O2的结合发生在叶绿体的基质中。在光合作用卡
尔文循环中，CO2与C5结合生成的是3-磷酸甘油酸，所以PGA 的名称是3-磷酸甘油酸；在
光合作用暗反应阶段，3-磷酸甘油酸接受ATP 和NADPH 释放的能量，经NADPH 还原最
终形成部分糖类等有机物。影响卡尔文循环的外因有光照强度、温度、CO2的浓度等。
（2）叶肉细胞中的O2和CO2竞争性结合C5，O2浓度高时，光呼吸较强，故实际生产过程
中，常通过适当降低O2和CO2的浓度比来达到增产的目的，原因是降低O2浓度，有利于
抑制光呼吸，减少ATP 的消耗，增大CO2浓度，暗反应增强，光合速率增大，所以适当降
低O2和CO2的浓度比能达到增产的目的。
（3）研究发现，构建了GCGT 支路的转基因水稻，不仅产量增加，叶片中的氮素含量也
显著提高，由图分析，叶绿体中 GCGT 支路一方面可以生成 CO2， 另一方面可以减少光
呼吸导致的 CO2 散失 ， 从而能使叶绿体中 CO2浓度增加并导致光合作用增强， 产量增
加；同时还可以减少光呼吸引起的 NH3 释放到胞外 ， 构建的GCGT 支路使叶片中含氮
的酶含量增加，从而增加叶片中的氮素含量。
（4）在光饱和点条件下水稻的光合作用强度无明显变化，其原因可能是酶的活性达到最大，
对CO2的利用率不再提高；受到ATP 以及NADPH 等物质含量的限制；水稻体内光合色素
的量有限等。
19．（11 分）青藏高原上广泛分布着一种小型哺乳动物高原鼠兔，它们多穴居于植被低矮、
视野开阔的高山草甸地区。为研究高原鼠兔的被捕食风险，科研人员进行了相关实验，结
果如图1。图2 是根据某草原上甲、乙两种鼠兔种群数量的调查结果绘制的曲线图，L 值表
示甲鼠兔种群数量是前一年种群数量的倍数，M 值表示乙鼠兔的种群数量。不考虑甲鼠兔
种群的迁入和迁出，回答下列问题：
注：警戒距离指当高原鼠兔有警戒行为时与捕食者之间的距离。
(1)高原鼠兔发现天敌时，会后腿站立、仰头发出连续的短促尖叫声提醒同伴躲避，此过程
涉及的信息类型有 （答出两点）。分析图1 可知，植被群落高度越高，鼠
兔被捕食的风险就越大，原因是 。请用文字和箭头构建一个高原鼠兔种群
和捕食者种群之间负反馈调节的概念模型：
。
(2)第2 年的后半年至第3 年间，甲鼠兔的种群数量逐渐减少，而乙鼠兔的种群数量却逐渐
增加，且环境容纳量渐增加，这说明 ，乙鼠兔的环境容纳量约为
只。环境容纳量是指 。
【答案】（11 分，除标记外，每空1 分）
(1) 行为信息和物理信息（2 分） 植被群落高度越高，警戒距离越小，鼠兔被捕食
的风险就越大（2 分） 高原鼠兔种群数量增加→捕食者种群数量增加→高原鼠兔种群
数量减少（或高原鼠兔种群数量减少→捕食者种群数量减少→高原鼠兔种群数量增加）（2
分）
(2) 甲鼠兔和乙鼠兔之间是种间竞争关系，且乙鼠兔的种间竞争力强于甲鼠兔（或乙鼠
兔迁入后与甲鼠兔竞争食物和栖息地，使甲鼠兔的种群数量下降，答案合理即可给分）（2
分） 1.4×103 （2 分） 一定的环境条件所能维持的种群最大数量
【分析】题图分析，图1 中植被群落高度越高，警戒距离越小，个体被捕食风险越高。图
2 中L 值表示甲鼠兔种群数量是前一年种群数量的倍数，L 值大于1，种群数量增加；L 值
