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发酵工程及其应用
考点1
专题12 发酵工程与细胞工程
4 大考点概览
考点1 发酵工程及其应用
考点2 植物细胞工程
考点3 动物细胞工程
1．（2026·河南信阳·一模）与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量均明显
提高，在食品工业、医药工业、农牧业等许多领域得到了广泛的应用。下列有关发酵工程和传统发酵技
术的描述，错误的是（ ）
A．传统发酵制作食醋时，需将发酵容器置于通风处并定期搅拌，以促进醋酸菌发酵产生醋酸
B．传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，发酵工程以单一菌种的液体发酵为主
C．单细胞蛋白是通过发酵工程从酵母菌等微生物细胞中提取获得的，可以作为食品添加剂
D．利用发酵工程生产的微生物农药，可利用微生物或其代谢物防治病虫害，属于生物防治
【答案】C
【解析】A、醋酸菌为好氧细菌，发酵产醋酸需要充足的氧气，通风和定期搅拌可增加发酵液中的溶氧量，
利于醋酸菌发酵，A 正确；
B、传统发酵通常利用自然环境中的混合菌种，以固体发酵、半固体发酵为主；发酵工程需要严格无菌环
境，接种单一纯净的优良菌种，多采用液体发酵以提升发酵效率，B 正确；
C、单细胞蛋白是指通过发酵获得的大量微生物菌体本身，而非从微生物细胞中提取的物质，可作为食品
添加剂或饲料，C 错误；
D、微生物农药是利用微生物本身或其代谢产物防治病虫害，没有使用化学农药，属于生物防治，D 正确。
故选C。
2．（2026·河北·一模）微生物培养成功的关键是防止杂菌污染。灭菌、消毒、无菌操作是实验中常见
的操作。下列叙述正确的是（ ）
A．测定土壤中尿素分解菌数目时，取回的土壤样品应进行灭菌以去除杂菌
B．加入酸碱调节物质调节培养基pH 的操作通常在灭菌前进行，防止造成污染
C．体外培养菌株时，必须向培养基添加一定量的抗生素以防止杂菌污染
D．若筛选纤维素分解菌的培养基受到污染，则其上生长的杂菌也一定能分解纤维素
【答案】B
【解析】A、测定土壤中尿素分解菌数目时，土壤样品中的尿素分解菌是实验的研究对象，若对土壤样品
灭菌会杀死目标菌，无法完成计数，A 错误；
B、培养基制备的常规流程为计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板，灭菌前调节pH 可避免灭菌后调
节操作引入杂菌造成污染，B 正确；
C、抗生素会抑制细菌的生长繁殖，若培养的目标菌株为细菌，添加抗生素会杀死目标菌；且无菌操作规
范的情况下无需额外添加抗生素，C 错误；
D、筛选纤维素分解菌的培养基以纤维素为唯一碳源，但若培养基中已有纤维素分解菌生长，其分解纤维
素产生的小分子糖类可被不能分解纤维素的杂菌利用，因此杂菌不一定能分解纤维素，D 错误。
3．（2026·青海西宁·一模）青海互助青稞酒是产自青海省海东市互助土族自治县的国家地理标志保护
产品，被誉为“中国青稞酒之源”，其传统酿造技艺被列入国家级非物质文化遗产名录。据了解，互助
青稞酒是以岩木窖池为发酵容器，而多年反复利用的窖池内壁的窖泥中含有多种与酿酒有关的微生物。
下列叙述错误的是（ ）
A．互助青稞酒的酿造是以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用下完成的
B．窖池中的各种微生物会形成相对稳定的体系，从而不容易被杂菌污染
C．酿酒原料以青稞为主，经发酵形成的酒糟中可分离出产淀粉酶的微生物
D．若对分离出的酿酒酵母做扩大培养，则需在二氧化碳或氮气环境中进行
【答案】D
【解析】A、青稞酒酿造主要依靠酿酒酵母，由于窖泥中含有大量与酿酒相关的微生物，故互助青稞酒的
酿造是以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用下完成的，A 正确；
B、多年反复使用的窖池中微生物群落经长期演替形成相对稳定的体系，种间相互制约可抑制外来杂菌的
生长繁殖，因此不易被杂菌污染，B 正确；
C、青稞的主要有机物为淀粉，发酵过程中需要产淀粉酶的微生物将淀粉分解为单糖才能被酵母菌利用，
因此酒糟中可分离出产淀粉酶的微生物，C 正确；
D、对酿酒酵母进行扩大培养时，需在有氧环境中培养，促进酵母菌通过有氧呼吸获得大量能量用于增殖，
在二氧化碳或氮气环境中不利于酵母菌大量繁殖，D 错误。
4．（2026·北京昌平·一模）研究人员从重金属污染土壤中筛选出一株耐镉并促进植物生长的菌株——
高地芽胞杆菌。相关叙述错误的是（ ）
A．实验中应使用含镉培养基作为选择培养基
B．可用稀释涂布法或平板划线法筛选高地芽胞杆菌
C．大规模发酵培养该菌株需控制溶氧、温度、pH 等条件
D．高地芽胞杆菌可替代化肥用于镉污染农田的农业生产
【答案】D
【解析】A、选择培养基可允许特定类型微生物生长，抑制其他微生物，筛选耐镉菌株时使用含镉的选择
培养基，只有耐镉的菌株可存活，A 正确；
B、稀释涂布平板法和平板划线法是分离纯化微生物的常用接种方法，可用来筛选获得高地芽胞杆菌的单
菌落，B 正确；
C、大规模发酵培养高地芽胞杆菌时，溶氧、温度、pH 等条件会直接影响菌株的生长代谢，需进行精准调
控，C 正确；
D、高地芽胞杆菌仅具备耐镉、促进植物生长的作用，无法为植物提供生长必需的N、P、K 等矿质营养，
不能替代化肥的功能，D 错误。
5．（2026·湖北省直辖县级单位·一模）中国饮食文化源远流长，发酵技艺更是先民智慧的结晶。千百
年来，果酒、果醋、腐乳和泡菜等传统发酵食品不仅丰富了百姓餐桌，更成为中华饮食文明的重要符号。
下列相关叙述正确的是（ ）
A．利用葡萄制作果酒时，需每隔12 小时打开瓶盖一次，以排出酵母菌无氧呼吸产生的CO2
B．在果醋发酵过程中，通过控制发酵温度并持续通入无菌空气，可促进醋酸菌将乙醇直接氧化成乙
酸
C．腐乳制作过程中，毛霉等多种微生物产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸
D．泡菜发酵后期，亚硝酸盐含量先下降后上升，应在发酵早期食用以避免中毒
【答案】C
【解析】A、制作果酒时，每隔12 小时应拧松瓶盖（不是打开瓶盖）排出CO2，打开瓶盖会引入杂菌，导
致发酵失败，A 错误；
B、果醋发酵时，通过控制发酵温度并持续通入无菌空气，醋酸菌先将乙醇转化为乙醛，再将乙醛氧化为
乙酸，B 错误；
C、腐乳制作过程中，毛霉等微生物产生的蛋白酶，能将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，这个
过程可以提升腐乳的风味和营养价值，C 正确；
D、泡菜发酵过程中，亚硝酸盐含量先上升后下降，发酵后期亚硝酸盐含量较低，此时食用更安全，D 错
误。
6．（2026·贵州·一模）某生物小组欲利用以下培养基从土壤中分离某种微生物，下列对该实验的后续
操作及结果分析正确的是（ ）
成分
葡萄糖
KH2PO
4
K2SO
4
NaC
l
CaCO
3
MgSO4 7H2
O
蒸馏
水
琼脂粉
含量
10g
0.2g
0.2g
0.2
g
5g
0.2g
1000m
L
20g
A．配制好的培养基先分装到锥形瓶后再进行高压蒸汽灭菌
B．该培养基灭菌后需冷却至40℃再进行倒平板操作
C．用无菌水将土样进行系列稀释后用接种环进行接种、计数
D．该无氮培养基可用于硝化细菌等固氮菌的分离与计数
【答案】A
【解析】A、培养基的制备流程为计算、称量、溶化、调pH、分装、灭菌，因此配制好的培养基，分装到
锥形瓶，塞好棉塞，用牛皮纸将瓶口包裹好，放入高压蒸汽灭菌锅灭菌，A 正确；
B、培养基灭菌后需冷却至50℃左右再进行倒平板操作，40℃时琼脂已接近凝固温度，无法顺利完成倒平
板操作，B 错误；
C、对土样稀释液接种并计数需要用稀释涂布平板法，使用涂布器接种，接种环用于平板划线法，仅能分
离纯化微生物，无法用于计数，C 错误；
D、该培养基不含氮源，属于筛选固氮微生物的选择培养基，但硝化细菌不属于固氮菌，无法利用空气中
的氮气作为氮源，D 错误。
7．（2026·辽宁丹东·一模）青霉素是人类发现的第一种抗生素，其工业化生产流程如图所示。下列叙
述正确的是（ ）
A．由于青霉素的杀菌作用，④过程不需严格灭菌
B．发酵罐中发酵是该工程的中心环节，需将pH 值调到中性或弱碱性
C．发酵过程中需从下方的充气口通入无菌空气以提高溶氧量
D．过程⑤常用的方法是过滤和沉淀，可从分离出的菌种中提取到单细胞蛋白
【答案】C
【解析】A、青霉素仅对细菌有杀菌作用，且发酵生产必须防止杂菌污染（杂菌会竞争营养、影响青霉素
产量），培养基的④灭菌过程必须严格进行，A 错误；
B、发酵罐发酵是发酵工程的中心环节，但青霉菌（真菌）发酵适宜pH 为微酸性，中性或弱碱性是细菌
类发酵的适宜pH，B 错误；
C、青霉菌是异养需氧型微生物，发酵过程需要从下方通入无菌空气保证溶氧量，满足青霉菌的有氧呼吸
需求，C 正确；
D、单细胞蛋白是单细胞微生物（酵母、细菌等）的菌体本身，青霉菌是多细胞真菌，且青霉素生产的目
的产物是青霉素，分离得到的菌体不是用于提取单细胞蛋白，D 错误。
8．（2026·四川宜宾·一模）下表是金黄色葡萄球菌对两种抗生素耐药性实验结果。相关叙述正确的是
（ ）
抗生素种类
抑菌圈大小（cm）
5mg/m
对照组
第一代
第二代
第三
代
第四代
第五代
第六代
四环素
4.00
3.53
3.07
3.03
2.97
3.06
恩诺沙星
2.70
2.33
1.63
1.93
1.77
1.90
A．实验中对照组①应用不含抗生素的滤纸片进行处理
B．四环素对金黄色葡萄球菌的抑菌效果要比恩诺沙星弱
C．实验中可使用平板划线法对金黄色葡萄球菌进行接种
D．据结果推测持续使用同种抗生素抑菌圈的大小保持不变
【答案】A
【解析】A、该实验的目的是探究金黄色葡萄球菌对两种抗生素的耐药性，对照组应设置为不含抗生素的
滤纸片处理，以此来对比含抗生素滤纸片的作用效果，A 正确；
B、从表中数据可知，在相同代数时，四环素的抑菌圈大小总体比恩诺沙星的抑菌圈大，所以四环素对金
黄色葡萄球菌的抑菌效果要比恩诺沙星强，B 错误；
C、平板划线法不能使细菌均匀分布在培养基上，而本实验需要观察抑菌圈的大小，要求细菌均匀分布，
所以一般采用稀释涂布平板法进行接种，C 错误；
D、由表中数据可知，随着代数的增加，两种抗生素的抑菌圈大小都发生了变化，说明持续使用同种抗生
素，抑菌圈的大小会改变，D 错误。
9．（2026·天津河西·一模）天津地处九河下梢，东临渤海，独特的地理环境孕育了众多知名特产。下
列与天津特产相关的描述，错误的是（ ）
