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专题12 基因工程
一、选择题
题号
1
2
3
4
5
答案
B
A
D
D
A
二、非选择题
1．【答案】（1） ①. 四种脱氧核苷酸（四种dNTP） ②. 引物2 和引物3 ③. 延伸
（2）B
（3）GCTGGACATAAACAC
（4） ①. 农杆菌转化 ②. 卡那霉素
（5）绿色荧光强度和分布
（6）①BpMYB5 基因未成功整合到白桦细胞的染色体DNA 上，导致该基因无法稳定转录和表达，无法
发挥调控耐盐性的功能
②融合基因（BpMYB5-eGFP）在转录过程中出现异常，如启动子未被正常识别、转录产物被降解，导致
基因表达产物（融合蛋白）合成不足
③BpMYB5 基因表达产物（蛋白质）未正确折叠或定位异常，无法正常调控与耐盐相关基因的表达，进
而无法增强白桦的耐盐性
④无缝克隆过程中出现碱基错配，导致BpMYB5 基因功能异常，无法正常发挥调控作用（或其他合理答
案）
2．【答案】（1） ①. 右侧 ②. 5´-CTCGAG-3´ ③. Xho、BsaI(顺序不可颠倒) ④. DNA
连接
（2） ①. Ca2+ ②. p 质粒上是木糖诱导型启动子，在培养基中需要添加木糖，才能诱导H 基因
表达出胞外多糖合成酶
（3） ①. F 菌 ②. D 菌不能产生胞外多糖（EPS），F 菌比E 菌生长迅速，胞外多糖（EPS）产量
高，H 基因整合到细菌DNA 上，不易丢失
3．【答案】（1） ①. 3' ②. F2 和R1 ③. 1 链和4 链 ④. 互为引物
（2） ①. DNA 连接酶 ②. 氨苄青霉素
（3） ①. 37℃和 42℃ ②. 37℃条件下未检测Cly-Noxa 融合蛋白，42℃能检测到（只有42℃能
检测到Cly-Noxa 融合蛋白）
（4）正常细胞凋亡（细菌在未到达肿瘤前就被免疫系统清除，降低疗效）
4．【答案】（1）PCR （2） ①. 3.5kb 和2.5kb（顺序可以互换） ②. 终止子
（3）否，因为经Cre 酶切后5’-Otof 的片段与含3’-Otof 片段的黏性末端没有碱基互补配对，无法连接
（能够与含5’-Otof 片段黏性末端连接的不是含3’-Otof 的片段；能够与含3’-Otof 片段黏性末端连接
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的不是含5’-Otof 的片段）
（4） ①. 耳 ②. 弱
（5）听觉功能（听力）
5．【答案】（1）转座片段（“两个特定序列”、“TR 之间”）
（2） ①. Hind Ⅲ和Not Ⅰ ②. ①
（3） ①. ②、③ ②. 5' ③. AD
（4） ① 辅助质粒 ②. G418 ③. 上清液
6．【答案】（1） ①. 标记基因 ②. 磷酸二酯 ③. 256 ④. DNA 连接酶
（2）5'-CCAT-3'
（3）D （4） ①. 未插入CADR/YFP 的目的基因的空载体，RFP 基因正常表达 ②. 能
7．【答案】（1） ①. DNA ②. 耐高温的DNA 聚合（Taq DNA 聚合） ③. 激活（耐高温
的）DNA 聚合酶（TaqDNA 聚合酶）
（2） ①. 可防止目的基因和质粒反向连接；防止目的基因、质粒的自身环化 ②. BamH Ⅰ切割
会破坏Ti 质粒上的启动子
（3） ①. Ti 质粒中的T-DNA 上 ②. 整合到受体细胞的染色体DNA 上
（4） ①. 投放害虫 ②. 农药
8．【答案】（1）获得能产生特定抗体的B 淋巴细胞
（2） ①. 受体 ②. 克隆化培养 ③. 抗体（阳性）检测
（3） ①. 碱基互补配对 ②. 2 ③. P1、P4
（4） ①. 4 ②. 复性温度太高；引物设计不合理无法与目的基因结合
（5） ①. EcoRI ②. 酶切后形成的片段黏性末端相同，易自我环化；不能保证目标片段与载体定
向连接
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