等于1，种群数量不变；L 值小于1，种群数量减少。
【详解】（1）高原鼠兔发现天敌时，会后腿站立，是行为信息，发出连续的短促尖叫声，
是物理信息；图1 数据显示，植被群落高度越高，警戒距离越小，而警戒距离是指当高原
鼠兔有警戒行为时与捕食者之间的距离，与个体被捕食风险呈负相关，因此植被群落高度
越高，鼠兔被捕食的风险就越大。根据负反馈的调节机制，高原鼠兔种群和捕食者种群之
间负反馈调节的过程，可以表示为：高原鼠兔种群数量增加→捕食者种群数量增加→高原
鼠兔种群数量减少（或高原鼠兔种群数量减少→捕食者种群数量减少→高原鼠兔种群数量
增加）。
（2）依据题干信息，第2 年的后半年至第3 年间，甲鼠兔的种群数量逐渐减少，而乙鼠兔
的种群数量却逐渐增加，说明甲鼠兔和乙鼠兔之间是种间竞争关系，且乙鼠兔的种间竞争
力强于甲鼠兔，环境容纳量是指一定的环境条件所能维持的种群最大数量，依据图示信息
可知，乙鼠兔的环境容纳量为1.4×103只。
20．（15 分）卷翅（Cy）是在果蝇中较早发现的突变体之一，Cy 基因先后被定位在染色
体的多个位置，是遗传杂交中常用的标记基因。为了解卷翅果蝇的遗传规律，验证2 个卷
翅品系中的 Cy 基因是否为等位基因，科研人员使用紫眼卷翅、红眼卷翅和野生型三个稳
定遗传（自交后代不出现性状分离）的果蝇品系进行遗传杂交实验（不考虑X、Y 染色体
的同源区，均进行正反交）。请回答下列问题：
表1：三个品系杂交组合配伍
杂交组合
亲代
F1表型及比例
组合1
紫眼卷翅×野生型
全部红眼，
卷翅♀:卷翅♂:正常翅♀:正常翅
♂=1:1:1:1
组合2
红眼卷翅×野生型
全部红眼，
卷翅♀:卷翅♂:正常翅♀:正常翅
♂=1:1:1:1
组合3
紫眼卷翅×红眼卷翅
全部红眼，
卷翅：正常翅=2：1
表2：F1自交
杂交组
合
F1
F2表型及比例
组合4
组合1 或组合2 中卷翅个
体
卷翅：正常翅=2：1
组合5
组合1 中红眼卷翅个体
红眼卷翅：紫眼卷翅：红眼正常翅：
紫眼正常翅=6：2：3：1
(1)生物学家 最早用果蝇作为实验材料，采用 方法，证明了基因在染色体上。
(2)据表可知，翅形和眼色中，属于显性性状的是 ，卷翅基因和眼色基因分别位于
染色体上（选填“常、常” “常、X” “X、常” “X、X”），组合4 的F2中卷翅与正常翅
之比不符合3 1
∶
的原因可能是
。
(3)两个卷翅品系均可稳定遗传，推测卷翅品系中另有一个隐性致死基因s。试分析实验结
果，在图中4 条染色体的相应位置标出基因s 。（“+”表示野生型基因）
试从隐性致死基因角度分析组合3 的F1中出现正常翅的原因
。
(4)综合以上分析及组合3 中F1表型及比例，推测两个卷翅品系的卷翅基因为等位基因，试
分析其原因
。
(5)据组合5 的F2表型及比例分析，控制翅形和眼色的两对基因的遗传 （选填“遵
循”“不遵循”）自由组合定律。组合3 的F1中红眼卷翅果蝇与组合5 的 F2中红眼卷翅果
蝇杂交，后代中红眼卷翅个体的比例为
。
【答案】（15 分，除标记外，每空1 分）
(1) 摩尔根 假说-演绎
(2) 卷翅、红眼 常、常 卷翅基因显性纯合致死（2 分）
(3)
（2 分） 两个卷翅果蝇品系的隐性致死基因不在染色