A．“小站稻”米粒饱满，其胚乳中富含淀粉，淀粉的单体与糖原相同，均为葡萄糖
B．“宝坻黄板泥鳅”肉质鲜美，蛋白质含量高，其细胞中蛋白质的合成起始于游离的核糖体
C．“七里海河蟹”蟹黄肥美，富含胆固醇和磷脂，二者均可构成动物细胞膜的成分
D．“独流老醋”醋香浓郁，其发酵过程涉及的主要微生物最适生长温度约为28℃
【答案】D
【解析】A、淀粉和糖原均属于多糖，二者的单体都是葡萄糖，A 正确；
B、细胞内所有蛋白质的合成都起始于游离的核糖体，分泌蛋白仅在合成一段信号肽后转移到附着于内质
网的核糖体上继续合成，B 正确；
C、磷脂是构成细胞膜基本支架（磷脂双分子层）的核心成分，胆固醇是动物细胞膜的重要组成成分，二
者都参与动物细胞膜的构成，C 正确；
D、食醋发酵的主要微生物是醋酸菌，醋酸菌的最适生长温度为30~35℃，D 错误。
10．（2026·北京朝阳·一模）研究者筛选西北高原乳酸菌株，通过深层液态发酵中药，提升药效。下
列叙述错误的是（ ）
A．筛选菌株活性优于野生菌，更适配中药成分环境
B．发酵降解大分子为小分子，可提升药物吸收效率
C．液态发酵较固体发酵，更易规模化与连续化生产
D．液态发酵需通氧并搅拌，利于菌株大量快速增殖
【答案】D
【解析】A、筛选菌株的目的就是获得比野生菌活性更优、对中药成分环境适配性更强的菌株，以满足发
酵需求，A 正确；
B、发酵过程中微生物产生的相关酶可将中药中的大分子物质降解为小分子，小分子物质更易被机体吸收，
因此可提升药物吸收效率，B 正确；
C、液态发酵的发酵基质混合均匀，发酵条件更易精准调控，相比固体发酵更易实现规模化和连续化生产，
C 正确；
D、乳酸菌属于厌氧型微生物，无氧条件下才能正常生长繁殖和进行乳酸发酵，液态发酵过程不能通氧，
通氧会抑制乳酸菌的代谢和增殖，D 错误。
11．（2026·天津宁河·一模）我国科学家利用如下图所示的液态厌氧发酵工艺，实现了高效产出乙醇
和乙醇梭菌蛋白。下列叙述正确的是（ ）
A．乙醇梭菌菌种扩大培养是该发酵工程的中心环节
B．乙醇和乙醇梭菌单细胞蛋白都属于乙醇梭菌的次生代谢产物
C．通过该工艺高效生产清洁能源乙醇，可以降低生态足迹
D．发酵完成后，可通过提取、分离、纯化等方法获得单细胞蛋白
【答案】C
【解析】A、发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵过程，而不是菌种扩大培养，A 错误；
B、乙醇是乙醇梭菌的次生代谢产物，但乙醇梭菌单细胞蛋白是菌体本身，不属于次生代谢产物， B 错误；
C、该工艺利用工业尾气生产乙醇，乙醇属于清洁能源，能减少化石能源的使用，从而降低生态足迹，C
正确；
D、单细胞蛋白是乙醇梭菌的菌体，发酵完成后，可通过过滤、沉淀等方法获得，而不是提取、分离、纯
化（这是提取代谢产物的方法），D 错误。
12．（2026·湖南长沙·一模）由单一个体繁殖获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程
就是纯培养。下列关于微生物纯培养的叙述错误的是（ ）
A．配制好的培养基应放入高压蒸汽灭菌锅中进行灭菌
B．待培养基冷却至50℃时，在酒精灯火焰附近倒平板
C．完成平板划线后，需待菌液被培养基吸收后再放入恒温培养箱中培养
D．使用后的培养基在丢弃前无需进行灭菌处理
【答案】D
【解析】A、配制好的培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，需放入高压蒸汽灭菌锅中处理，能够彻底杀
灭培养基中的微生物及芽孢、孢子，A 正确；
B、培养基温度过高倒平板易烫伤操作者，温度过低培养基会凝固无法完成倒平板操作，因此待培养基冷
却至50℃左右时，需在酒精灯火焰附近（避免杂菌污染）进行倒平板操作，B 正确；
C、完成平板划线后，待菌液被培养基充分吸收再放入恒温培养箱培养，可避免菌液流动影响单菌落的分
离效果，C 正确；
D、使用后的培养基仍残留有活性微生物，随意丢弃会造成环境污染，甚至可能感染操作者，因此丢弃前
必须进行灭菌处理，D 错误。
13．（2026·山西晋城·一模）2026 年央视春晚中，“春酒”作为团圆、喜庆的文化符号亮相。春酒常
以糯米为原料，经酵母菌发酵酿制而成，其制作流程为：制曲→浸米→蒸米→拌曲→入缸发酵→提取→
装瓶。下列叙述错误的是（ ）
A．糯米蒸熟后需冷却再接种酵母菌，防止高温杀死菌种
B．酿制春酒的前期需要氧气，以促进酵母菌进行有氧呼吸大量增殖
C．发酵过程中密闭、保持适宜温度，有利于酵母菌无氧呼吸产生酒精
D．若发酵液出现酸味，可能是发酵缸密封不严，乳酸菌进入并产生乙酸
【答案】D
【解析】A、糯米蒸熟后温度较高，高温会导致酵母菌的蛋白质变性失活，因此需要冷却后再接种酵母菌，
避免杀死菌种，A 正确；
B、酵母菌是兼性厌氧型微生物，发酵前期提供氧气可促进酵母菌进行有氧呼吸，实现大量增殖、增加菌
种数量，为后期酒精发酵做准备，B 正确；
C、酵母菌无氧呼吸的产物为酒精和二氧化碳，发酵过程中密闭可创造无氧环境，适宜温度能保证酵母菌
呼吸相关酶的活性，有利于酒精生成，C 正确；
D、发酵液出现酸味，可能是发酵缸密封不严，乳酸菌进入并产生乳酸，而不是乙酸，醋酸菌进入并产生
乙酸，D 错误。
14．（2026·广东中山·一模）烟草作为重要的经济作物，其产量和品质与土壤及其微生物密切相关。
科研人员在进行农田试验时，给烟草地施加不同剂量的微生物菌肥，并测量土壤有关数据（见下表），
下列分析错误的是（ ）
组别
处理组
菌种多样性指数
无机氮（mg/Kg）
脲酶活性（U/g）
1
不施肥
6.39
280
5.90
2
烟草专用肥
6.20
356
6.51
3
低剂量微生物菌肥
6.56
310
6.51
4
中剂量微生物菌肥
6.44
340
8.6
5
高剂量微生物菌肥
6.28
325
6.5
A．常用稀释涂布平板法统计土壤样品的活菌数目
B．推测低剂量微生物菌肥为烟草生长的最适剂量
C．过量添加菌肥可能会加剧菌群竞争，导致菌种多样性下降
D．微生物菌肥可增强土壤的脲酶活性，有利于无机氮的生成
【答案】B
【解析】A、统计土壤样品的活菌数目，高中阶段常用稀释涂布平板法，通过单菌落计数获得活菌数，A
正确；
B、本实验仅设置了低、中、高三个剂量梯度，现有数据中中剂量微生物菌肥的脲酶活性远高于低剂量，
更利于氮素供应；且未设置更多细分浓度梯度，无法得出低剂量就是最适剂量的结论，B 错误；
C、从表格数据可知，随着微生物菌肥剂量升高，菌种多样性指数逐渐下降，可推测过量添加菌肥会加剧
微生物对营养、空间的竞争，导致菌种多样性下降，C 正确；
D、脲酶可催化尿素分解产生无机氮，与不施肥组相比，所有施加微生物菌肥的组脲酶活性都更高，土壤
无机氮含量也更高，说明微生物菌肥可增强土壤脲酶活性，有利于无机氮生成，D 正确。
15．（2026·北京东城·一模）下图表示猕猴桃醋生产的基本工艺流程，下列叙述正确的是（
）
A．与酵母菌相比，乳酸菌和醋酸菌均没有核膜包被的细胞核
B．75℃和121℃处理都属于灭菌，能杀灭发酵液中所有微生物
C．酒精发酵阶段所添加的乳酸菌能够无氧呼吸产生酒精
D．醋酸发酵阶段需要密封，以免有氧时醋酸被分解为二氧化碳
【答案】A
【解析】A、酵母菌是真核生物，有核膜包被的细胞核；乳酸菌和醋酸菌都是原核生物，都没有核膜包被
的细胞核，A 正确；
B、75℃处理30 分钟属于消毒，只能杀死部分微生物，无法杀灭芽孢等休眠体，不能杀死所有微生物，
只有121℃的处理属于灭菌，B 错误；
C、乳酸菌无氧呼吸的产物是乳酸，不能产生酒精，酒精发酵的酒精来自酵母菌的无氧呼吸，C 错误；
D、醋酸菌是好氧细菌，醋酸发酵过程需要持续通入氧气，醋酸不会在有氧条件下被分解为二氧化碳，D
错误。
16．（2026·辽宁·一模）为解决农业玉米秸秆资源化利用问题，科研人员从农田土壤中筛选高效纤维
素降解菌（属于细菌），下列叙述正确的是（ ）
A．培养基以纤维素为唯一碳源，属于鉴别培养基，可直接筛选区分降解菌与杂菌
B．为加速菌株筛选，可将培养基pH 调至酸性，促进纤维素分解菌的快速繁殖
C．培养基灭菌倒平板后加入刚果红染液，纤维素降解菌落周围会出现透明圈
D．接种操作在超净工作台上进行，应完全打开培养皿盖，快速完成接种
【答案】C
【解析】A、以纤维素为唯一碳源的培养基是选择培养基，A 错误；
B、纤维素分解菌为细菌，培养基pH 应调至中性或弱碱性（酸性适合真菌生长），B 错误；
C、培养基灭菌倒平板后加入刚果红染液，会在纤维素降解菌菌落周围出现透明圈，C 正确；
D、接种时需打开培养皿盖一条缝隙，全程不能完全打开，防止空气中杂菌污染，D 错误。
17．（2026·北京西城·一模）某同学探究公园土壤中分解尿素的细菌的数量，部分结果如图。相关叙
述正确的是（ ）
A．培养基以尿素为唯一碳源
B．采用平板划线法进行接种
C．用无菌水对土壤浸出液进行梯度稀释
D．菌落太少，不适合分解尿素细菌的计数
【答案】C
【解析】A、筛选分解尿素的细菌，原理是只有能利用尿素的细菌可以生长，因此培养基是以尿素为唯一
氮源，不是唯一碳源，A 错误；
B、对细菌数量进行计数需要采用稀释涂布平板法，平板划线法不能用于菌落计数，且图中菌落均匀分布，
也不符合平板划线法的菌落分布特征，B 错误；
C、稀释涂布平板法操作中，需要用无菌水对土壤浸出液进行梯度稀释，既可以避免杂菌污染，也能获得
合适浓度的菌液，C 正确；
D、微生物计数要求平板上的菌落数在30~300 之间，图中菌落数符合该范围，可用于计数，D 错误。
18．（2026·河南周口·一模）生长圈法是基于营养缺陷型指示菌与目的菌株共生关系建立的微生物筛
选技术。目前，工业上用大肠杆菌赖氨酸缺陷型指示菌，从土壤中筛选谷氨酸棒状杆菌高产赖氨酸菌株，
通过生长圈大小快速初筛，再结合发酵复筛确定生产株。如图表示上述初筛目的菌株时，某一平板上的
菌落及生长圈的形成情况。下列叙述错误的是（ ）
A．图中微生物乙、丙、丁都是赖氨酸缺陷型大肠杆菌
B．初筛阶段，配制的固体培养基中应不含有赖氨酸
C．图中微生物已最可能是初筛时被选中的目的菌株
D．进行发酵复筛目的菌株时，无需用到该指示菌
【答案】C
【解析】A、大肠杆菌赖氨酸缺陷型指示菌自身不能合成赖氨酸，需要在含有赖氨酸的培养基中才能生长，
图中微生物乙、丙、丁周围形成了生长圈，说明它们依赖目的菌株产生的赖氨酸才能生长，所以都是赖
氨酸缺陷型大肠杆菌，A 正确；
B、因为要筛选能产生赖氨酸的谷氨酸棒状杆菌，初筛阶段，配制的固体培养基中应不含有赖氨酸，这样
只有能产生赖氨酸的菌株周围的赖氨酸缺陷型大肠杆菌才能生长形成生长圈，B 正确；
C、微生物甲周围的生长圈最大，说明它产生的赖氨酸最多，所以最可能是初筛时被选中的目的菌株，C
