文档文本内容
一、显微镜的使用
二、物质鉴定实验
三、观察DNA/RNA分布
四、有机物的水解和代谢比较
细胞的物质基础-显微观察实验，物质鉴定实验，
DNARNA分布
一、显微镜的使用
1、基本结构：
光学结
构
机械结
构
镜头
反光镜
准焦螺旋（有粗细之分）：使镜筒上
升或下降
转换器：转换物镜
光圈（有大小之分）：调节视野亮度
目镜（无螺纹）
物镜（有螺纹）
平面：调暗视野
凹面：调亮视野
2、基本使用流程&原则：
低倍镜观察→将要放大观察的部位移至视野中央→换上高倍镜→
调节细准焦螺旋→调节视野亮度→高倍镜观察；
1
2、基本使用流程&原则：
（1）先用低倍镜找到物像，再用高倍镜观察；
（2）先用粗准焦螺旋，后用细准焦螺旋，高倍镜时不能使用粗准焦
螺旋；
（3）镜筒先下降，后缓慢上升；
3、显微镜放大倍数：
①显微镜的放大倍数=目镜的放大倍数×物镜的放大倍数
②显微镜放大的是物像的长度或宽度，而不是面积或体积
4、放大倍数与镜头长短的关系：
①目镜（无螺纹）：成反比，即目镜越长放大倍数越小；
②物镜（有螺纹）：成正比，即物镜越长放大倍数越大；
5、低倍镜与高倍镜视野的区别：
细胞大
小
细胞数
目
视野亮
度
视野范
围
物镜与装片的
距离
低倍镜
小
多
亮
大
远
高倍镜
大
少
暗
小
近
6、放大倍数的变化与视野范围内细胞数量变化的关系：
①一行细胞数量的变化，可根据放大倍数与视野范围成反比的
规律来计算
②圆形视野范围内细胞数量的变化，可根据看到的实物范围与
放大倍数的平方成反比的规律来计算
2
7、显微镜的成像特点及装片移动方向的判断：
①成像特点
显微镜成的像为与实物左右相反，上下颠倒的虚像
②装片移动方向的判断
视野中物像移动的方向与载玻片上实物的运动方向正好相反，所以移
动装片时，应按照同向原则，即物像往哪偏离就将装片往哪移动，就
可将物像移至视野中央。
②装片移动方向的判断
视野中物像移动的方向与载玻片上实物的运动方向正好相反，所以移
动装片时，应按照同向原则，即物像往哪偏离就将装片往哪移动，就
可将物像移至视野中央。
8、高中阶段用到显微镜的典型实验：
“观察细胞的多样性”
“检测生物组织中的脂肪”
“观察DNA和RNA在细胞中的分布”
“用高倍显微镜观察线粒体和叶绿体”
“观察植物细胞的质壁分离与复原”
“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂”
“低温诱导植物染色体数目变化”等
点对点练习
【例1】★★
（2005 上海）显微镜目镜为10×，物镜为10× ，视野中被相连的64
个分生组织细胞所充满．若物镜转换为40× 后，则在视野中可检测到
的分生组织细胞数为（
）
A．2 个
B．4 个
C．8 个
D．16 个
3
【例2】★★
图中1﹣6 表示不同的物镜与目镜，乙和丙分别表示不同物镜下观察到
的图象．有关描述正确的是（
）
1
2 3 4 5 6
乙
丙
A．1、2、5、6 均为目镜，3、4 均为物镜；且1 比2 的放大倍数小，
3 比4 放大倍数小
B．把视野里的标本从图中的乙转为丙时，应选用4
C．从图中的乙转为丙，正确调节顺序：转动转换器→移动标本→调
节光圈→调细准焦螺旋
D．欲获得最小放大倍数的观察效果甲图中的组合一般是1、4、5
【例3】★★
（2013 江苏）一个班级分组进行减数分裂实验，下列操作及表述正确
的是（
）
A．换用高倍镜时，从侧面观察，防止物镜与装片碰擦
B．因观察材料较少，性母细胞较小，显微镜视野应适当调亮
C．为观察染色体不同层面的精细结构，用粗准焦螺旋调节焦距
D．一个视野中，用10×物镜看到8 个细胞，用40×物镜则可看到32
个细胞
二、物质鉴定实验
1、还原糖鉴定：
1> 实验原理：可溶性还原糖+ 斐林试剂
砖红色沉淀
2> 实验材料：选择含糖量较高、颜色为无色或近白色的植物组织，
