夜雨聆风
研产提速神器!生物制药表征分析工具酶,精准度拉满!
背景介绍
用作生物药物的治疗性抗体结构复杂，异质性高，在制造过程中需要严格监管和控制。抗体分子大小异质性是抗体的生产工艺优化、生产过程控制及放行分析中重要质控指标之一。为了确保单克隆抗体及其他生物分子药物的安全性和有效性，需要对这些药物进行全面深入的表征分析。
随着获批的抗体药物数量逐年急剧增加，例如mAb、Fc融合蛋白、Fab、ADC、双特异性抗体和双特异性T细胞接合剂(BiTE)，了解单个翻译后修饰(PTM)可以更好地分析和预测治疗性抗体的体内功效、药代动力学和作用机制。
治疗性抗体、融合蛋白等的表征通常从三个水平进行，包括自上而下的完整分子量水平、自下而上的多肽水平、亚基水平。常用作治疗性蛋白理化分析的工具酶有PNGase F酶、IdeS酶、Papain、GinsKHAN、GlySERIAS酶、肽图分析用的胰蛋白酶Trypsin、GluC、LysC、糜蛋白酶Chymotrypsin等。
Seebio可提供一系抗体/蛋白理化分析工具酶，用于协助单克隆抗体、融合蛋白药物、生物类似药等生物药的表征分析及其相关翻译后修饰，助力生物药物的开发和质量控制。
蛋白测序肽图分析
| 蛋白酶 | 酶切位点 | 特点 |
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重组胰蛋白酶（质谱级） |
赖氨酸和精氨酸残基中的羧基端 |
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重组赖氨酰内切酶(Lys-C) |
赖氨酸羧基侧的酰胺、酯和肽键 |
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Glu-C蛋白酶 |
谷氨酸或天冬氨酸残基羧基端肽键 |
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重组人α-糜蛋白酶 |
酪氨酸，色氨酸和苯丙氨酸的羧基端肽键 |
特别适用于膜蛋白分析。 |
糖基化分析工具酶
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糖苷酶 |
名称 |
酶切位点 |
特点 |
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唾液酸修饰 |
唾液酸酶(a2-3,6,8) |
糖蛋白和寡聚糖上通过a2-3,a2-6,a2-8键连接的唾液酸 |
可同时作用于N-羟乙酰神经氨酸和N-乙酰神经氨酸。 |
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唾液酸酶(a2-3,6,8,9) |
糖蛋白和寡聚糖上通过a2-3,a2-6,a2-8和a2-9键连接的唾液酸 |
可同时作用于N-羟乙酰神经氨酸和N-乙酰神经氨酸； 可以忍受0.5%-1.0%的去污剂。 |
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N-糖基化修饰 |
PNGase F |
天冬酰胺和最内侧的GIcNAc之间的糖苷键 |
适用于抗体和糖蛋白的N-糖基完全去除； 可在变性与非变性条件下切割糖蛋白。 |
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重组Endo H |
N-糖蛋白中的高甘露糖和某些杂合型寡聚糖的壳二糖核心结构 |
适用于抗体或者其它糖蛋白的N-连接高甘露糖的完全去除。 存储液中不含甘油。 |
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O-糖基化修饰 |
O糖蛋白酶 |
粘蛋白型O-连接糖(无论是否唾液酸化)的丝氨酸或苏氨酸残基 |
适用于O-糖基化分析； 无需唾液酸酶预先处理。 |
抗体切割酶
| 名称 | 酶切位点 | 特点 |
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IdeS蛋白酶 |
特异识别IgG,并在IgG下铰链区的特定位点 |
可将lgG水解为完整的F(ab’)2片段和Fc片段。 |
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IdeZ蛋白酶 |
特异识别IgG,并在IgG下铰链区的特定位点 |
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标签切除工具酶
| 名称 | 酶切位点 | 特点 |
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重组TEV蛋白酶（rTEV Protease） |
严格识别七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S)切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸/丝氨酸之间。 |
一种用来切除融合蛋白上标签序列的常用工具酶，较EK、SUMO等蛋白酶的位点专一性更强，具有高活性和高特异性的特点。 |
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重组肠激酶-rEK |
特异性识别Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列，水解Lys C端肽键 |
特异性识别并切割DDDDK序列，用于去除N端融合标签。 |
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分选酶 A |
切割苏氨酸（T）和甘氨酸（G）之间的肽键，然后将切割后的蛋白羧基端与多聚甘氨酸（通常为GGGGG）受体桥连，完成锚定。 |
特异性识别LPXTG基序（X为任意氨基酸）。 |
蛋白工具酶汇总
蛋白工具酶
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DCE0060U |
重组胰蛋白酶（质谱级，液体） Recombinant Trypsin (Mass Spectrometry Grade, Liquid) |
25ug/100ug |
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DCE0060T |
重组胰蛋白酶（质谱级，冻干） Recombinant Trypsin (Mass Spectrometry Grade, Lyophilized) |
25ug/100ug |
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EXK0369B |
重组赖氨酰内切酶 Recombinant Lysyl Endopeptidase |
20ug |
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AXJ4266C |
重组Glu-C蛋白酶(V8蛋白酶)，冻干 Recombinant Glu-C Protease (V8 Protease), lyophilized |
25ug/100ug |
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EXJ4266F |
重组Glu-C蛋白酶(V8蛋白酶) Recombinant Glu-C Protease (V8 Protease) |
20ug/100ug |
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DCL0640B |
重组人α-糜蛋白酶 Recombinant Human α-Chymotrypsin |
20ug/50ug/100ug |
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AXJ1330B |
重组金属蛋白酶Asp-N Recombinant Metalloprotease Asp-N |
5ug/10ug/20ug |
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DBY0114B |
重组羧肽酶B(rCPB) Recombinant Carboxypeptidase B, rCPB |
10mg |
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ECE0441E |
PNGaseF重组糖苷酶 PNGaseF Recombinant Glycosidase |
20KU/40KU |
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DCE0447C |
重组EndoH Recombinant EndoH |
3KU/15KU |
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DCE1244A |
重组EndoS（糖苷内切酶S） Recombinant EndoS (Endoglycosidase S) |
6KU/30KU |
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DCE0448B |
O-糖蛋白酶 O-glycoproteinase |
20U/100U |
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DCE0448C |
O-糖苷酶 O-glycosidase |
2000KU/10000KU |
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DCE0457F |
唾液酸酶 (α2-3,6,8) Sialidase (α2-3,6,8) |
500U/2KU/10KU |
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DCE0457E |
唾液酸酶 (α2-3,6,8,9） Sialidase (α2-3,6,8,9) |
2KU/10KU |
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ECE0711A |
IdeS蛋白酶 IdeS protease |
700U |
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ECE0712A |
IdeZ蛋白酶 IdeZ protease |
1KU/2KU |
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Seebio®重组烟草蚀纹病毒蛋白酶（TEV酶） Recombinant TEV Protease |
1KU/5KU/10KU |
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ECE0720A |
Seebio® 分选酶A Sortase A |
50μg/100μg/1mg/支 |
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