错误；
D、进行发酵复筛目的菌株时，只需测量发酵液中赖氨酸的实际含量即可确定高产菌株，无需用到该指示
菌，D 正确。
19．（2026·河北保定·一模）下列关于生物实验的相关叙述正确的是（ ）
A．斐林试剂和双缩脲试剂的成分中都有NaOH 溶液，但浓度不同
B．鉴定病毒的核酸是DNA 还是RNA，可分别用35S 和32P 标记病毒并检测放射性情况
C．可用稀释涂布平板法将陈米酒接种到固体培养基中分离纯化菌种并进行计数
D．用血细胞计数板对酵母菌进行计数时，应统计压在每个小方格四条界线以及角上的细胞
【答案】C
【解析】A、斐林试剂的甲液和双缩脲试剂的A 液均为0.1g/mL 的NaOH 溶液，二者NaOH 浓度相同，仅
CuSO4溶液浓度不同，A 错误；
B、35S 标记的是病毒的蛋白质组分，32P 可标记所有核酸（DNA 和RNA 都含P 元素），该方法只能区分蛋白
质和核酸，无法鉴定核酸是DNA 还是RNA，B 错误；
C、稀释涂布平板法通过梯度稀释后接种到固体培养基，可得到单菌落，既能够分离纯化菌种，也可通过
统计菌落数对活菌进行计数，C 正确；
D、用血细胞计数板计数酵母菌时，仅统计小方格相邻两条边及其夹角上的细胞和小方格内的细胞，若统
计四条界线上的细胞会导致结果偏大，D 错误。
20．（2026·黑龙江哈尔滨·一模）木霉菌可降解环境中的纤维素。将诱变处理后的木霉菌接种到培养
基中，筛选纤维素酶高产菌株。下列说法正确的是（ ）
A．不宜通过接种蒸馏水检测所配制的固体培养基是否被污染
B．培养基中应添加纤维素和刚果红，经倒平板后再湿热灭菌
C．红色圈的直径与菌落的直径比值越大，降解纤维素的能力越强
D．筛选纤维素酶高产菌株的选择培养基应以纤维素为唯一氮源
【答案】A
【解析】A、检测固体培养基是否被污染的正确方法是将未接种的培养基放在适宜条件下培养，观察是否
有菌落生成；若接种蒸馏水，若蒸馏水本身携带杂菌，会干扰对培养基污染情况的判断，A 正确；
B、培养基的制备流程为配制培养基、调pH、湿热灭菌、倒平板，需先灭菌再倒平板，B 错误；
C、刚果红可以和纤维素结合形成红色复合物，纤维素被降解的区域会形成透明圈，透明圈直径与菌落直
径的比值越大，说明菌株降解纤维素的能力越强，C 错误；
D、纤维素属于糖类，只含C、H、O 元素，属于碳源，筛选纤维素酶高产菌株的选择培养基应以纤维素为
唯一碳源，D 错误。
21．（2026·河北保定·一模）吸水链霉菌井冈变种是一种可与水稻根系共生的放线菌，其产生的井冈
霉素是一种广谱抗生素，可以防治由立枯丝核菌引起的水稻纹枯病。如图为井冈霉素高产菌的选育过程，
下列叙述正确的是（ ）
A．在患纹枯病的稻田中，应采集患病水稻根系附近的土壤样品
B．步骤②使用全营养培养基富集菌液，以提高目标菌种的比例
C．步骤③用稀释涂布平板法分离单菌落，根据菌落特征初筛
D．步骤⑤先在培养基上均匀涂布立枯丝核菌，再接种吸水链霉菌井冈变种
【答案】CD
【解析】A、要分离能产生井冈霉素，抑制立枯丝核菌的吸水链霉菌井冈变种，应在患纹枯病稻田中的健
康水稻根系附近采集土壤，患病水稻患病说明其根际缺乏足够能抑制病的目标菌，A 错误；
B、富集培养的目的是提高目标菌种的比例，需要使用选择培养基，全营养培养基会使各种杂菌也旺盛生
长，无法提高目标菌种的比例，B 错误；
C、稀释涂布平板法可以将菌液稀释后分散得到单菌落，不同菌种的菌落形态、大小、颜色等特征不同，
因此可以根据菌落特征完成初筛，C 正确；
D、步骤⑤的目的是筛选高产井冈霉素的菌株，井冈霉素可抑制立枯丝核菌生长，抑菌圈越大说明菌株产
井冈霉素能力越强；操作时需要先在培养基上均匀涂布立枯丝核菌，再接种吸水链霉菌井冈变种，后续
通过抑菌圈大小筛选高产菌株，D 正确。
22．（2026·辽宁锦州·一模）为提高葡萄酒品质，某校师生利用如图所示技术流程，筛选出发酵速度
快、具有较强酒精耐受力的优良酿酒酵母（无法利用赖氨酸），其能在WL 培养基上形成奶油状略带绿色、
球形的菌落。下列相关说法错误的是（ ）
注：YPD 培养基和WL 培养基是酵母菌培养常用培养基，其中WL 培养基含有指示剂溴甲酚绿
A．III 属于鉴别培养基，依据其上生长的菌落特征，可挑选出优良酵母菌种
B．进行酒精耐受力检测时，需重新制备添加不同浓度酒精的YPD 培养基
C．从III 中挑取菌种接种到IV 上培养，若能生长，则可判定为优良酿酒酵母
D．I、II 均为液体培养基，图中重复操作可提升酿酒酵母的酒精发酵能力
【答案】CD
【解析】A、WL 培养基Ⅲ含有指示剂溴甲酚绿，且优良酿酒酵母能在其上形成奶油状略带绿色、球形的菌
落，属于鉴别培养基，A 正确；
B、进行酒精耐受力检测时，需要重新制备添加不同浓度酒精的YPD 培养基，以此来筛选出酒精耐受力强
的酵母菌，B 正确；
C、优良酿酒酵母无法利用赖氨酸，而培养基Ⅳ是以赖氨酸作为唯一氮源的培养基，因此优良酿酒酵母无
法在Ⅳ上生长，C 错误；
D、YPD 培养基Ⅰ一般为固体培养基，YPD 培养基Ⅱ为液体培养基；重复操作是为了筛选出更符合要求的
酵母菌，不能直接提升其酒精发酵能力，D 错误。
23．（2026·内蒙古包头·一模）某型白酒是以小麦、高粱等粮食为原料，以曲为发酵剂酿造而成的。
曲中含有的微生物主要有需氧型的霉菌、兼性厌氧型的酵母菌，以及乳酸菌、醋酸菌等。主要原理是酵
母菌在无氧条件下利用葡萄糖发酵产生酒精，其主要工艺流程如下图所示。下列叙述正确的是（
）
A．若发酵罐密封不严就会进行乳酸发酵使酒变酸
B．糖化主要是由曲中的霉菌将淀粉水解为葡萄糖
C．重铬酸钾溶液在酸性条件下可用于检测发酵液蒸馏产物中有无酒精
D．原料摊晾后加入酒糟立即密封，可高效进行酒精发酵
【答案】BC
【解析】A、发酵罐密封不严时，会进入氧气，此时醋酸菌（好氧菌）会将酒精转化为醋酸，使酒变酸，
A 错误；
B、原料中的主要成分是淀粉，曲中的霉菌（需氧型）可以分泌淀粉酶，将淀粉水解为葡萄糖，B 正确；
C、在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应会由橙色变为灰绿色，可用于检测发酵液蒸馏产物中是否存在酒
精，C 正确；
D、酵母菌是兼性厌氧菌，在发酵初期需要先通气，让酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，之后再密封进行无
氧呼吸产生酒精，D 错误。
24．（2026·天津红桥·一模）市场上饮用醋种类繁多，口感不一。某学习小组学习了发酵工程知识后，
利用葡萄和糯米酿造果粮复合饮用醋，并设计了如下加工工艺流程：
(1)对糯米进行蒸煮糊化的目的是_____（写出1 点）。
(2)A、B 接种的菌种一般要先活化和_____后，再接种于发酵液中。从细胞结构上看，两菌种的主要区别
为_____。
(3)酒精发酵的质量决定了醋的品质。为了解酒精发酵进程，可在发酵过程中定期取样，用_____的方法
进行菌落计数，评估菌株增殖状况。选择高产醋杆菌时，可将醋杆菌涂布培养在白色的
培养基上，
并挑选_____大的菌落作为发酵菌种，发酵菌种经扩大培养后再接种至酒醪中进行发酵。
(4)由酒精发酵转变为醋酸发酵，需要改变的环境条件是_____。
【答案】(1)使淀粉更容易被酶解（或杀灭杂菌、使糯米软化）
(2) 扩大培养； 酵母菌有以核膜为界限的细胞核，醋酸菌没有（或有无核膜包被的细胞核）
(3) 稀释涂布平板法 透明圈直径与菌落直径比值（或透明圈）
(4)通入无菌空气（或有氧环境）、提高发酵温度
【解析】（1）对糯米进行蒸煮糊化的目的：破坏淀粉颗粒结构，使淀粉更容易被微生物酶解（糖化）；
杀灭糯米中的杂菌，防止发酵过程被污染；使糯米质地变软，便于后续的混合调配与发酵。
（2）①菌种接种到发酵液前，通常需要先活化和扩大培养，以增加菌种数量，保证发酵快速启动； ②A
为酒精发酵菌种（酵母菌，真核生物），B 为醋酸发酵菌种（醋杆菌 / 醋酸菌，原核生物）。二者在细
胞结构上的主要区别是：酵母菌有以核膜为界限的细胞核，醋酸菌没有。
（3）①对发酵液中的菌进行计数，常用的方法是稀释涂布平板法（该方法能通过菌落数计算活菌数量，
适合评估菌株增殖状况）；②醋杆菌能产生醋酸分解培养基中的CaCO ，使菌落周围出现透明圈。挑选透
₃
明圈直径与菌落直径比值大的菌落，说明该菌株产酸能力强，为高产醋杆菌。
（4）酒精发酵由酵母菌完成，条件为无氧、18-25℃；醋酸发酵由醋酸菌完成，醋酸菌是好氧菌，最适
温度为30-35℃。因此由酒精发酵转变为醋酸发酵，需要改变的环境条件是：通入无菌空气（或保证有氧
环境）、提高发酵温度。
25．（2026·北京东城·一模）阿卡波糖是治疗Ⅱ型糖尿病的药物，部分患者长期使用后出现耐药现象，
推测与肠道微生物有关。
(1)阿卡波糖是绝大多数生物不能利用的低聚糖，但能抑制淀粉酶等的活性，通过______来降低糖尿病患
者的血糖浓度。
(2)为寻找影响阿卡波糖疗效的肠道微生物，研究者收集耐药患者的粪便样本，进行图1 实验。经过图中
①～⑤的步骤实现目的菌______，⑥采用______法接种以分离单个菌落，筛选后鉴定出能降解阿卡波糖
的菌种TD1。
(3)为研究TD1 对阿卡波糖治疗Ⅱ型糖尿病疗效的影响，研究者将Ⅱ型糖尿病模型小鼠分为4 组，用如图
2 所示的溶液进行灌胃15 天，每天1 次。第15 天同时还用______溶液对4 组小鼠灌胃，检测结果表明
TD1 能够降低阿卡波糖的疗效，依据是________________________。
(4)进一步从TD1 中筛选到编码阿卡波糖降解酶的apg 基因。基于以上信息，请提出一种解决使用阿卡波
糖后出现耐药问题的思路________________________。
【答案】(1)抑制淀粉的消化
(2) 浓度增加 稀释涂布平板
(3) 淀粉 血糖增量相对水平组2 显著低于组1，组4 显著高于组2
(4)抑制apg 基因的表达；抑制阿卡波糖降解酶的活性
【解析】（1）阿卡波糖抑制淀粉酶等糖类消化酶的活性，可抑制淀粉的消化，减少葡萄糖的生成和肠道
吸收，从而降低糖尿病患者的血糖。
（2）图1 逐步提高阿卡波糖浓度，可筛选出能降解阿卡波糖的目的菌，同时让目的菌数量增加，该过程
实现目的菌的浓度增加；由图示可知分离获得单个菌落，采用的接种方法为稀释涂布平板法。
植物细胞工程
考点2
（3）阿卡波糖作用是降低餐后血糖，因此第15 天需要给各组灌胃等量的淀粉，再检测血糖增量；根据
图2 结果，血糖增量相对水平组2 显著低于组1，组4 显著高于组2，证明阿卡波糖降血糖效果下降，即
TD1 会降低阿卡波糖的疗效。
（4）耐药的原因是TD1 产生降解阿卡波糖的酶，因此可从抑制apg 基因的表达；抑制阿卡波糖降解酶的
活性等角度提出思路。