以苹果、梨为最好。
3> 实验试剂：斐林试剂（0.1g/mL的NaOH溶液+ 0.05g/mL的CuSO4
溶液）
加热
4
二、物质鉴定实验
1、还原糖鉴定：
4> 实验步骤：
二、物质鉴定实验
1、还原糖鉴定：
注意事项：
①还原糖的鉴定不能用本身带有颜色的材料，特别是红色、砖红色
的材料，如西瓜；
②高中阶段常见的还原糖有麦芽糖、果糖、葡萄糖等，甘蔗、甜菜
中含有的糖主要是蔗糖，是非还原糖，不宜作为还原糖鉴定材料；
③鉴定之前留一部分样液，以便与鉴定后的样液颜色作比较。
注意事项：
④斐林试剂要现配现用，使用时不可分别加入待测液中，甲液乙
液等量混合均匀后再注入；
⑤最终会出现砖红色，但问溶液颜色变化时，要答浅蓝色→棕色
→砖红色；
⑥最好水浴加热，这样可以保持反应的最适温度，可长时间观察
所需的反应颜色反应。
四、实验鉴定
1、还原糖的鉴定：
注意事项
口诀：
麦果葡，水煮糖斐红
（卖果脯，水煮唐飞鸿）
黄飞鸿系列片段
5
二、物质鉴定实验
2、脂肪鉴定：
1> 实验原理：脂肪颗粒+ 苏丹Ⅲ染液（苏丹IV染液）→ 橘黄色
（红色）颗粒
2> 实验材料：选择富含脂肪的种子，以花生种子为最好（实验
前浸泡3h～4h）。
3> 实验试剂：苏丹Ⅲ染液或苏丹IV染液、体积分数为50%的酒
精溶液、蒸馏水。
二、物质鉴定实验
2、脂肪鉴定：
4> 实验步骤：
二、物质鉴定实验
2、脂肪鉴定：
注意事项：
①脂肪的鉴定实验：选择富含脂肪的种子，以花生种子为最好
（实验前浸泡3h～4h）；
②切片尽量薄，理想状态是只含有单层细胞；
③染色时间不宜过长，否则脂肪会溶于酒精中；
染色后用50%酒精洗去浮色；
④实验需要高倍显微镜。
3、蛋白质鉴定：
1> 实验原理：
蛋白质(蛋白质中的肽键与双缩脲结构相似) + 双缩脲试剂→ 紫
色反应
6
3、蛋白质鉴定：
1> 实验原理：
蛋白质(蛋白质中的肽键与双缩脲结构相似) + 双缩脲试剂→ 紫
色反应
2> 实验材料：可用浸泡1d～2d的黄豆种子（或用豆浆、或用鸡
蛋蛋清）。
3> 实验试剂: 双缩脲试剂（A液0.1 g/ml的NaOH 溶液，B液0.01
g/ml的CuSO4 溶液）
3、蛋白质鉴定：
4> 实验步骤：
3、蛋白质鉴定：
注意事项：
①若用鸡蛋蛋清一定要稀释；
②双缩脲试剂的使用，一定要先加入A液，摇匀之后，再加入几
滴双缩脲试剂B液；
③鉴定之前留一部分样液，进行空白对照，以便与鉴定后的样
液颜色作比较。
④斐林试剂与双缩脲试剂的辨析：
7
1、实验原理：
①甲基绿和吡罗红(派洛宁)对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿
+DNA→绿色，吡罗红+RNA→红色。用甲基绿、吡罗红的混合染
色剂将细胞染色，可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。
②盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞；同时可使
染色体中的DNA与蛋白质分离，便于DNA与染色剂的结合。
2、实验材料：
人的口腔上皮细胞或洋葱鳞片叶表皮细胞。
3、实验试剂：
甲基绿和吡罗红混合染液，0.9%NaCl溶液，
8%盐酸
4、实验步骤：
8
注意事项：
①甲基绿和吡罗红染色剂，必须混合使用，且现用现配；
②取口腔上皮细胞之前，应先漱口，以避免装片中出现太多的杂
质；取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞，同时
使用内表皮细胞；
③冲洗载玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗；
三、观察DNA/RNA分布
注意事项：
④用酒精灯烘烤载玻片时，不要只集中于材料处，而应将载玻片
