文档内容
阶段排查 回扣落实(十)
一、易错易混再巩固
1.与基因工程有关的4个易错点
(1)限制酶具有特异性，即一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列，并在特定的
位点上进行切割；限制酶不切割自身 DNA的原因是原核生物DNA分子中不存
在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。
(2)在获取目的基因和切割载体时通常用同一种限制酶，以获得相同的黏性末端。
但如果用两种不同限制酶切割后形成的黏性末端相同，在DNA连接酶的作用下
目的基因与载体也可以连接起来。
(3)为了防止载体或目的基因的黏性末端自己连接即所谓“环化”，可用不同的
限制酶分别处理含目的基因的DNA和载体，使目的基因两侧及载体上各自具有
两个不同的黏性末端。
(4)启动子≠起始密码子，终止子≠终止密码子。
启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识
别、结合的部位。终止子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端，作
用是使转录过程停止。
起始密码子和终止密码子位于mRNA上，分别控制翻译过程的启动和终止。
2.与细胞工程有关的4个易错点
(1)动物细胞培养中两次使用胰蛋白酶的作用不同：
第一次：处理剪碎的组织，使其分散成单个细胞。
第二次：使贴壁生长的细胞从瓶壁上脱落下来。
(2)传代细胞的特点
传代培养到10代以内的细胞核型稳定，10～50代时部分细胞核型发生变化，50
代以后遗传物质可能发生变化。
(3)原代培养与传代培养的区别：关键是是否分瓶培养。贴壁生长到一定程度需
要用胰蛋白酶处理，然后再分瓶培养，原代培养结束，开始传代培养。
(4)克隆动物是由重组的细胞培养而来的，该重组细胞的细胞质基因来源于受体细胞，细胞核基因来源于提供细胞核的亲本，其遗传物质来自2个亲本。
3.有关胚胎工程需要注意的6个常考点
(1)精子获能是指精子获得受精“能力”，而不是获得能量；排卵是指卵子从卵
泡中排出，而不是卵泡从卵巢中排出。
(2)区别2种标志
①受精标志：在卵细胞膜和透明带间隙中看到两个极体。
②受精完成的标志：雌、雄原核融合成合子。
(3)早期胚胎培养液成分
①2“盐”：无机盐和有机盐；②2“酸”：氨基酸和核苷酸；③2“素”：维
生素和激素；④2“液体”：水和血清。
(4)2种“冲卵”的不同
①胚胎移植：冲出的是早期胚胎。
②体外受精：冲出的是卵子。
(5)2次使用的激素不同
①孕激素：对供、受体进行同期发情处理。
②促性腺激素：对供体进行超数排卵处理。
(6)胚胎移植成功的关键
①供、受体同期发情处理。
②供体用促性腺激素做超数排卵处理。
二、长句应答多强化
1.教材黑体字
(1)实现基因工程的操作过程至少需要三种工具，即准确切割 DNA 的“手术
刀”——限制性核酸内切酶、将DNA片段再连接起来的“缝合针”——DNA
连接酶、将体外重组好的DNA导入受体细胞的“运输工具”——运载体。
(2)基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。
(3)植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细
胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、
丛芽，最终形成完整的植株。
(4)植物体细胞杂交就是将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，
并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。(5)动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母
细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。
2.教材结论性语句
(1)基因工程操作的基本工具有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和使目的基因进
入受体细胞的载体。
(2)E·coli DNA连接酶只能连接黏性末端，而 T DNA连接酶既能连接黏性末端
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也能连接平末端。
(3)质粒是基因工程常用的载体，需具备的条件有：能在宿主细胞内稳定保存并
自我复制；具有一个或多个限制酶切割位点；具有标记基因。
(4)基因工程的基本操作程序：目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的
基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定。
(5)基因表达载体的构建是基因工程的核心，基因表达载体的组成包括目的基因、
启动子、终止子和标记基因等。
(6)植物体细胞杂交的理论基础是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，动物细
胞融合的理论基础是细胞膜的流动性和细胞增殖。
(7)植物体细胞杂交用到的酶是纤维素酶和果胶酶，动物细胞培养用到的酶是胰
蛋白酶或胶原蛋白酶。
(8)动物细胞培养时选用幼龄动物组织或胚胎进行细胞培养，因为幼龄动物组织
或胚胎的细胞分化程度低，增殖能力强，更易于培养。
(9)动物细胞培养需满足的条件有充足的营养、适宜的温度和pH、气体及无菌、
无毒的环境。
(10)单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高，并可以大量制备的优点。
(11)在单克隆抗体制备过程中，有两次筛选：第一次是筛选出杂交瘤细胞(用选
择培养基)；第二次是进一步筛选出能产生人们所需要抗体的杂交瘤细胞(用抗
原—抗体结合法)。
(12)早期胚胎发育的过程：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原肠胚。
(13)胚胎移植的意义是可以充分发挥雌性优良动物的繁殖潜力。
