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树德中学高 2023 级高二下学期 4 月阶段性测试生物试题
时间：75分钟 满分：100分 出题人：肖俊华 审题人：李晓兰 胥鹏宇
一、单选题（共45分，每题3分）
1．人类利用微生物发酵制作食品已经有几千年的历史，下列叙述正确的是（ ）
A．酵母菌、毛霉、曲霉等多种微生物参与了腐乳的制作
B．家庭制作酸奶时，加入少量抗生素可以避免杂菌污染
C．家庭制作果醋时，发酵液表面产生的菌膜由乳酸菌形成
D．制作果酒过程中，定时拧松瓶盖为酵母菌发酵提供O
2
2．发酵工程在食品工业、医药工业、农牧业等许多领域得到了广泛的应用。下列叙述错误的是（ ）
A．通过步骤①～③的处理将土壤稀释了1000倍
A．微生物农药是利用微生物或其代谢物来防治病虫害的
B．步骤②充分振荡的目的是为了增加尿素分解菌的浓度
B．通过发酵工程从微生物细胞中提取的单细胞蛋白可用作家畜、家禽的饲料
C．④⑤两种接种方法均可用微生物的分离、纯化与计数
C．谷氨酸的发酵生产在中性和微碱性条件下积累谷氨酸，在酸性条件下容易形成谷氨酰胺和N—
D．若步骤④平板上统计的平均菌落数为160个，则10克土样中的菌株数约为1.6×108个
乙酰谷氨酰胺
6．细菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在与其他细菌的竞争中占优势，其中tcel蛋白是一种有毒性
D．在青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，使饲料保鲜，动物食用后还能提高免疫力
的分泌蛋白。研究人员利用野生型细菌X及其不同突
变体进行了如下实验：在固体培养基表面放置一张能
3．黑啤因其营养成分丰富、口感纯正，备受人们青睐，享有“黑牛奶”的美誉。黑啤的酿造工艺流程如
隔离细菌的滤膜，将一种菌（下层菌）滴加在滤膜上
下图。下列叙述错误的是（ ）
后再放置第二张滤膜，滴加等量的另一种菌（上层
菌），共同培养后，对上、下层活菌计数得到的结果
如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．实验中的培养皿、固体培养基和滤膜均需要进行
消毒处理
A．发酵过程中发酵液的pH有所降低
B．对上、下层菌计数可以将滤膜菌体稀释后采用细
菌计数板计数
B．麦汁煮沸的主要目的是杀菌和终止相关酶的作用
C．不同品种的啤酒特性与酵母菌的品种密切相关
C．由甲、乙、丙三组结果可推测出tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性
D．应在发酵液中的糖分完全消耗后，终止酵母菌的主发酵过程
D．野生型细菌X在与tcel—tcil双突变体和tcel突变体的竞争中均占优势
4．野生型大肠杆菌能在基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在
7．关于生物工程技术过程中出现细胞融合的操作，下列叙述正确的是（ ）
完全培养基或补充了相应的氨基酸的基本培养基上生长。如图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株
A．植物体细胞杂交技术，可直接用PEG处理两种植物细胞进行膜融合
的部分流程图，①、②、③、④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落。下列叙述错
B．单克隆抗体制备技术，两两融合的细胞都能在选择培养基上生长
误的是（ ）
C．动物体细胞核移植技术，融合细胞可直接移植到受体母牛子宫内获得克隆牛
D．体外受精技术，常以在显微镜下观察到雌、雄原核或两个极体作为受精的标志
8．猪因其生理特性、器官大小以及胚胎发育过程等方面与人类存在高度相似性，已成为“种植”人类器
官极具潜力的动物模型。如图表示我国科学家利用猪作为载体，培育可供人类移植使用的人源肾
脏的相关流程示意图。下列叙述错误的是（ ）
A．图中①、②、③为基本培养基，④为完全培养基
B．紫外线照射的目的是提高突变率，增加突变株的数量
C．经图中C过程原位影印及培养后，可从④中挑取D进行纯化培养
D．图中B的正确操作是将菌液滴加到培养基表面，再用涂布器将菌液均匀的涂布在②表面
5．某生物兴趣小组完成了“某果园土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”的实验，具体操作流程如图所 A．推测SIXI和SALLI两种基因是猪肾脏发育必需的基因