1．（2026·北京昌平·一模）科研人员以长叶轮钟草茎段为外植体，设置MS、1/2MS（把MS 培养基的大
量元素浓度减半，其余成分不变）两种基础培养基，搭配不同浓度6-BA、2，4-D 进行愈伤组织诱导实验，
结果如下表。相关叙述错误的是（ ）
培养基
6-
BA/（mg/L）
2，4-D（mg/L）
愈伤组织诱导率
（%）
生长状况
MS
0.5
0.5
79.17
生长一般、质地紧密、白色
MS
1
1
58.33
生长一般、质地紧密、浅白
MS
1.5
1.5
79.17
生长良好、质地紧密、深白
1/2MS
0.5
1
100.00
生长良好、质地紧密、白色
1/2MS
1
1.5
100.00
生长好、质地紧密、深白
1/2MS
1.5
0.5
100.00
生长好、质地紧密、白色
注：6-BA 属于细胞分裂素类植物生长调节剂，2，4-D 属于生长素类植物生长调节剂
A．植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性
B．每瓶接种的外植体数量相同，观察愈伤组织的时间点一致
C．本实验无法比较激素和培养基哪个因素对愈伤组织诱导的影响更显著
D．要进一步验证最佳配方，需在三个1/2MS 处理中选择一组进行重复实验
【答案】D
【解析】A、植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给与适
宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术，其原理利用了植物细胞的全能性，A 正确；
B、实验设计需遵循单一变量原则，接种的外植体数量、观察愈伤组织的时间属于无关变量，应保持相同
且适宜，B 正确；
C、本实验同时存在培养基种类、6-BA 浓度、2，4-D 浓度三个自变量，没有设置专门的对照单独对比激
素和培养基的影响程度，因此无法比较两个因素对愈伤组织诱导的影响显著性，C 正确；
D、要进一步验证最佳配方，应先选择1/2MS 处理中生长状况最优的组别，围绕该组的激素浓度设置更小
的浓度梯度进行探究，仅任选一组重复实验只能减小实验误差，无法确定最佳配方，D 错误。
2．（2026·河北沧州·一模）五裂黄连是毛茛科黄连属，是我国二级保护植物，其产生的黄连素抗菌消
炎作用明显，某兴趣小组欲利用植物细胞培养技术培养其茎尖细胞以提取黄连素。下列说法正确的是（
）
A．黄连素是五裂黄连生长所必需的初生代谢物
B．需要添加关键激素，以启动脱分化和再分化过程
C．该兴趣小组利用的原理是植物细胞具有增殖的能力
D．配置好的培养基、金属用具必须使用高压蒸汽灭菌
【答案】C
【解析】A、初生代谢物是植物生长发育必需的物质，黄连素属于生物碱类次生代谢物，A 错误；
B、本实验仅需获得大量愈伤组织即可提取黄连素，只需要启动脱分化过程，不需要诱导再分化，B 错误；
C、该技术通过诱导茎尖细胞脱分化形成愈伤组织，再让愈伤组织大量增殖以积累足够的黄连素，利用的
原理是植物细胞具有增殖能力，C 正确；
D、培养基必须用高压蒸汽灭菌，但金属用具可使用灼烧法等灭菌方法，D 错误。
3．（2026·河北张家口·一模）紫杉醇是存在于红豆杉体内的一种次生代谢物，具有高抗癌活性，被广
泛用于乳腺癌等癌症的治疗。我国科学家经过多年研究，筛选出了高产紫杉醇的细胞。下列叙述正确的
是（ ）
A．次生代谢物是植物生长所必需的一类小分子有机物
B．可从濒危植物红豆杉中直接提取紫杉醇，该方法会破坏植物资源但产量高
C．利用植物外植体获得高产紫杉醇细胞体现了植物细胞的全能性
D．细胞产物的工厂化生产不占用耕地，几乎不受季节和天气等的影响
【答案】D
【解析】A、次生代谢物不是植物生长发育所必需的物质，初生代谢物才是植物生长必需的小分子有机物，
A 错误；
B、从濒危红豆杉中直接提取紫杉醇会破坏植物资源，且天然红豆杉中紫杉醇含量极低，产量很低，B 错
误；
C、细胞全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体或分化为各种细胞的潜能，利用外植体获得高产紫
杉醇细胞并未体现上述过程，不能体现植物细胞的全能性，C 错误；
D、细胞产物的工厂化生产是在室内可控的生物反应器中培养植物细胞，不占用耕地，几乎不受季节、天
气等外界环境因素的影响，D 正确。
4．（2026·陕西商洛·一模）某研究团队以濒危植物华盖木的茎段为外植体，通过植物组织培养技术进
行快速繁殖（如图所示）。脱分化阶段需对培养基中的植物激素进行精细调控。下列叙述正确的是（
）
A．过程①中细胞通过减数分裂增加数量，遗传物质会发生重组
B．过程①中细胞失去其特有结构功能，形成具有分生能力的薄壁组织团块
C．与过程①相关的植物激素使其脱分化形成胚状体，进而长出芽和根
D．过程②③发生了细胞分化，无需每日给予适当时间和强度的光照
【答案】B
【解析】A、过程①脱分化阶段细胞通过有丝分裂增殖，遗传物质保持稳定，不会发生重组（重组发生在
减数分裂过程中），A 错误；
B、过程①在一定激素和营养等条件的诱导下，已经分化的细胞可以经过脱分化失去其特有的结构和功能，
转变成未分化的细胞，进而形成不定形的薄壁组织团块，即为愈伤组织，B 正确；
C、过程②③将愈伤组织接种到含有特定激素的培养基上，就可以诱导其再分化成胚状体，长出芽和根，
进而发育成完整的植株，C 错误；
D、过程①诱导愈伤组织期间一般不需要光照，但在后续的培养过程②③中，每日需要给予适当时间和强
度的光照，D 错误。
5．（2026·辽宁辽阳·一模）人参皂苷具有抗肿瘤等作用。如图表示利用西洋参种子胚进行工厂化生产
人参皂苷的过程示意图，下列相关叙述正确的是（ ）
A．①为脱分化过程，在适宜光照下培养得到不定形薄壁组织团块
B．②过程需要用纤维素酶和果胶酶处理得到单个的完整植物细胞
C．过程①与②所用培养基的物理状态相同，植物激素比例不同
D．④过程培养液中的蔗糖浓度过高会导致细胞过度失水而死亡
【答案】D
【解析】A、①为脱分化过程，该过程需在无光条件下进行，培养得到的愈伤组织是不定形的薄壁组织团
块，A 错误；
B、纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织，破坏了植物的细胞壁，因此得到的悬浮细胞并不是完整的植物细胞，
B 错误；
C、①脱分化所用培养基为固体培养基（含琼脂），②③过程为液体悬浮培养，所用培养基为液体培养基，
物理状态不同；同时二者植物激素比例也不同（脱分化和再分化的激素配比有区别），C 错误；
D、植物细胞培养中的碳源为蔗糖，蔗糖浓度过高会导致细胞过度失水而死亡，不利于培养，D 正确。
6．（2026·江西吉安·一模）甘蔗是重要的经济作物，经过多年栽培后会受到多种病原体的反复侵染，
造成品质退化。研究人员尝试通过植物组织培养技术获得甘蔗脱毒苗，操作流程如下图。下列叙述正确
的是（ ）
A．取甘蔗茎尖进行酒精和次氯酸钠消毒，可增强其对病毒的抵抗力
B．过程①一般为固体培养基，产生的愈伤组织通过减数分裂增殖
C．过程②为再分化，提高生长素与细胞分裂素的比值有利于该过程
D．过程①②培养基中常添加蔗糖，既作为碳源又能调节渗透压
【答案】D
【解析】A、甘蔗茎尖经酒精和次氯酸钠消毒是为了除去茎尖表面的微生物，而不是增强植物组织对病毒
的抵抗力，A 错误；
B、过程①为脱分化，一般为固体培养基，产生的愈伤组织具有增殖能力，但不能进行减数分裂，B 错误；
C、过程②为再分化为丛芽的过程，应该降低生长素与细胞分裂素的比值，提高生长素与细胞分裂素的比
值有利于根的分化，C 错误；
D、过程①②培养基中常添加蔗糖，既作为碳源又能调节渗透压，D 正确。
故选D。
7．（2026·内蒙古呼和浩特·一模）显齿蛇葡萄有“黄酮之王”之称，其产生的黄酮类化合物可入药。
下图为通过植物细胞工程获得黄酮类化合物的过程示意图，有关说法正确的是（ ）
A．过程①要用酒精和次氯酸钠溶液对幼叶进行灭菌
B．过程②③可以选择相同的培养基进行诱导培养
C．经PEG 诱导后产生的植株丁可能发生染色体数目变异
D．过程⑤的目的是提高单个细胞中黄酮类化合物的含量
【答案】C
【解析】A、过程①是对幼叶（外植体）进行消毒，而非灭菌。灭菌会杀死外植体细胞，导致培养失败，
A 错误；
B、②脱分化、③再分化过程需要的生长素、细胞分裂素比例不同，培养基成分不同，B 错误；
C、PEG 诱导原生质体融合后，若两个原生质体融合得到植株丁，其染色体数目为原生质体的2 倍，因此
该过程可能发生染色体数目变异，C 正确；
D、过程⑤的目的是通过愈伤组织细胞增殖，增加细胞总数量，从而获得更多黄酮类化合物，不是提高单
个细胞的黄酮含量，D 错误。
8．（2026·山东青岛·一模）花药是雄蕊顶端膨大的囊状结构，包含外部的花药壁和众多花粉粒。下图
是基因型为Aa 的某二倍体植物花药育种过程的示意图。下列说法错误的是（ ）
A．为了防止微生物污染，花药要消毒处理后才可接种培养
B．秋水仙素通过抑制纺锤体的形成诱导细胞染色体数目加倍
C．过程①～④中所使用的培养基的成分、浓度不完全相同
D．过程④获得的植株均为纯合子，其基因型有AA、aa 两种
【答案】D
【解析】A、花药在进行植物组织培养前，需要进行消毒处理，目的是防止微生物污染，保证培养过程的
无菌环境，A 正确；
B、秋水仙素的作用原理是抑制纺锤体的形成，使细胞不能正常分裂，从而导致染色体数目加倍，B 正确；
C、图中①表示取花药进行离体培养，②表示脱分化过程，③表示再分化过程，④表示试管苗形成单倍体
的过程，不同阶段的培养基成分（如激素种类、浓度）、营养物质浓度等不完全相同，C 正确；
D、基因型为Aa 的二倍体植物，花药中的花粉基因型为A、a，经过秋水仙素处理后，染色体加倍，基因
型为AA、aa，但过程④获得的植株中，除了纯合子外，也可能存在染色体不加倍的情况，仍为单倍体，
其基因型为A、a，D 错误。
9．（2026·福建泉州·一模）库尔勒香梨具有果香浓郁、皮薄肉细、汁多渣少等特点，但也存在果型不
整、不抗腐烂病等问题。为获得更多健康的不定芽用于品种改良，科研人员利用碳源和细胞分裂素进行
了库尔勒香梨叶片再生不定芽的组培实验，实验结果如下表。
碳源
（30g/L）
BA（mg/L）
TDZ（mg/L）
NAA（mg/L）
不定芽再
生率（%）
不定芽玻
璃化率
（%）
D-山梨醇
3
—
0.3
90.1
56.2
5
—
0.3
96.3
60.8
—
1
0.3
48.l
10.2
—
2
0.3
46.1
15.6
蔗糖
3
—
0.3
77.8
4.2
5
—
0.3
73.3
5.6
—
1
0.3
49.7
7.6
—
2
0.3
21.9
9.2
注：BA 和TDZ 是两种细胞分裂素，NAA 是生长素类似物；不定芽的玻璃化是一种生理失调现象，会导致试
