文档文本内容
基因工程的基本工具
考点1
植物细胞工程
考点2
关注公众号：陆陆高分冲刺 ~领取：最新版“中考高考-总复习”~~~
专题13 基因工程
题号
1
2
3
4
5
6
答案
B
C
D
B
A
B
7.【答案】
(1)显 女性Ⅲ-5（或Ⅱ-5）（为杂合子，）一条X 染色体上携带致病基因即患病（或答：如致病基
因为隐性基因，则女性Ⅲ-5 的父亲Ⅱ-6 也是患者）
(2) a Rsa Ⅰ
(3)基因突变具有不定向性、随机性，且突变频率低，Ⅱ-3 与Ⅰ-1 致病基因均在同一位点出现相同碱基
替换的概率小
(4)
8.【答案】
(1)磷酸二酯 黏性 可能相同
(2)不同PCR 反应的退火温度有差异 不同引物间会互补配对 BsmB Ⅰ酶、DNA 连接酶
(3)5'CGTCTCNgtcgGTGCTGTA……3' 5'CGTCTCNgtgcTGTA……3'
(4)abd
题号
1
2
3
4
5
6
7
8
答案
A
B
D
A
C
B
A
A
9.【答案】(1) 叶肉(含叶绿体的) 反(逆)转录酶、TaqDNA 聚合酶
(2)5'CTCGAGGT3'
(3) 驱动目的基因在光诱导下在叶肉细胞中特异性表达 感受态细胞法（或 Ca ² 处理法）
⁺
潮霉素
(4)CD
(5) 促进 RCA 可提高Rubisco 活力(促进暗反应)，进而提高光合速率
10.【答案】(1)载体自身重新环化、目的基因反向插入载体、多个目的基因插入同一载体
(2) 一小段能与模板链互补配对的短单链核酸 引物2（扩增载体的引物）携带目的基因的同源
序列，引物3（扩增目的基因的引物）携带载体的同源序列
(3) 自身复制必需的核心基因 目的基因α1,3−GT
(4)核遗传物质（基因型）基本一致
11.【答案】(1) 序列数据库 （总）RNA 更换微量移液器的枪头
1
关注公众号：陆陆高分冲刺 ~领取：最新版“中考高考-总复习”~~~
(2) Nsi Ⅰ，Sal Ⅰ 选择Sal Ⅰ和Pst Ⅰ对质粒进行完全酶切，利用DNA 聚合酶将Sal Ⅰ产生的
黏性末端补平
(3) 四环素 1 2 号、3 号导入的重组载体是两个pET 质粒环化形成，4 号导入的是空白pET
质粒
(4)U-DPG 和RA
12.【答案】(1) 逆转录 241-2 启动子和终止子
(2) 在PCR 引物5'端分别引入与载体对应的SmaI 和XhoI 酶识别序列 使目的基因两端产生不同
末端，实现定向连接，并降低载体自连、目的基因自连、目的基因与载体反向连接的概率
(3) 叶肉（叶片）特异性启动子 农杆菌转化 浓度和比例
(4) 类胡萝卜素和番茄红素β-环化酶 对转基因烟草进行低温处理以提高类胡萝卜素的含量、
在花期采取适度低温（控温/冷凉管理）以提高花瓣类胡萝卜素积累、增强花色与品质（或筛选/优化低
温处理条件用于提升桂花观赏与加工品质）
13.【答案】(1)胞吞
(2)fcadb(c)e
(3)荧光强度会随时间逐渐增强
(4) 正常 C → A → B
(5)在蛋白酶识别位点的替换上。原工程菌中蛋白酶P 的识别位点被替换为蛋白酶T 的识别位点，这一改
动使得工程菌在表达目标蛋白时，能够更精确地被蛋白酶T 切割，从而提高目标蛋白的纯度和产率。此
外，TEV 病毒蛋白酶T 具有高度特异性的识别序列，这有助于减少非特异性切割，进一步优化蛋白表达和
加工过程。因此，改进后的工程菌在蛋白表达和纯化方面具有更高的效率和更好的可控性
14.【答案】(1) Pst Ⅰ、Sma Ⅰ 4/四 2/二/两
(2) ① 使目的基因在受体细胞中稳定存在、成功表达和发挥作用并能遗传给下一代 RNA 聚
合酶 E.coli DNA 连接酶或T4 DNA 连接酶
