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AI动物行为学——悬尾实验测试方案

AI动物行为学——悬尾实验测试方案

小鼠悬尾精细行为视频分析系统是通过AI赋能深度学习神经网络算法,结合云计算技术,能够快速追踪并分析动物的目标行为。其核心技术包括数据库、算法库、医学指标库等多个方面,这些技术共同构成了全自动化、智能化、高通量的动物精细行为智能检测平台。通过视频追踪与无线传感技术的结合,该系统能够实现对生物模式动物精细行为的检测,包括各种运动类、时间类等基础医学指标的捕获和分析。

一、概述

悬尾测试在一个不透明的塑料箱中进行,该箱子可以需要把被测试的动物与其他动物隔开,以便平行测试动物。建议使用30×30,至少40厘米高的箱子。可以将胶带贴在尾巴上,胶带足够结实以承受小鼠的重量,但也要易于移除以避免损伤皮肤。小鼠在悬挂时不能碰到隔间的墙壁(距离任何物体至少15cm)。正如Steru等人(1985)描述的那样,小鼠通过距其尾巴末端2cm处的胶带固定在挂钩上。如果使用自动化系统/传感器记录运动,则应将其归零并优化以忽略呼吸运动。为了获得对比度,实验者应根据动物的颜色考虑使用背景(例如,为白 化病动物使用深色箱子,为其他颜色的动物使用浅色箱子,也可以使用背光板让老鼠的运动呈现的更加的清晰)。

为了便于清洁,可以考虑使用可拆卸的铝托盘来收集粪便或尿液。每次测试后,应用溶液、95%乙醇或类似物质擦拭箱子。

如果使用表现出尾巴攀爬行为的品系,则应使用攀爬阻挡器。这些阻挡器可以在实验室中用聚碳酸酯管制成,可以将用聚碳酸酯管剪成几段,每个老鼠的尾巴套一段管子,防止老鼠的攀爬行为。

二、实验协议

悬尾测试被广泛用于评估啮齿类动物的抗抑郁药效果,其基于的假设是,当动物被悬挂时,它们会在躁动和静止不动的状态之间交替。如果小鼠处于无法逃脱的情境中,它们会保持静止不动的姿态。因此,当使用有用的抗抑郁药时,实验者应期待小鼠静止不动的时间减少。

至关重要的是,尽可能减少所有可能影响动物行为的环境因素。测试测量在盲法条件下进行。此外,整体实验设计应体现变量之间的适当平衡(即所有实验组都应在每个测试会话和每个隔间中进行测试)。

2.1 设备和测试室的准备

在开始测试之前,应确保所有设备都已准备就绪。应在将动物带到测试室之前剪好胶带、测试视频摄像机的正常功能,尽量减少动物的应激反应和适应时间(至少一小时))。此外,如果使用自动化系统来记录和分析结果,则应在处理小鼠之前确定测试会话。

2.2 小鼠准备

如果使用已知会攀爬尾巴的小鼠品系,应在尾巴周围使用防攀爬装置。然后,在尾巴末端贴上胶带,并将其连接到挂钩/悬挂杆上,实验者应确保胶带足够牢固以支撑住尾巴。此过程应尽快完成,以尽量减少动物的应激反应并避免引入干扰变量。

2.3 测试

接下来应开始测试,如果进行视频录制,则以不妨碍摄像机视野的方式悬挂小鼠。

使用TST(悬尾测试)的研究通常进行6分钟的单次测试会话。小鼠的尾巴保持直线悬挂。每个会话结束后,将小鼠放回饲养笼中,并轻轻取下胶带。然后将笼子送回动物室。消 毒仔细擦拭收集托盘和装置。

如果有多名实验者将分析数据,则统一标准,以避免观察者间差异引起的变异性。强烈建议新研究人员与更有经验的同事一起接受培训。在评分小鼠行为时,Can等人(2012)建议测量小鼠进行活跃运动的时间,然后计算静止不动的时间,而不是直接测量静止不动的时间。

三、注意事项:

Chermat等人(1986)报告了对TST(悬尾测试)在大鼠中的适应性修改。然而,Can等人(2012)建议不要在大鼠或异常重的小鼠中使用TST,因为通过尾巴支撑这些动物的体重可能会引起痛

在协议修改方面,Garcia-Prado等人(2016)测量了5分钟的静止不动持续时间。Sanna等人(2016)将测试分析分为两个时间段——前2分钟为小鼠对无法逃避的应激作出反应的时间段,后4分钟为动物表现出行为绝望的时间段。

四、样本数据

从TST(悬尾测试)获得的数据通常通过绘制不同实验组中小鼠静止不动的时间(平均值±标准误差)来可视化。可以在同一张图中比较不同的基因型、抗抑郁药或剂量。以下示例图表是不同抗抑郁药(A)和同一抗抑郁药的不同剂量(B)之间的比较示例:

这种呈现结果的方式使得比较不同抗抑郁药和/或剂量所引发的效果变得容易。

此外,自动化系统还能够进一步分析运动的能量和功率,这些结果可以以表格的形式呈现。这些结果通常以任意单位(平均值±标准误差)来表示,因为它们不直接对应于物理上的能量或功率单位,而是根据系统内部算法计算得出的相对值。

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