管苗质量下降，甚至无法移栽成活。
下列相关叙述错误的是（ ）
A．诱导不定芽再生需进行避光处理
B．适当增加NAA 浓度可能诱导愈伤组织分化出根
C．实验所用BA 诱导不定芽再生的效果显著高于TDZ
D．蔗糖作为碳源更有利于获得健康的不定芽
【答案】A
【解析】A 、诱导不定芽再生属于再分化过程，再分化阶段需要光照以利于叶绿素合成等生命活动，无
需避光处理，A 错误；
B、生长素与细胞分裂素的比值较高时，有利于愈伤组织分化出根，NAA 是生长素类似物，适当增加NAA
浓度可提升该比值，可能诱导愈伤组织分化出根，B 正确；
C、对比表格数据，相同碳源、相同NAA 浓度条件下，添加BA 的组别不定芽再生率远高于添加TDZ 的组别，
说明BA 诱导不定芽再生的效果显著高于TDZ，C 正确；
D、健康不定芽要求玻璃化率低，对比表格可知，相同激素条件下，蔗糖作为碳源时不定芽玻璃化率远低
于D-山梨醇组，更有利于获得健康的不定芽，D 正确。
故选A。
10．（2026·内蒙古包头·一模）体细胞杂交和有性杂交两种方法均可将黑麦（2n=14）的优异性状导入
到普通小麦（2n=42）中。有性杂交能产生极低频率的幼胚，可将这些幼胚进行离体培养，产生愈伤组织，
并进一步诱导形成杂种植株。下列叙述正确的是（ ）
A．幼胚离体培养前需用纤维素酶和果胶酶进行预处理
B．体细胞杂交所获得的杂种植株需进行染色体加倍才可育
C．体细胞杂交和幼胚离体培养过程中均经历了细胞的脱分化和再分化
D．体细胞杂交和有性杂交所获得的杂种植株减数分裂时染色体均可正常联会
【答案】C
【解析】A、纤维素酶和果胶酶的作用是去除植物细胞壁，仅用于体细胞杂交中获取原生质体，幼胚离体
培养无需去除细胞壁，不需要该预处理，A 错误；
B、体细胞杂交是将两个物种的体细胞融合，获得的杂种植株含有同源染色体，减数分裂可正常联会，无
需染色体加倍即可育，B 错误；
C、体细胞杂交过程中融合后的杂种细胞需经植物组织培养发育为完整植株，会经历脱分化形成愈伤组织、
再分化形成植株的过程；幼胚离体培养会先产生愈伤组织，再诱导形成杂种植株，也存在脱分化和再分
化过程，C 正确；
D、有性杂交获得的杂种植株是由普通小麦配子和黑麦配子结合发育而来，细胞内无同源染色体，减数分
裂时染色体联会紊乱，无法正常联会，D 错误。
11．（2026·宁夏银川·一模）枸杞多糖具有改善抑郁症状、保护视网膜、抗脂肪肝等功能。某研究团
队优化MS 培养基配方，确定了NAA（
-萘乙酸）与6-BA（属于细胞分裂素类似物）的质量比为2:1 是诱
导高抗氧化活性愈伤组织的关键。在这种特定激素配比的“指挥”下，离体的枸杞细胞脱分化形成愈伤
组织后大量合成枸杞多糖。下列叙述正确的是（ ）
A．愈伤组织再分化有利于合成枸杞多糖
B．NAA 与6-BA 质量比偏高时有利于根的分化
C．MS 培养基主要是以葡萄糖作为碳源来维持细胞的生长
D．利用上述技术生产枸杞多糖说明植物细胞具有全能性
【答案】B
【解析】A、分析题意可知，枸杞多糖是离体枸杞细胞脱分化形成的愈伤组织大量合成的，愈伤组织再分
化会形成不同组织器官，不利于枸杞多糖的大量合成，A 错误；
B、NAA 是生长素类似物，6-BA 是细胞分裂素类似物。植物组织培养中，生长素与细胞分裂素的比值偏高
时利于根的分化，比值偏低时利于芽的分化，因此NAA 与6-BA 质量比偏高（生长素类似物比例更高）时，
有利于根的分化，B 正确；
C、MS 培养基主要以蔗糖作为碳源，同时蔗糖还可维持培养基渗透压，不是葡萄糖，C 错误；
D、植物细胞全能性是指已分化的植物细胞仍具有发育成完整个体或分化为其他各种细胞的潜能，该过程
只培养到愈伤组织阶段，不能体现植物细胞的全能性，D 错误。
12．（2026·广东中山·一模）《金漳兰谱》中写道“其茅葺，其叶青青，犹绿衣郎，挺节独立，可敬
可慕”。下列分析错误的是（ ）
A．“茅葺”描述了兰花的形态，反映其一定的生态位特征
B．“其叶青青，犹绿衣郎”，其中的色素主要存在于叶绿体
C．兰花种子萌发率低，可用叶片进行组织培养繁殖幼苗
D．《金漳兰谱》中的词句体现了生物多样性的间接价值
【答案】D
【解析】A、茅葺是指兰花初生的嫩芽茂密而柔美，这是对兰花形态的描述，一定程度上反映了植物的生
态位，A 正确；
B、其叶青青原因是植物含有叶绿素，主要位于叶绿体中，B 正确；
C、兰花种子萌发率低，可以用叶片进行植物组织培养，这是无性繁殖，C 正确；
D、《金漳兰谱》中的词句描述兰花可供观赏，且能进行文学创作，这是生物多样性直接价值的体现，D
错误。
13．（2026·北京石景山·一模）辣椒素作为一种常见的酚类生物碱，广泛用于食品保健、医药工业等
领域，目前获得辣椒素的两条途径如下图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A．外植体灭菌后，经过程①脱分化形成不定形的薄壁组织团块
B．脱毒苗和高产细胞系的获得均体现了植物细胞的全能性
C．过程②通常选择植物茎尖培养脱毒苗，是因为其分裂能力强
D．过程③采用的植物细胞培养技术几乎不受气候条件的限制
【答案】D
【解析】A、外植体需要消毒，不需要灭菌，A 错误；
B、只有脱毒苗的获得体现了细胞的全能性，后者的原理是细胞增殖，B 错误；
C、过程②通常选择植物茎尖培养脱毒苗，是因为其几乎不带毒，C 错误；
D、过程③采用的植物细胞培养技术几乎不受气候条件的限制，因而能够高产、稳产，其原理是细胞增殖，
D 正确。
14．（2026·云南·一模）近年来，我国酒精性肝病的发病率逐年上升，危害仅次于病毒性肝炎。研究
发现，雪莲次生代谢物对急性酒精肝损伤具有较好的防治作用。人们运用细胞工程技术生产雪莲次生代
谢物，下列叙述正确的是（ ）
A．次生代谢物是雪莲生长所必需的物质，一般分布在特定组织或器官中
B．用射线处理雪莲幼苗诱发变异，即可获得次生代谢物高产的雪莲植株
C．切取雪莲茎尖在无菌条件下进行愈伤组织培养，可获取其次生代谢物
D．可用固体培养基离体培养雪莲细胞，提高单个细胞中次生代谢物的含量
【答案】C
【解析】A、初生代谢物是植物生长发育所必需的物质，次生代谢物并非雪莲生长必需的物质，一般分布
在特定组织或器官中，A 错误；
B、射线处理诱发变异属于诱变育种，基因突变具有不定向性，处理后需要经过筛选才可能获得次生代谢
物高产的雪莲植株，并非处理后即可直接得到，B 错误；
C、雪莲的次生代谢物可由愈伤组织细胞产生，切取雪莲茎尖在无菌条件下脱分化培养获得愈伤组织，可
从中提取次生代谢物，C 正确；
D、大规模培养雪莲细胞获取次生代谢物通常使用液体培养基，该操作的目的是获得大量细胞进而提高次
生代谢物的总产量，而非提高单个细胞中次生代谢物的含量，D 错误。
15．（2026·山东日照·一模）研究人员利用细胞工程技术生产紫杉醇的大致流程如图所示。下列说法
错误的是（ ）
A．过程①脱分化得到的愈伤组织具有较高的分裂分化能力
B．过程②振荡培养有利于细胞充分接触培养液并增加其溶氧量
C．过程③中过滤的目的是除去细胞团获得较纯净的单细胞悬浮液
D．过程⑤主要是利用促进细胞生长的营养条件提高单细胞中紫杉醇含量
【答案】D
【解析】A、过程①是脱分化，外植体经脱分化形成愈伤组织。愈伤组织是高度液泡化、无特定形态的薄
壁细胞团，分裂分化能力很强，可再分化形成胚状体或丛芽，A 正确；
B、过程②将愈伤组织制成细胞悬浮液，振荡培养的作用： 使细胞与培养液充分接触，保证营养供应；
增加培养液中的溶氧量，满足细胞呼吸需求，B 正确；
C、过程③通过无菌网筛过滤、离心，目的是除去较大的细胞团，获得分散度更高、较纯净的单细胞悬浮
液，C 正确；
D、过程⑤是工厂化生产紫杉醇，主要是通过增加产紫杉醇细胞的数量来大量生产，而不是提高单细胞中
紫杉醇含量，D 错误。
故选D。
16．（2026·河北邯郸·一模）番茄红素营养丰富，哺乳动物不能自行合成番茄红素，必须从蔬菜和水
果中获取。某兴趣小组尝试利用植物细胞培养技术培养胡萝卜细胞来获取番茄红素，实验流程如图所示。
下列说法错误的是（ ）
A．①过程为脱分化，需在无菌条件下进行
B．②过程体现了植物细胞的全能性
C．①过程培养基中生长素和细胞分裂素的比例要适当
D．③过程的产物需经提纯才能获得番茄红素
【答案】B
【解析】A、①是外植体形成愈伤组织的过程，表示脱分化过程，属于组织培养的一个阶段，而整个植物
组织培养都需要无菌操作，A 正确；
B、植物细胞全能性是指“已分化的细胞发育为完整个体或分化为各种细胞”，②过程只得到了悬浮细胞，
没有获得完整植株或各种细胞，没有体现植物细胞的全能性，B 错误；
C、脱分化过程培养基中生长素和细胞分裂素的比例会调控细胞的脱分化过程，需要比例适当，C 正确；
D、③过程番茄红素是细胞代谢产物，需要经过提取提纯才能获得，D 正确。
17．（2026·河北承德·一模）野生油菜抗病能力强，但出油率低；高产油菜出油率高，但抗病能力弱。
如图是利用野生抗病油菜与高产油菜培育高产抗病油菜的流程。下列叙述错误的是（ ）
A．过程①通常用纤维素酶和果胶酶处理，以去除油菜细胞的细胞壁
B．过程②可采用电融合法、高Ca ² ——高
⁺
pH 融合法诱导原生质体融合
C．过程③用含一定量植物激素的一种培养基将杂种细胞直接培育成杂种植株
D．过程④既要检测杂种植株的出油率，又要检测杂种植株的抗病性
【答案】C
【解析】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，进行①处理时能用纤维素酶和果胶酶，制备原生质
体，A 正确；
B、原生质体融合的方法有多种，包括物理方法（如电融合、离心、振动等）和化学方法（如高Ca2+-高
pH、PEG 融合等），B 正确；
C、过程③包括杂种细胞脱分化形成愈伤组织和愈伤组织再分化形成杂种植株，脱分化和再分化需要的培
养基不一样，C 错误；
D、通过检测杂种植株是否具有抗病性和出油率来筛选得到高产抗病的油菜，D 正确。
18．（2026·安徽·一模）开放式光自养微繁技术是无糖与开放相结合的植物组织培养方法，即在无糖
组培的容器中，在自然、开放的有菌环境下进行培养的技术。下列有关叙述错误的是（ ）
A．传统组培使用的培养基添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压
B．无糖组培使用的培养基只需添加矿质元素和广谱抑菌剂
C．用CO2作为碳源一定程度上有利于避免杂菌污染
D．光照条件和CO2有利于诱导外植体表达光合相关基因
【答案】B
【解析】A、传统植物组培中，外植体光合能力弱，培养基添加蔗糖既可以为外植体提供碳源等营养，也
可以调节培养基渗透压，A 正确；
B、无糖组培使用的培养基还需要添加植物激素（生长素和细胞分裂素）等，B 错误；