(3) 农杆菌转化法 T-DNA
(4)抗原—抗体杂交
15.【答案】(1)基因表达调控
(2)花发育早期ARF3 在雌花中表达量高，雄花中几乎不表达，且这种差异在阶段1 更明显
2
基因工程的应用和蛋白质工程
考点3
关注公众号：陆陆高分冲刺 ~领取：最新版“中考高考-总复习”~~~
(3)
(4) 雌 协同作用
(5)
16.【答案】(1) 逆转录#反转录 PCR（多聚酶链式反应）
(2) Xba Ⅰ或Pst Ⅰ 质粒上有2 个BamH Ⅰ酶切位点，其中一个位于终止子内部，切割后会破坏
终止子，丢失终止子片段 目的基因和质粒易发生自身环化，目的基因易反向连接，降低重组质粒的
获得效率
(3) 卡那霉素 生长素和细胞分裂素
17.【答案】(1) 染色体DNA 筛选重组DNA 分子
(2) A EcoRI 和HindIII GAATTCTCTCCG Cre 酶
(3) 喷施一定浓度的地塞米松溶液 蓝色
18.【答案】(1) 基质 翻译
(2) B 红 Ptrc-box
题号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
答案
B
D
A
A
C
C
D
C
C
C
11.【答案】(1) Taq 酶（热稳定DNA 聚合酶） 4 种脱氧核苷酸
(2) 大量扩增（扩增数百万至数十亿倍） 反式切割（非特异性切割单链DNA）
3
关注公众号：陆陆高分冲刺 ~领取：最新版“中考高考-总复习”~~~
(3) 碱基互补配对 需要crRNA 引导才能特异性识别靶DNA（普通限制酶可直接识别特定核苷酸
序列）
(4)其他致病菌的基因组中无ompA 基因的同源序列，crRNA 无法与其结合，Cas12a 反式切割活性无法被激
活，荧光探针不会被剪切
12.【答案】(1)构建基因文库、PCR
(2) 复制原点 BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ
(3) 让长叶烯基因在受体细胞中稳定存在，并遗传给下一代；使长叶烯基因能够表达和发挥作用
缺少尿嘧啶 远
(4) 生物 基因工程菌在环境中持续存活和扩散，可能对局部生态系统产生未知影响；存在基因
向环境中其他微生物发生水平转移的潜在风险，造成基因污染
13.【答案】(1) 构建基因表达载体 抑制 精氨酸的合成以瓜氨酸为底物，导致瓜氨酸无法
积累；精氨酸会抑制瓜氨酸的合成，精氨酸浓度越高抑制作用越强
(2) CTL2 菌株因无法合成脯氨酸而生长增殖受到抑制，削弱了瓜氨酸的合成 将PutP 基因敲除
(3) speC speE
(4)能稳定遗传，传代过程中不易丢失
14.【答案】(1) 碳源、氮源 无菌
(2)启动子 Ⅰ：③（木糖诱导型启动子），基因Ⅱ：C（T7RNA 聚合酶基因）；启动子Ⅲ：②（T7 启动
子），基因Ⅳ：B（脂肪酶基因+分泌信号肽基因）
(3)CaCl2（或Ca ² ）
⁺
(4)添加木糖；提供适宜环境条件
(5)ABD
15.【答案】(1) 3′ ③ ② 激活DNA 聚合酶
(2) X-gal 和四环素 白色
(3) 解除 A 蛋白对P2 启动子的抑制作用 碱基互补配对 生长必需基因
(4)当B 物质诱导途径未能杀死工程菌时，可通过调节温度杀死逃逸的工程菌，避免造成环境污染
16.【答案】(1) 上游 当诱导物存在时，激活目的基因的表达
(2)去除P1 中的氯霉素抗性基因（CmR）
(3) Ca2+ 不能 受体细胞中无CmR，在含氯霉素的平板上不能存活
(4) Sac Ⅰ 和 Nco Ⅰ 减少抗生素的使用
4
关注公众号：陆陆高分冲刺 ~领取：最新版“中考高考-总复习”~~~
5