体的同一位点（或两个卷翅果蝇品系的隐性致死基因为非等位基因）（2 分）
(4)若两个卷翅基因位于非同源染色体上，则F1全为卷翅，不会出现正常翅个体；若两个卷
翅基因为同源染色体上的非等位基因，则两个卷翅品系的杂交后代中卷翅与正常翅的数量
比应为3:1（2 分）
(5) 遵循 5/9（2 分）
【分析】基因自由组合定律的实质：位于非同源染色体上的非等位基因的分离或组合是互
不干扰的，在减数分裂过程中，同源染色体上等位基因分离的同时，位于非同源染色体上
的非等位基因进行自由组合。
【详解】（1）生物学家摩尔根最早用果蝇作为实验材料，采用假说 - 演绎法，进行了果
蝇的红、白眼实验，证明了基因在染色体上。
（2）从组合5，组合1 中的红眼卷翅个体相互杂交得到的F2中翅形有卷翅和正常翅，眼色
有红眼和紫眼，可知翅形和眼色中，属于显性性状的是卷翅、红眼。组合1、2 杂交组合均
进行正反交，两组实验正反交后F1的表现型及比例在雌、雄个体中相同，不考虑X、Y 染
色体的同源区，则卷翅基因和眼色基因均位于常染色体上。组合4：组合1 中卷翅个体基
因型相同，组合2 中卷翅个体基因型相同，组合1 或组合2 中卷翅个体杂交后的F2中卷翅
与正常翅之比不符合3 1
∶
的原因可能是卷翅基因纯合致死导致的。
（3）组合1、2 中卷翅和野生型（正常翅）杂交，F1表现型均为卷翅♀:卷翅♂:正常翅♀:
正常翅♂=1:1:1:1，说明组合1、2 中的卷翅个体均为杂合子。杂合子一般不能稳定遗传，
但组合1、2 中两卷翅品系均可稳定遗传，说明组合1 中的卷翅个体相互杂交、组合2 中的
卷翅个体相互杂交后产生的正常翅个体无法存活。推测卷翅品系中有一个隐性致死基因
s，基因s 所在的位置为：
，由于s 基因与正常翅基因连锁，虽然卷
翅品系为杂合子，但其品系内雌、雄个体杂交后，正常翅的果蝇含有两个s 基因不能存活，
所以能稳定遗传。组合3 两种品系的卷翅个体杂交，F1中卷翅：正常翅=2：1，出现正常翅
的原因是可能是：两个卷翅果蝇品系的隐性致死基因不在染色体的同一位点（或两个卷翅
果蝇品系的隐性致死基因为非等位基因）。这两个品系的卷翅果蝇杂交后产生的正常个体
虽含有两个s 基因，但由于s 基因在染色体上的位置不同，导致该正常翅个体能够存活。
（4）组合3 紫眼卷翅和红眼卷翅个体关于翅形的基因都是杂合子，且在正常基因上存在隐
性致死基因s。若这两个卷翅基因是非等位基因，紫眼卷翅中卷翅可用A 基因表示，a 表示
正常基因，a 所在的染色体上存在致死基因记为s1，记为as1；红眼卷翅中卷翅基因为B，b
表示正常基因，b 所在的染色体上存在致死基因记为s2，记为bs2。紫眼卷翅品系关于翅形
的基因型可表示为Aas1bb，红眼卷翅品系关于翅形的基因型可表示为aaBbs2，AA、BB、
as1as1、bs2bs2纯合致死。①若两个卷翅基因位于非同源染色体上：组合3 两卷翅品系Aas1bb
产生配子Ab:as1b=1:1，aaBbs2产生配子aB:abs2=1:1，两卷翅品系杂交，子代基因型及表现型
为AaBb（卷翅）、aas1Bb（正常翅）、Aabbs2（卷翅）、aas1bbs2（正常翅），卷翅：正常
翅=1:1；②若两个卷翅基因为同源染色体上的非等位基因：组合3 两卷翅品系Aas1bb 产生