C、用CO2作为碳源培养基不含有机糖，杂菌缺乏可利用的有机碳源难以大量增殖，一定程度上有利于避
免杂菌污染，C 正确；
D、光照是光合作用的必要条件，适宜的光照和CO2环境可诱导外植体表达光合相关基因，适应自养生长，
D 正确。
19．（2026·河北保定·一模）科学家选用两株放线菌（菌株X：抗青霉素但链霉素低产；菌株Y：不抗
青霉素但链霉素高产）进行原生质体融合，以获得抗青霉素且链霉素高产的融合子，过程如图所示。下
列叙述错误的是（ ）
A．①过程需用纤维素酶去除放线菌的细胞壁
B．②过程必须借助一定的技术手段才能实现
C．③过程的培养基中应添加青霉素，以便于后续筛选
D．④过程筛选出的融合子的链霉素产量不一定高于菌株Y
【答案】AC
【解析】A、放线菌是原核生物，细胞壁主要成分是肽聚糖，纤维素酶只能分解纤维素，无法去除放线菌
细胞壁，A 错误；
B、原生质体自发融合的频率极低，必须借助聚乙二醇诱导、电融合等技术手段才能完成诱导融合，B 正
确；
C、③过程是再生细胞壁培养不是选择培养，不需要添加青霉素，筛选抗青霉素融合子是过程④，C 错误；
动物细胞工程
考点3
D、原生质体融合后，不同亲本的基因表达可能存在相互影响，性状并不确定，因此筛选得到的抗青霉素
融合子的链霉素产量不一定高于菌株Y，需要进一步筛选产量性状，D 正确。
20．（2026·河北邢台·一模）悬浮培养毛状根获取人参皂苷的流程如图，下列说法中错误的是
（ ）
A．?处可为人参的任一部位，且获取的毛状根染色体数目与人参相同
B．培养基1、3 生长素与细胞分裂素比值高于培养基2
C．培养基4 中不需要添加琼脂，需加入蔗糖提供碳源和维持渗透压
D．该过程体现了植物细胞的全能性，培养过程全程避光
【答案】ABD
【解析】A、?处通常不为花药，用体细胞培养获得的毛状根染色体数目与人参相同，A 错误；
B、培养基2 和培养基3 是诱导生根培养基，生长素与细胞分裂素比值应高于培养基1，B 错误；
C、题干为悬浮培养毛状根获取人参皂苷，故培养基4 不需要添加琼脂，蔗糖的功能为提供碳源和维持渗
透压，C 正确；
D、该过程细胞没有分化成其他各种细胞，也没有产生完整植株，没有体现植物细胞的全能性，D 错误。
1．（2026·广西河池·一模）犬肾细胞MDCK 扩增流感病毒，生产流感疫苗，具有标准化、产量高等优
点。但其贴壁生长和成瘤性制约了疫苗生产效率。研究人员期望筛选出一种符合规模化生产的犬肾细胞，
将野生型MDCK 传代培养60 代后，通过悬浮驯化获得能悬浮生长的XF04 和XF06 两种细胞，并进行了无胸
腺裸鼠荷瘤实验，过程及结果如图。下列叙述错误的是（ ）
A．XF04 和XF06 细胞贴壁生长特性的改变是由于感染了流感病毒
B．荷瘤实验中，注射Hela 细胞作为阳性对照，注射MRC-5 细胞作为阴性对照
C．XF06 细胞能同时解决疫苗生产过程中细胞贴壁和成瘤性两个限制因素
D．生产疫苗时，可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒
【答案】A
【解析】A、题意显示，将野生型MDCK 传代培养60 代后，通过悬浮驯化获得能悬浮生长的XF04 和XF06
两种细胞，即XF04 和XF06 细胞贴壁生长特性的改变是由于悬浮驯化获得的，A 错误；
B、荷瘤实验中，注射Hela 细胞（人宫颈癌细胞）作为阳性对照，因为Hela 细胞能形成皮下肿瘤，注射
MRC-5 细胞（人胚肺成纤维细胞）作为阴性对照，因为MRC-5 细胞未观察到皮下肿瘤，B 正确；
C、由图可知，注射XF06 细胞的②组未观察到皮下肿瘤，说明XF06 细胞无成瘤性，又因为其能悬浮生长，
所以能解决疫苗生产过程中细胞贴壁和成瘤性两个限制因素，C 正确；
D、病毒需要在活细胞中增殖，因此，生产疫苗时，可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流
感病毒，D 正确。
2．（2026·广东中山·一模）世界上第一只用体细胞克隆的哺乳动物多莉羊寿命仅有7 年，而普通绵羊
的平均寿命在12 岁左右。下列分析错误的是（ ）
A．获取的卵母细胞可立即用于核移植
B．通过电融合法使去核的卵母细胞与供体细胞核融合
C．克隆羊的端粒比较短，基因表达异常可能导致其早衰
D．克隆羊的性状与供体、受体和培养环境均有关
【答案】A
【解析】A、卵母细胞需经成熟培养（如MII 期）后才能用于核移植，不能“立即”使用，A 错误；
B、电融合法可促进去核卵母细胞与供体细胞核融合，B 正确；
C、科学家认为端粒随着细胞的分裂不断缩短，克隆动物的端粒通常比正常动物短，这会导致基因表达异
常，进而可能引发早衰，C 正确；
D、克隆动物的遗传物质主要来自供体细胞，但受体细胞的细胞质也会影响基因表达，环境也会影响基因
的表达，D 正确。
3．（2026·陕西商洛·一模）我国研究人员开发出了快速化学重编程系统，10 天内将成体细胞转化为多
能干细胞（hCiPS）。实验显示，对15 个供体细胞系诱导成功率为100%，效率比传统方法高20 倍，能克
服重编程抗性。研究还表明，该系统通过清除体细胞表观遗传标记，可显著降低重编程的表观遗传屏障。
下列叙述正确的是（ ）
A．利用表观遗传改变DNA 碱基序列来调控基因表达，可实现快速重编程
B．hCiPS 培养过程中需持续通入95%CO2和5%O2以维持细胞代谢需求
C．推测表观遗传障碍的突破使抗性细胞系的重编程效率显著提升
D．重编程后的hCiPS 细胞具有与胚胎干细胞完全相同的分化潜能
【答案】C
【解析】A、表观遗传的特点是基因的DNA 碱基序列不发生改变，仅通过DNA 甲基化、组蛋白修饰等方式
调控基因表达，A 错误；
B、动物细胞培养的气体环境为95%空气（满足细胞有氧呼吸的氧气需求）和5%CO （维持培养液的
₂
pH），B 错误；
C、由题意可知，抗性细胞系因表观遗传屏障难以重编程，而该系统可打破这一屏障，使效率提升20 倍
以上，C 正确；
D、多能干细胞虽具备多向分化潜能，但其基因表达模式、表观遗传状态及发育潜能与胚胎干细胞仍存在
差异。例如，某些基因印记的保留可能导致分化偏向性，因此两者并非“完全相同”，D 错误。
4．（2026·湖北随州·一模）研究发现三特异性抗体可实现对小鼠多发性骨髓瘤细胞（MM）的选择性杀
伤，作用机理如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．用单克隆抗体技术制备的3 种抗体融合可得到三特异性抗体
B．筛选该三特异性抗体时需使用制备三特异性抗体时所使用的3 种抗原蛋白
C．三特异性抗体通过促进T 细胞的活化并释放细胞因子，提高机体对MM 的杀伤力
D．三特异性抗体与TCR 和CD28 结合可保持较高的T 细胞数量和活性
【答案】A
【解析】A、用单克隆技术制备的3 种杂交瘤细胞融合可得到三特异性抗体，A 错误；
B、筛选该三特异性抗体，利用抗原-抗体特异性杂交原理，由于三特异性抗体含有三种抗体，故制备该
抗体时，需要使用3 种抗原蛋白，B 正确；
C、从图中看出，三特异性抗体能促进T 细胞活化并释放细胞因子，细胞因子会促进T 淋巴细胞的活化，
从而提高机体对MM 细胞的杀伤力，C 正确；
D、从图中看出，一方面三特异性抗体与T 细胞膜上的CD28 结合，抑制T 细胞死亡，另一方面三特异性抗
体与T 细胞膜上的TCR 结合，促进T 细胞活化，所以三特异性抗体与TCR 和CD28 结合可保持较高的T 细
胞数量和活性，D 正确。
5．（2026·北京东城·一模）某种IL-17A 单抗能够阻断IL-17A 与IL-17A 受体结合，抑制强直性脊柱炎
的炎症发生和发展。有关单抗制备过程叙述不正确的是（ ）
A．需要利用动物细胞培养及动物细胞融合技术
B．从IL-17A 免疫的小鼠中获取骨髓瘤细胞和B 细胞
C．使用PEG、灭活病毒均可诱导骨髓瘤细胞和B 细胞融合
D．将抗体检测阳性的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔大量生产单抗
【答案】B
【解析】A、单克隆抗体制备过程中，需要先诱导B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，再对筛选得到的杂交瘤
细胞进行克隆化培养，涉及动物细胞融合和动物细胞培养技术，A 正确；
B、制备IL-17A 单抗时，用IL-17A 免疫小鼠的目的是从小鼠脾脏中获取能产生特异性抗体的B 淋巴细胞，
骨髓瘤细胞是具有无限增殖能力的小鼠肿瘤细胞，不需要从免疫后的小鼠中获取，B 错误；
C、诱导动物细胞融合的常用方法包括化学法（PEG 即聚乙二醇）、生物法（灭活病毒）等，二者均可诱
导骨髓瘤细胞和B 细胞融合，C 正确；
D、大量生产单克隆抗体的方法包括体外培养杂交瘤细胞、或将抗体检测阳性的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔
增殖，从小鼠腹水中提取单抗，D 正确。
6．（2026·河北保定·一模）我国科学家利用诱导多能干细胞（iPS 细胞）定向分化为神经前体细胞，
实现了全球首次对早发型帕金森病的临床治愈。下列说法错误的是（ ）
A．该技术采用的iPS 细胞功能上类似胚胎干细胞，但避免了伦理争议
B．该技术需要将iPS 细胞培养在合成培养基中，经历原代和传代培养
C．利用iPS 细胞治愈早发型帕金森病，体现了细胞具有全能性
D．iPS 细胞与神经前体细胞在形态、结构和功能上存在稳定性差异
【答案】C
【解析】A、iPS 细胞是诱导多能干细胞，功能上和胚胎干细胞类似，具备分化为多种组织细胞的能力，
且iPS 细胞由成体细胞诱导获得，无需破坏胚胎，避免了胚胎干细胞相关的伦理争议，A 正确；
B、iPS 细胞的培养属于动物细胞培养，需使用合成培养基（通常添加血清等天然成分），培养过程会依
次经历原代培养和传代培养阶段，B 正确；
C、细胞全能性是指细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能，该技
术仅将iPS 细胞分化为神经前体细胞，并未发育为完整的个体或分化成其他各种细胞，因此不能体现细
胞全能性，C 错误；
D、iPS 细胞定向分化为神经前体细胞，细胞分化的实质是基因的选择性表达，会使子代细胞与亲代细胞
在形态、结构和功能上出现稳定性差异，D 正确。
7．（2026·北京门头沟·一模）诱导多能干细胞（iPSCs）在生物医药领域有广阔的应用前景。研究人
员利用多种小分子化合物协同诱导小鼠胎儿成纤维细胞，成功获得iPSCs。相关叙述错误的是（
）
A．利用胰蛋白酶处理小鼠胎儿某些组织可获得分散的成纤维细胞