示。下列叙述正确的是（ ） B．去除卵母细胞中的核，指的是去除纺锤体—染色体复合物
C．该实验流程中涉及了体外受精、核移植、胚胎移植等生物技术
D．注入人源干细胞的目的是使人源干细胞分裂分化产生人的器官
2025-4 高二生月4 第1页，共4页9．在制备单克隆抗体的过程中HAT选择培养基可以筛选出融合成功的杂交瘤细胞，一种杂交瘤细胞 A．三种限制酶切割后获得的黏性末端相同
只能产生一种抗体。科学家通过动物细胞融合技术，将两株不同的杂交瘤细胞（A和B）融合形成 B．用限制酶切割右图DNA分子获得目的基因时，被水解的磷酸二酯键有4个
双杂交瘤细胞AB。双杂交瘤细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖，可以产生双特异性抗体AB。据 C．用BclI和BglⅡ切割质粒和目的基因时，形成的重组质粒的碱基排列顺序一定相同
图分析，下列叙述正确的是（ ） D．若用MboI切割质粒，用BclI和BglⅡ切割目的基因，形成的重组质粒可被MboI再次切开
14．当目的基因和载体用同一种限制酶处理，连接后目的基因可能正向插入载体，也可能反向插入载
体，为判断目的基因的插入方向，可设计引物进行PCR后再结合电泳检测。图示为甲、乙、丙3
条引物在正确重组质粒中的相应位置，其中目的基因的长度为300bp（bp：碱基对数）。下列叙
述错误的是（ ）
A．体外培养双克隆抗体需要定期更换培养液以创设无菌环境
B．双杂交瘤细胞同时识别α、β抗原后，才能产生双特异性抗体
C．对培养到一定密度的双杂交瘤细胞进行传代培养时，不需要使用蛋白酶使之分散
D．杂交瘤细胞A、B混合并诱导融合后，利用HAT选择培养基筛选出双杂交瘤细胞AB
10．科学家尝试采用多种方法获得多能干细胞 (iPS细胞)，目前iPS 细胞可用于治疗人的镰状细胞贫
血、骨关节炎等疾病，下列叙述错误的是（ ）
A．iPS 细胞可由成纤维细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞等诱导生成
B．将iPS 细胞分裂、分化形成的特定组织移植回患者后，患者需服用免疫抑制剂
C．iPS 细胞体外增殖方式为有丝分裂，体外分化过程与细胞内基因表达的调控有关
D．可借助载体将特定基因导入细胞或直接将特定蛋白导入细胞来诱导形成iPS细胞
A．PCR扩增的原理与生物体内DNA复制的原理相同
11．间充质干细胞（MSC）是一类起源于中胚层，在成年人的牙髓、脂肪等组织中存在的多能干细胞。
B．抗性基因作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入目的基因
MSC具有一种特殊的“内源性不对称分裂”增殖方式，其分裂产生的子细胞中只有一个会进一步分
C．选取引物甲、丙，扩增出450bp长度片段时，可以说明目的基因正接
化，另一个则保持原状。此外，不同器官血管内皮细胞还能够与MSC互相识别，并介导后者穿
D．选取引物甲、乙，扩增出400bp长度片段时，可以说明目的基因反接
透血管帮助修复受损的器官。下列叙述正确的是（ ）
15．大引物PCR定点突变常用来研究蛋白质结构改变导致的功能变化。单核苷酸的定点诱变仅需进行
A．培养MSC的培养基中应加入无机盐、水、琼脂和血清等
两轮PCR即可获得，每一轮PCR包括30次循环，第一轮加诱变引物和侧翼引物，第一轮产物作
B．MSC分化为功能细胞来修复器官时，MSC数量会逐渐减少
第二轮PCR扩增的大引物。如图表示利用大引物PCR对基因M进行定点诱变。下列叙述正确的
是（ ）
C．MSC分裂、分化为功能细胞的过程中发生了基因重组
D．利用MSC治疗受损器官时，可将培养的MSC通过静脉注入体内
12．某同学利用洋葱为实验材料，进行DNA粗提取和鉴定实验。下列叙述错误的是（ ）
A．该同学也可选择鸡血、猪肝等动物细胞为实验材料提取DNA，但方法可能有所不同
B．将洋葱切碎加研磨液研磨、过滤后，滤液放置4℃冰箱静置几分钟后，DNA存在于沉淀物中
C．向含有DNA的粗提取液中加入体积分数为95%的冷酒精后，出现的白色丝状物为DNA
D．鉴定DNA时，需先将DNA溶解在2mol/LNaCl溶液，再加入二苯胺试剂并进行沸水浴加热
13．基因工程中使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组质粒构建和筛选。如图表示目的基
因及质粒上的酶切位点。已知BclⅠ的识别序列和切点是-T↓GATCA-，BglⅡ的识别序列和切点