配子Ab:as1b=1:1，aaBbs2产生配子aB:abs2=1:1，两卷翅品系杂交，子代基因型及表现型为
AaBb（卷翅）、aas1Bb（卷翅）、Aabbs2（卷翅）、aas1bbs2（正常翅），卷翅：正常翅
=3:1。这两种情况均不满足题中紫眼卷翅×红眼卷翅，F1表型及比例卷翅：正常翅=2：1，
所以两个卷翅品系的卷翅基因为等位基因。
（5）组合5 是组合1 中红眼卷翅个体相互杂交，产生的F2表型及比例符合9:3:3:1 的变型，
说明控制翅形和眼色的两对基因的遗传遵循自由组合定律。设眼色受基因A/a 控制，A 控
制红眼，a 控制紫眼；设翅形受C/c 控制，C 控制卷翅，c 控制正常翅，且CC 个体纯合致
死，卷翅个体c 所在的染色体上存在隐性致死基因s，记为cs，由于紫眼卷翅和红眼卷翅s
基因所在位置不同，可以分别用s1、s2 表示，cS1cS1、cS2cS2个体不能存活，所以亲代紫眼卷
翅基因型为aaCcs1、红眼卷翅基因型为AACcs2、野生型基因型为AAcc。组合3 紫眼卷翅
（aaCcs1）×红眼卷翅（AACcs2）→F1中AaCC（CC 纯合致死），红眼卷翅AaCcs1：红眼卷
翅AaCcs2=1:1，红眼正常翅的基因型为Aacs1cs2。组合1 紫眼卷翅（aaCcs1）×野生型
（AAcc）→F1中红眼卷翅个体基因型为AaCc，组合5 是将组合1 中的红眼卷翅（AaCc）
个体相互交配，由于CC 纯合致死，F2中红眼卷翅个体基因型及比例为AACc:AaCc=1:2。
组合3 的F1中红眼卷翅果蝇（AaCcs1：AaCcs2=1:1）与组合5 的 F2中红眼卷翅果蝇
（AACc:AaCc=1:2）杂交，可以利用分离定律解决该问题，①考虑眼色这一组性状，组合
3 中红眼（Aa）与组合5 的 F2中红眼（AA:Aa=1:2）杂交，子代红眼个体（A_）所占比例
为1
3 ×1+ 2
3 × 3
4 = 5
6
；②考虑翅形这一组性状组合3 中卷翅（Ccs1：Ccs2=1:1）与组合5 的
F2中卷翅（Cc）杂交，子代中由于CC 纯合致死，卷翅个体出现的概率是2/3；③组合3 的
F1中红眼卷翅果蝇与组合5 的 F2中红眼卷翅果蝇杂交，后代中红眼卷翅个体的比例为
5
6 × 2
3 = 5
9
。
21．（11 分）生物胺是一种存在于发酵食品中的含氮小分子有机化合物，是合成核酸、蛋
白质、生物碱等的前体物质。人体自身合成的生物胺可促进正常生理活动，而通过食物摄
入过量生物胺会引起头疼、腹部痉挛、呕吐等不良反应，严重时可能危及生命。利用酶解
法降解是减少发酵食品中生物胺含量，保障食品安全的有效方法之一、科研人员成功地筛
选获得具有降解生物胺能力的多铜氧化酶（MCO）基因，并转入大肠杆菌中实现了高效表
达。
(1)基因工程常用大肠杆菌作为受体细胞，是因为其具有 （至少答2 点）等优点。一
般需用 处理大肠杆菌细胞，以便将重组质粒导入其中。
(2)为构建重组载体，需先设计引物，通过PCR 特异性扩增MCO 基因。用于扩增MCO 基
因的两种引物需分别与两条模板链 （填“3＇”或“5＇”）端的碱基序列互补配对。
为使PCR 产物能被限制酶切割，需在引物的 （填“3＇”或“5＇”）端添加相应的