B．小分子化合物改变了小鼠胎儿成纤维细胞的基因表达
C．小鼠胎儿成纤维细胞形成iPSCs 的过程属于细胞分化
D．培养小鼠胎儿成纤维细胞和iPSCs 时需提供一定浓度的CO2
【答案】C
【解析】A、动物细胞培养时，胰蛋白酶可分解细胞间的粘连蛋白，使组织块分散为单个细胞，因此利用
胰蛋白酶处理小鼠胎儿相关组织可获得分散的成纤维细胞，A 正确；
B、小分子化合物诱导高度分化的成纤维细胞转化为多能干细胞iPSCs 的本质是细胞发生重编程，改变了
细胞的基因表达情况，B 正确；
C、细胞分化是细胞在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程，通常是分化程度升高、全能性降
低的过程。成纤维细胞是分化程度高的体细胞，iPSCs 是分化程度低、全能性较高的干细胞，该过程属于
细胞脱分化（重编程），不属于细胞分化，C 错误；
D、动物细胞培养时，需要提供一定浓度的CO 以维持培养液的
₂
pH，因此培养成纤维细胞和iPSCs 都需要
提供一定浓度的CO ，
₂
D 正确。
故选C。
8．（2026·江苏·一模）某种生物活性绷带是将一些细胞置于特殊膜片上增殖形成的医用敷料。该敷料
可将细胞“释放”到伤口处，促进新生皮肤的生长。下列相关叙述正确的是（ ）
A．该绷带主要作用是阻止病菌侵入，降低感染风险
B．膜片为细胞的附着提供载体，便于细胞增殖生长
C．释放的细胞可直接形成皮肤结构，加快伤口愈合
D．若培养的是自体皮肤细胞，能避免炎症反应发生
【答案】B
【解析】A、该活性绷带的核心作用是释放细胞促进新生皮肤生长，阻止病菌侵入是普通无菌敷料的常规
功能，并非该活性绷带的主要作用，A 错误；
B、动物细胞具有贴壁生长的特点，特殊膜片可作为细胞附着的载体，为细胞增殖提供适宜的附着位点，
B 正确；
C、皮肤是包含多种组织的器官，释放的细胞需要经过细胞分裂、分化形成不同类型的细胞和组织后，才
能组成皮肤结构，无法直接形成皮肤，C 错误；
D、自体皮肤细胞可避免移植后的免疫排斥反应，但炎症反应是机体对伤口损伤的正常防御机制，无法通
过使用自体细胞避免，D 错误。
9．（2026·内蒙古呼和浩特·一模）黑色素瘤细胞可通过细胞表面的PD-L1 与细胞毒性T 细胞表面的
PD-1 结合抑制其免疫活性，实现免疫逃逸。免疫检查点疗法治疗肿瘤的机理是利用单克隆抗体阻断PD-
L1 与PD-1 的结合，恢复细胞毒性T 细胞的活性，下列有关该原理的分析错误的是（ ）
A．PD-L1 与PD-1 的结合体现细胞间的信息交流
B．肿瘤细胞免疫逃逸表明患者的免疫监视功能减弱
C．单克隆抗体的制备过程至少需进行两次筛选
D．化疗药物与PD-1 的单克隆抗体结合可实现精准治疗
【答案】D
【解析】A、PD-L1 是黑色素瘤细胞膜表面的蛋白质，PD-1 是细胞毒性T 细胞膜表面的蛋白质，二者通过
细胞膜直接接触实现信息传递，体现了细胞间的信息交流，A 正确；
B、免疫系统的免疫监视功能可识别并清除突变的肿瘤细胞，肿瘤细胞能够实现免疫逃逸，说明患者免疫
监视功能减弱，无法正常清除肿瘤细胞，B 正确；
C、单克隆抗体制备过程中，第一次需用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次需通过克隆化培养和抗体
检测，筛选出能分泌所需特异性抗体的杂交瘤细胞，因此至少需要进行两次筛选，C 正确；
D、PD-1 是细胞毒性T 细胞表面的蛋白，PD-1 的单克隆抗体作用靶点是T 细胞而非肿瘤细胞，将化疗药物
与该抗体结合无法将药物精准导向肿瘤细胞，不能实现精准治疗，D 错误。
10．（2026·北京房山·一模）医院常用核酸检测和血清抗体检测来诊断是否感染支原体。下列叙述正
确的是（ ）
A．该核酸检测中使用的分子探针可用于其他病原体检测
B．PCR 体系中需加入耐高温的DNA 连接酶
C．抗体检测阳性而核酸检测阴性，提示可能为既往感染
D．利用单克隆抗体药物靶向治疗支原体感染，属于细胞免疫
【答案】C
【解析】A、核酸检测的分子探针是与支原体特定核酸序列互补的单链核酸片段，具有物种特异性，仅能
识别支原体的核酸，无法用于其他病原体检测，A 错误；
B、PCR 体系中需要耐高温的DNA 聚合酶（Taq 酶）催化子链合成，DNA 连接酶的作用是连接两个DNA 片段，
不是PCR 的必需原料，B 错误；
C、抗体检测阳性说明机体曾感染支原体并产生了特异性抗体，核酸检测阴性说明当前体内无支原体存在，
因此提示为既往感染，C 正确；
D、细胞免疫依靠效应T 细胞裂解靶细胞发挥作用，单克隆抗体属于体液免疫的免疫活性物质，利用抗体
治疗不属于细胞免疫，D 错误。
11．（2026·北京石景山·一模）细胞工程在社会生产中的应用日益广泛。下列相关技术和方法正确的
是（ ）
A．原生质体需在低渗溶液中长期保存，以防止过度失水而死亡
B．可利用灭活病毒诱导B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合
C．正常细胞体外培养时，都具有贴壁生长的特点
D．动物克隆过程中，核移植的受体细胞通常是去核的卵原细胞
【答案】B
【解析】A、原生质体无细胞壁保护，若在低渗溶液中会大量吸水涨破，应在等渗或略高渗溶液中保存，
A 错误；
B、诱导动物细胞融合的方法包含灭活病毒诱导法，B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合属于动物细胞融合，可
利用灭活病毒诱导，B 正确；
C、正常动物细胞体外培养时，大多数具有贴壁生长的特点，但并非所有细胞都如此，如淋巴细胞可悬浮
生长，“都具有”表述绝对，C 错误；
D、动物克隆过程中，核移植的受体细胞通常是去核的减数第二次分裂中期的卵母细胞，其细胞质含有诱
导细胞核全能性表达的物质，并非卵原细胞，D 错误。
12．（2026·辽宁·一模）中国仓鼠卵巢细胞（CHO 细胞）是生物医学研究和生物制药工业中常用的一种
动物细胞系，为贴壁生长型细胞。下列关于CHO 细胞培养所需基本条件和过程的叙述，错误的是（
）
A．原代培养和传代培养前都需要用胰蛋白酶等处理所培养材料
B．若用基因工程改造CHO 细胞为悬浮生长型，则其分裂不再受阻
C．培养液中通常添加血清以提供细胞生长所必需的营养物质
D．培养箱中通入含95%空气和5%CO2的气体，培养液应保持无菌、无毒
【答案】B
【解析】A、原代培养前需用胰蛋白酶处理动物组织，将其分散为单个细胞制成细胞悬液；CHO 细胞为贴
壁生长细胞，传代培养前也需要用胰蛋白酶处理使贴壁细胞从瓶壁上脱离并分散，A 正确；
B、正常动物细胞的分裂次数存在天然限制，仅改造为悬浮生长型并未改变CHO 细胞的正常细胞特性，其
分裂仍会受细胞寿命、细胞密度等因素限制，只有发生癌变的细胞分裂才不受阻，B 错误；
C、人类尚未完全明确动物细胞生长所需的全部营养物质，培养液中添加血清可以提供细胞生长所需的未
知必需营养物质，C 正确；
D、动物细胞培养的气体环境为95%空气（为细胞有氧呼吸提供氧气）和5%CO2（作用是维持培养液的
pH），同时为防止杂菌污染和细胞代谢产物积累毒害细胞，培养液需保持无菌、无毒，D 正确。
13．（2026·北京丰台·一模）诺如病毒（NV）是引起非细菌性流行性胃肠炎的主要病原体。科学家以
NV 的核衣壳蛋白VP1 为抗原，制备出了单克隆抗体。下列叙述错误的是（ ）
A．对小鼠反复注射VP1，能从小鼠脾中得到产生VP1 抗体的B 淋巴细胞
B．将B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞
C．对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，多次筛选可获得特定的杂交瘤细胞
D．制备出该单克隆抗体，有利于进一步开发快速检测诊断试剂，控制疾病传播
【答案】B
【解析】A、VP1 作为抗原反复注射小鼠，可刺激小鼠发生体液免疫，脾脏中会产生能分泌抗VP1 抗体的B
淋巴细胞，A 正确；
B、诱导B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后，融合细胞有三类：B 淋巴细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身
融合细胞、B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞，因此诱导融合后的细胞不都是杂交瘤细胞，
还需进一步筛选，B 错误；
C、获得杂交瘤细胞后，需进行克隆化培养和专一抗体检测，经过多次筛选才能获得既能无限增殖又能产
生所需抗VP1 抗体的特定杂交瘤细胞，C 正确；
D、单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，制备出抗VP1 的单克隆抗体可用于开发诺如病毒快速检
测试剂，便于早发现早防控，控制疾病传播，D 正确。
14．（2026·广东广州·一模）表皮生长因子受体（EGFR）在肿瘤发生中起重要作用，其过表达常见于
多种恶性肿瘤。研究人员利用杂交瘤技术制备抗EGFR 单克隆抗体。下列叙述错误的是（ ）
A．用被其他抗原污染的EGFR 免疫小鼠后，所得的每个B 细胞也只能产生一种抗体
B．经过多次克隆化培养和抗体检测，能获得足够数量的特定杂交瘤细胞
C．杂交瘤细胞在小鼠腹腔内能快速增殖，与腹腔内具有充足的营养物质等适宜条件有关
D．细胞毒素与抗EGFR 单克隆抗体偶联可使抗体更好地杀死肿瘤细胞
【答案】D
【解析】A、一个已免疫的B 细胞（浆细胞）的基因只能编码产生一种特异性抗体，与免疫所用抗原是否
被其他抗原污染无关，A 正确；
B、单克隆抗体制备过程中，第一次筛选获得杂交瘤细胞后，还需经过多次克隆化培养和特异性抗体检测，
才能筛选出足够数量的能分泌抗EGFR 抗体的特定杂交瘤细胞，B 正确；
C．小鼠腹腔内温度、pH 适宜，且含有充足的营养物质，可为杂交瘤细胞增殖提供适宜的环境，因此杂交
瘤细胞在小鼠腹腔内能快速增殖，C 正确；
D．抗EGFR 单克隆抗体的作用是靶向识别肿瘤细胞表面的EGFR，本身不具备杀伤肿瘤细胞的能力，偶联
的细胞毒素才是杀死肿瘤细胞的有效成分，D 错误。
15．（2026·山东聊城·一模）“细胞农业”是在实验室直接通过细胞培养物生产农产品的新兴领域。
按最终产品可分为细胞产品和非细胞产品。细胞产品，如细胞培养肉（从动物身上提取肌肉细胞，在细
胞培养基中培养而成的“肉”）。非细胞产品有蛋白质、咖啡因等细胞代谢产物。下列叙述错误的是（
）
A．细胞培养肉生产的原理是动物细胞的细胞核具有全能性
B．非细胞产品咖啡因是利用植物细胞培养技术获取的细胞次生代谢物