是-A↓GATCT-，MboI的识别序列和切点是-↓GATC-。下列叙述错误的是（ ）
A．第一轮PCR中，至少需要2个循环才能获得相应的大引物模板
B．第二轮PCR所用的引物是第一轮PCR的产物DNA的两条链
C．扩增的定点诱变产物通常需具备起始密码、终止密码等结构才能进行转录
D．可在引物的3'端设计两种限制酶识别位点有利于目的基因插入载体
2025-4 高二生月4 第2页，共4页现”）细胞的全能性，理由是 。
二、非选择题（共55分） (3)通常情况下，免疫器官的重量有所增加则表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融
16．（11分）合成塑料是一种非天然的石油基塑料，由于分子量过大而难以通过生物膜被微生物 合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下
降解。研究发现，某些昆虫的肠道内存在PE(一种合成塑料)降解细菌。现欲从昆虫的肠道中筛选能够 表。
降解PE的菌株，过程如下图所示。
组别 A组 B组 C组（空白对照组）
三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的 三白草和鱼腥草直接混合后的
实验 蒸馏水提取物 蒸馏水提取物
处理
每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量
①表格中C组的实验处理为 。
②若实验结果为 ，则支持利
(1)选择培养过程中，所使用的培养基中应加入 作为唯一碳源，目的是 。
用原生质体融合技术将复方的配伍提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产。
划线纯化过程中，接种环在固体培养基的表面连续划线的目的是 。
(2)某研究团队从昆虫肠道中筛选出能够降解PE的两种细菌(YT1和YP1)，将其分别在加入PE薄
18．（11分）骆驼被称为“沙漠之舟”的哺乳动物，只有单峰骆驼和双峰骆驼两种。其中单峰骆驼
膜的培养液中培养，培养液中细胞数目变化及PE失重率变化如下图。(注：PE失重率指在一定条件下，
曾经分布于阿拉伯半岛，濒危动物保护组织宣布单峰骆驼野外灭绝（只生活在栽培、圈养条件下即认
PE材料失去的重量与其原始重量的比值。)
为该分类单元属于野外灭绝，但在人类活动区会有驯养）。近些年，在我国戈壁无人区，科学家又发
现了小规模野化单峰骆驼群。科学家欲通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示的研
究。请根据所学知识回答下列问题：
据图可知，两种细菌中降解PE能力较强的是 ，理由是 。
(3) 除降解塑料的微生物菌株的分离提纯应用外，开发新的塑料替代品也是解决“白色污染”的重
要途径。羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特
性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。由于嗜盐细菌能够在高pH、高NaCl
浓度下正常生长，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，该系统不需灭菌的关键步骤
是 ，其原因是 。
(1)胚胎工程中一般注射_______________处理A使其超数排卵。①过程是受精过程，为防止多精
17．（10分）中医治疗疾病多用复方，三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者
入卵所发生的生理反应有__________________________________（填2个）。
因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”。科研人员将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使
(2)②过程通过显微操作去除受体卵子细胞核的目的是使重构胚的核遗传物质
用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产的具体操作如图。
__________________。胚胎移植的实质是______________________________________________。
(3)③过程之后需要将获得的重构胚激活，使其在适宜的培养液中培养至 阶段进