限制酶识别序列。由图可知，在MCO 基因的两端应添加 和 两种不同限制酶的
识别序列。这样就方便后面用这两种限制酶进行酶切，相比用同一种酶，该方法的优点在
于 （答出2 点）。经过这两种酶酶切的MCO 基因和载体连接时，可选用 （填
“E。coli DNA 连接酶”或“T4DNA 连接酶”）。
名称
识别序列及切割位点
名称
识别序列及切割位点
Hind
Ⅲ
EcoR Ⅰ
Pvit Ⅱ
Pst Ⅰ
Kpn Ⅰ
BamH
Ⅰ
(3)若要通过实验检测MCO 基因能否在大肠杆菌中表达，实验思路是 。
【答案】（11 分，除标记外，每空1 分）
(1) 繁殖速度快，培养成本低（遗传物质较少，结构简单等） Ca2＋
(2) 3＇ 5＇ Pvit Ⅱ EcoRⅠ 防止目的基因和质粒自身环化和反向连接
（2 分） T4DNA 连接酶
(3)从大肠杆菌细胞中提取出核酸，用MCO 基因制成探针进行核酸分子杂交，若有DNA—
RNA 杂交带，说明MCO 基因转录出了mRNA；或从大肠杆菌细胞中提取蛋白质进行抗原
—抗体杂交，若有杂交带，表明已表达出目的蛋白（或从大肠杆菌细胞中提取蛋白质，检
测其是否能分解生物胺，答出一点即可）（2 分）
【分析】利用PCR 技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便
根据这一序列合成引物。基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括
目的基因、启动子、终止子和标记基因等。将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细
胞法。
【详解】（1）基因工程常用大肠杆菌作为受体细胞，大肠杆菌是细菌，具有繁殖速度快，
培养成本低（或遗传物质较少，结构简单等）的优点。为了提高转化率，一般需用含有
Ca2＋的溶液处理大肠杆菌细胞，成为感受态细胞，以便将重组质粒导入其中；
（2）为构建重组载体，需先设计引物，通过PCR 特异性扩增MCO 基因。用于扩增MCO
基因的引物需满足的条件是两种引物分别与两条模板链3＇端的碱基序列互补配对，因而
可以保证子链从目的基因的一段开始延伸；由于子链的延伸从引物的3＇端开始，因此，
为使PCR 产物能被限制酶切割，需在引物的5＇端添加相应的限制酶识别序列，图中显示，
Pvit Ⅱ、Kpn Ⅰ和EcoR Ⅰ位于启动子和终止子之间，且Kpn Ⅰ不止一个切割位点，因此，在
MCO 基因的两端应添加Pvit Ⅱ和EcoR Ⅰ两种不同限制酶的识别序列，这样就方便后面用
这两种限制酶进行酶切，相比用同一种酶，利用双酶切的好处表现在可以防止目的基因和
质粒自身环化，同时保证目的基因正向连接。经过这两种酶酶切的MCO 基因和载体连接
时，Pvit Ⅱ切出了平末端，因此可选用T4 DNA 连接酶进行连接；
（3）从大肠杆菌细胞中提取出核酸，用MCO 基因制成探针进行核酸分子杂交，若有DNA
—RNA 杂交带，说明MCO 基因转录出了mRNA；或从大肠杆菌细胞中提取蛋白质进行抗
原—抗体杂交，若有杂交带，表明已表达出目的蛋白；或从大肠杆菌细胞中提取蛋白质，
检测其是否能分解生物胺，三种方法均可适用。