在火焰上来回移动，使载玻片均匀受热，以免破裂；
⑤烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中，最好先自
然冷却1分钟；
⑥本实验需要使用显微镜，注意相关使用原则。
小结：常见的颜色反应
①淀粉+碘液→ 蓝色
②还原糖+斐林试剂→ 砖红色沉淀（水浴加热）
③脂肪+苏丹Ⅲ染液（苏丹IV染液）→ 橘黄色（红色）
④蛋白质+ 双缩脲试剂→ 紫色反应
⑤DNA+甲基绿→绿色，DNA+二苯胺试剂→蓝色（沸水浴），
RNA+吡罗红→红色
9
⑥线粒体+健那绿→ 蓝绿色（活体染色）
⑦染色体+龙胆紫（醋酸洋红）→ 紫色（红色）
⑧CO2+溴麝香草酚蓝→由蓝变绿再变黄
CO2+澄清石灰水→变浑浊
⑨酒精+重铬酸钾（酸性条件）→ 灰绿色
四、有机物的水解和代谢比较
1、核酸、蛋白质、淀粉、脂肪水解产物和代谢产物的比较
2、葡萄糖、脂肪、氨基酸的代谢途径
10
【例4】★★
（2014 江苏，多选）关于生物组织中还原糖的鉴定，
下列叙述正确的是（
）
A．量取2mL 斐林试剂时应优先选用5mL 量筒而不
用10mL 量筒
B．隔水加热时，试管中液体的液面应低于烧杯中水的
液面
C．在组织样液中加入斐林试剂后试管内液体呈现无色，加热后变成砖
红色
D．实验结束时将剩余的斐林试剂装入棕色瓶，以便长
期保存备用
【例5】★★
（2014 广东）油菜种子成熟过程中部分有机物的变化如图所示，将不
同成熟阶段的种子匀浆后检测，结果正确的是（
）
选项
取样时间
检测试剂
检测结果
A
第10天
斐林试剂
不显色
B
第20天
双缩脲试剂
不显色
C
第30天
苏丹Ⅲ试剂
橘黄色
D
第40天
碘液
蓝色
点对点练习
【例6】★★
（2012 江苏）下表中有关人体细胞化合物的各项内容，正确的是（
）
A．①
B．②
C．③
D．④
编号
化合物
实验检测
组成单
位
主要功能
检测试剂
颜色反应
①
脂肪
苏丹Ⅲ染液
橘黄色
脂肪酸
储存能量
②
糖原
斐林试剂
砖红色
葡萄糖
提供能量
③
蛋白质
双缩脲试剂
紫色
氨基酸
承担生命
活动
④
核酸
甲基绿染液
绿色
核苷酸
携带遗传
信息
【例7】★★
为了验证胰腺的分泌液中有蛋白酶，某学生设计了两组实验，如图所
示，在37℃水浴中保温一段时间后，1、2 中加入适量双缩脲试剂，3
、4 不加任何试剂，下列实验能达到目的是（
）
A．实验①
B．实验②
C．实验①、实验②都能
D．实验①、实验②都不能
11
【例8】★★
（2012 安徽）某同学以新鲜洋葱鳞片叶内表皮为材料，经不同处理和
染色剂染色，用高倍显微镜观察。下列描述正确的是（
）
A．经吡罗红甲基绿染色，可观察到红色的细胞核
B．经吡罗红甲基绿染色，可观察到绿色的细胞质
C．经健那绿染色，可观察到蓝绿色颗粒状的线粒体
D．经苏丹Ⅲ染色，可观察到橘黄色颗粒状的蛋白质
【例9】★★
为进一步确定来源不同的A、B、C、D、E 五种物质(或结构)的具体类
型，进行了下列实验，现象与结果如下：
①各种物质(或结构)的性质、染色反应的结果，见下表：
A
B
C
D
E
来源
猪血马肝蛙表皮棉花
霉菌
水溶性
+
-
+
-
+
灰分
+
-
+
-
-
染色反应
甲基绿溶液
-
-
+
-
-
斐林试剂
-
-
-
-
-
苏丹Ⅲ溶液
-
+
-
-
-
双缩脲试剂
+
-
+
-
+
磺液
-
-
-
-
-
注：+：有(溶解)；-：无(不溶解)；灰分指物质充分燃烧后剩下的部分。
【例9】★★
②A 为红色，检测A 的灰分后发现其中含有Fe 元素。
③将适量的E 溶液加入盛有D 的试管中，混合一段时间后，混合液能
与斐林试剂
发生作用，生成砖红色沉淀。
根据以上实验现象和结果，推断出：
A、________；B、________；C、________；
D、________；E、________。
12