行胚胎移植，欲获得更多的胚胎可以对囊胚进行胚胎分割操作，操作过程需要特别注意的问题是必须
将 。若要胚胎移植前对E进行性别鉴定应选 细胞，避免对胚胎造
成影响。
(1)图1中①过程通过酶解法去除 获取原生质体，过程②诱导融合的化学方法有
（写出两种）。
(2)将愈伤组织接种到适宜培养液中进行细胞培养，细胞培养的过程 （填“体现”或“未体
2025-4 高二生月4 第3页，共4页19．（11分）在艾滋病疫苗的早期研究中，科研人员通过提取HIV感染自愈者体内的相应免疫 PCR反应需要在一定的缓冲液中才能进行，该过程除加入上述引物外，还需加入4种脱氧核苷酸
细胞，将其与骨髓瘤细胞进行融合，从而制备出能够产生HIV抗体的杂交瘤细胞，具体流程如图1所 和 （填2个）。
示。随后转基因技术被运用到了HIV的疫苗研制工作中，科学工作者研制的第二代HIV疫苗的简要 (2)过程②是用两种限制酶同时切割的，与用一种限制酶切割相比，优点是 。
操作过程如图2所示。回答下列问题。 过程④中，若实验成功，应在乳腺上皮细胞中检测到 蛋白。
(3)2A肽的“自剪切”原理如下图，字母G和P为编码2A肽的mRNA序列对应的最末端两个氨基
酸。据下图推测2A肽“自剪切”的机理是 。
(1)图1中过程①的生物技术称为 ；要获得单克隆抗体，过程中最关键的操作
要点是：首先筛选出杂交瘤细胞；再进一步筛选出 。
(2)图2中科学家用该方法产生疫苗进行预防接种，该技术的核心步骤为［ ］ （［ ］
中填图2中序号， 填步骤名称）。①过程需要逆转录酶的参与，②过程需要的工具酶为
____________。
(3)为获取图2中的DNA片段（目的基因），科学家需要根据_____________________设计引物。
若有a条起始的RNA片段，经过图2的①过程，再进行PCR循环30次，理论上PCR过程需要引物
共___________（用算式表示）个。
20．（12分）研究发现FWDV2A是一种“自剪切”多肽，简称“2A肽”，能将自身切成4个片段，
可用于构建多基因表达载体。将其基因置于质粒上hIL-2（人白细胞介素2）基因和绿色荧光蛋白基因
（EGFP）之间，可以避免这两个基因表达出一个融合蛋白而难以发挥作用。下图是FWDV2A基因、
hIL-2基因、EGFP基因乳腺特异性表达载体的构建和验证其在乳腺上皮细胞中表达的主要过程。请回
答下列问题：
(1)过程①中的引物1、引物2的序列应分别选择 和 （填字母）。
A．5′-CCGGGCCCATGTACAGGATCCTGTACAT-3′
B．5′-CCATCGATTCAAGTTAGTGTTGAGATGA-3′
C．5′-CCCTCGAGATGTACAGGATGCAACTCCT-3′
D．5′-CCGAGCTCAGTGTTGAGATGAATGGATC-3′
2025-4 高二生月4 第4页，共4页树德中学高 2023 级高二下学期 4 月阶段性测试生物试题参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 A B D A D C D C C B
题号 11 12 13 14 15
答案 D B C C A
16．（11分）(1)PE（1分） 筛选出能够降解PE的微生物菌株（1分） 将聚集的菌种逐步
稀释(分散到培养基的表面)获得纯培养物
(2)YP1（1分） YP1组细胞数目较少，PE失重率较高
(3)配制高盐、高pH培养基 杂菌在高盐浓度、高pH下难以生长繁殖，但该菌株可持续发酵
17．（10分）(1)细胞壁（1分） 聚乙二醇（PEG）、高Ca2＋-高pH融合法
(2)未体现（1分） 没有发育为完整生物体，也没有分化成其他各种细胞
(3)加入等量的蒸馏水 A、B两组小鼠的胸腺重量相同且都大C组
18．（11分）(1)促性腺激素（1分） 透明带反应、卵细胞膜反应
(2) 完全来自供体A野化单峰骆驼 早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
(3) 桑葚胚或囊胚（1分 任答一个即给分） 内细胞团均等分割 滋养层（1分）
19.（11分）(1)动物细胞融合（1分） 能产生特定（特异性强、灵敏度高的）抗体的杂交瘤细胞
(2)②构建基因表达载体 限制酶、DNA连接酶
(3)目的基因DNA片段上游和下游的部分核苷酸序列 a×（231-2）
20．（12分）(1)D C DNA模板、耐高温的DNA聚合酶
(2)避免酶切后的目的基因和质粒发生自身环化或目的基因反向连接 游离的hIL-2蛋白和EGFP蛋
白
(3)G与P之间不能形成肽键
2025-4 高二生月4 第5页，共4页