C．诱导外植体脱分化形成愈伤组织的过程需要在遮光条件下进行
D．“细胞农业”可在一定程度上降低生态足迹，增加环境承载力
【答案】A
【解析】A、细胞培养肉是通过诱导动物肌肉细胞增殖获得大量肌肉细胞群，原理是动物细胞增殖，该过
程没有体现细胞核的全能性，A 错误；
B、咖啡因是植物产生的次生代谢产物，不属于植物生长发育必需的初级代谢物，可通过植物细胞培养技
术从细胞代谢产物中提取，B 正确；
C、诱导外植体脱分化形成愈伤组织的过程中，光照会诱导细胞分化形成维管组织，不利于愈伤组织的形
成，因此该过程需要在遮光条件下进行，C 正确；
D、“细胞农业”在实验室中通过细胞培养生产农产品，无需占用大量耕地、饲养大量畜禽，可减少资源
消耗和废弃物排放，能在一定程度上降低生态足迹，提高环境承载力，D 正确。
故选A。
16．（2026·辽宁丹东·一模）药物吉西他滨对胰腺癌细胞（PANC-1）有杀伤作用，科研人员为比较抗
人EGFR、CA199 和MUC1 三种物质的单克隆抗体分别偶联的载药纳米粒子的靶向效果，设计七组实验（A～
G 组）检测细胞杀伤率。下列相关叙述错误的是（ ）
注：EGFR、CA199 和MUC1 为癌细胞表面抗原，A、B、C 组为三种抗体偶联载药纳米粒子处理组，D 组为单
纯载药的纳米粒子处理组，E 组为单纯药处理组，G 组为生理盐水处理组。
A．F 组应设置为非靶向抗体偶联载药纳米粒子处理组，以排除药物以外因素的干扰
B．培养PANC-1 时培养液需添加一定量的抗生素，目的是筛选出具有抗生素抗性的细胞
C．EGFR、CA199 和MUC1 作为癌细胞表面抗原，是单克隆抗体实现靶向识别的分子基础
D．制备单克隆抗体时，经选择培养后的杂交瘤细胞单个接种到96 孔板上，目的是获得足量的抗
EGFR 单克隆抗体
【答案】ABD
【解析】A、本实验目的是探究三种靶向抗体偶联载药纳米粒子的杀伤效果，A、B、C、D、E 五组已经证
明三种单克隆抗体的靶向作用，D 组和E 组证明药物是否结合纳米粒子，对于癌细胞的杀伤力影响不大，
G 组为生理盐水处理组，且F 组与G 组的杀伤力相近，F 组应设置为单纯纳米粒子处理组，A 错误；
B、培养PANC-1 时培养液需添加一定量的抗生素，目的是防止杂菌感染，B 错误；
C、EGFR、CA199 和MUC1 是癌细胞表面特异性抗原，单克隆抗体能与相应抗原特异性结合，因此可作为靶
向识别的分子基础，实现载药纳米粒子的靶向递送，C 正确；
D、制备单克隆抗体时，经选择培养后的杂交瘤细胞单个接种到96 孔板上，目的是进行克隆化培养和抗
体检测，筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞，D 错误。
17．（2026·湖南·一模）我国科学家首次利用化学重编程多能干细胞（CiPSCs）分化而来的胰岛细胞
自体移植到一名糖尿病（T1DM）患者体内，患者在移植后75 天开始不再需要外源胰岛素治疗。具体流程
如图所示。下列分析正确的是（ ）
A．从患者体内抽取的脂肪组织，在制备成单个细胞时可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
B．脂肪细胞和CiPSCs 的培养都需要在CO2培养箱中进行
C．人的CiPSCs 转化为胰岛细胞的过程，类似于植物组织培养中的脱分化
D．该成果不仅治愈了患者的2 型糖尿病，还解决了免疫排斥问题
【答案】AB
【解析】A、脂肪组织要经过胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，才能分散成单个细胞，A 正确；
B、动物细胞的培养均需在CO2培养箱中进行，以维持培养液的pH，B 正确；
C、CiPSCs 是分化程度低的多能干细胞，转化为胰岛细胞是细胞分化（形成功能特异的分化细胞），类似
于植物组织培养中的再分化，C 错误；
D、该成果解决的是患者胰岛B 细胞受损导致胰岛素缺乏的问题，属于1 型糖尿病，D 错误。
18．（2026·黑龙江哈尔滨·一模）H1N1 病毒表面同一抗原的不同位点可分别与抗体1 和抗体2 发生特
异性结合。下图表示双抗夹心胶体金法检测试剂盒内部的构造。其中抗体1 与胶体金颗粒偶联（聚集后
呈红色可移动）、抗体2 是以H1N1 抗原制备的单克隆抗体，抗体3 是针对抗体1 的抗体，若抗体1 在T
或C 线大量聚集，将使该处显红色。下列说法正确的是（ ）
A．若C 线不显色，即使T 线显色，检测结果也不可信
B．利用细胞工程制备抗体2，需要克隆化培养和抗体检测
C．H1N1 病毒与抗体1 和抗体2 结合能使T 线呈现红色
D．无论检测条件如何，C 线都会呈现红色
【答案】ABC
【解析】A、C 线是质控线，固定有抗体3，它可以结合抗体1，如果C 线不显色，说明试剂本身可能失效，
或者检测操作存在问题，即使T 线显色，检测结果也不可信，A 正确；
B、抗体2 是针对H1N1 抗原的单克隆抗体，利用细胞工程制备单克隆抗体2，需要筛选出能产生特异性抗
体的杂交瘤细胞，需要进行克隆化培养和抗体检测，B 正确；
C、 H1N1 病毒与抗体1 和抗体2 结合，形成病毒-抗体1-胶体金-抗体2 复合物，使抗体1 在T 线大量聚
集，从而使T 线呈现红色，C 正确；
D、C 线显色需要抗体1 能正常移动并与抗体3 结合，如果检测条件异常（如试剂失效、操作错误），C 线
也可能不显色，D 错误。
19．（2026·河北保定·一模）呼吸道合胞病毒（RSV）是引起婴幼儿、免疫功能低下者和老年人下呼吸
道急性感染的主要病原体之一。NS1 非结构蛋白在该病毒免疫逃逸中起关键作用。现通过杂交瘤技术制备
抗NS1 的单克隆抗体（如图）来治疗 RSV 的感染。下列叙述错误的是（ ）
A．向小鼠体内注射 NS1 蛋白后，提取 B 淋巴细胞
B．②过程可采用灭活病毒诱导法或PEG 融合法诱导细胞融合
C．③得到的杂交瘤细胞都可以产生抗 NS1 的抗体
D．将该单克隆抗体和细胞毒素结合可定向杀死肿瘤细胞
【答案】CD
【解析】A、制备抗NS1 的单克隆抗体，首先需要将NS1 蛋白作为抗原注射入小鼠体内使小鼠免疫，再从
小鼠体内获取能产生相应抗体的B 淋巴细胞，A 正确；
B、②为动物细胞融合过程，动物细胞融合可采用灭活病毒诱导法，也可采用PEG（聚乙二醇）融合法诱
导，B 正确；
C、③是细胞融合后初步得到的杂交瘤细胞，此时还未经过筛选：融合得到的杂交瘤细胞有多种，只有能
识别NS1 的杂交瘤细胞才能产生抗NS1 抗体，并非所有杂交瘤细胞都可以产生该抗体，C 错误；
D、该单克隆抗体是针对呼吸道合胞病毒（RSV）的 NS1 蛋白，而非肿瘤细胞的抗原，因此不能定向杀死
肿瘤细胞，D 错误。
20．（2026·河北沧州·一模）过继性治疗适用于肿瘤晚期患者，是指将具有抗肿瘤活性的细胞回输给
肿瘤患者机体进行治疗。具体做法是从患者体内分离出免疫细胞，经诱导成为肿瘤特异性杀伤细胞，将
这些细胞回输到患者体内。下列说法错误的是（ ）
A．过继性治疗的优点是不会产生免疫排斥
B．肿瘤特异性杀伤细胞可能是浆细胞，其可以产生抗体
C．肿瘤组织中分离出的免疫细胞具有无限增殖的特点
D．使用液体培养基培养肿瘤特异杀伤细胞，不会出现接触抑制
【答案】BCD
【解析】A、治疗所用的细胞来源于患者自身，因此回输后不会引发免疫排斥反应，这是该疗法的核心优
势之一，A 正确；
B、浆细胞的功能是分泌抗体，不具备直接杀伤肿瘤细胞的能力。肿瘤特异性杀伤细胞是细胞毒性T 细胞
（CTL），可直接识别并裂解靶细胞（肿瘤细胞），B 错误；
C、从肿瘤组织中分离出的是正常免疫细胞（如T 细胞），正常体细胞的增殖次数是有限的，不具备无限
增殖的能力，C 错误；
D、液体培养基里细胞也会出现接触抑制，D 错误。
21．（2026·河北保定·一模）类风湿关节炎致病的直接机理是机体蛋白发生瓜氨酸化后，部分B 细胞
将其识别为抗原并产生特异性抗体，进而攻击自身细胞。为治疗该病，科研人员通过基因工程给患者的
部分T 细胞装上具有特异性识别功能的CAR 结构，制备出CAR-T 细胞；同时合成含异硫氰酸荧光素
（FITC）和瓜氨酸化蛋白的连接臂分子，其作用如图所示。下列说法错误的是（ ）
A．类风湿关节炎属于自身免疫病，是免疫系统将自身物质当作外来异物攻击导致的
B．B 细胞增殖分化产生特异性抗体的过程需要抗原呈递细胞、细胞毒性T 细胞参与
C．该疗法可在精准治疗类风湿关节炎的同时，避免损伤机体正常的特异性免疫功能
D．将连接臂分子的FITC 替换成肿瘤特异抗原，则该CAR-T 细胞可用于治疗癌症
【答案】BD
【解析】A、类风湿关节炎是机体免疫系统攻击自身蛋白瓜氨酸化的细胞，属于自身免疫病，A 正确；
B、B 细胞增殖分化为浆细胞，浆细胞才能产生抗体，这个过程属于体液免疫，主要依赖辅助性T 细胞产
生的细胞因子促进B 细胞的增殖、分化，B 错误；
C、该疗法中CAR-T 细胞通过连接臂分子特异性识别瓜氨酸化蛋白，仅针对病变细胞发挥作用，不会破坏
正常细胞，C 正确；
D、CAR-T 细胞的CAR 结构具有特异性识别功能，含异硫氰酸荧光素（FITC）和瓜氨酸化蛋白的连接臂分
子仅起到连接作用，若将FITC 替换成能够特异性结合肿瘤细胞表面的特定抗原的结构，不可用于治疗癌
症，D 错误。
22．（2026·河北邢台·一模）对于抗原和抗体的关系，克隆选择学说认为：在抗原进入机体之前，具
有不同类型特异性受体的B 细胞就已经存在，而不是在抗原进入机体后以抗原为模板设计出来的。为验
证克隆选择学说的观点，研究人员以小鼠为材料进行实验，实验过程如表所示。下列有关叙述正确的是
（ ）
实验过程
预期实验结果
初次注射
再次注射
对照组
高剂量的抗原X
适宜剂量的抗原Y
产生X 抗体和Y 抗体
实验组1
高剂量的具有放射性同位素标记的抗原X
①
③
实验组2
②
适宜剂量的抗原X
④
注：高剂量的具有放射性同位素标记的抗原能够杀死全部具有其受体的B 细胞。
A．①为适宜剂量的抗原Y，②为高剂量的抗原X
B．每组实验都需要选择生理状态相似的多只健康小鼠进行实验
C．X 抗体是由浆细胞产生的蛋白类免疫活性物质
D．若③为只产生Y 抗体，④为不产生X 抗体，则可证明克隆选择学说成立
【答案】BCD
【解析】A、根据实验设计的对照原则，①应为适宜剂量的抗原Y，②应为高剂量的具有放射性同位素标
记的抗原X，这样才能与对照组和其他实验组形成有效对照，A 错误；
B、每组实验都选择生理状态相似的多只健康小鼠进行实验，可减少实验误差，保证实验结果的可靠性，
B 正确；
C、抗体是专门应对抗原的蛋白质，由浆细胞产生，属于免疫活性物质，C 正确；
D、若③为只产生Y 抗体，④为不产生X 抗体，则可证明克隆选择学说成立，即抗原进入机体之前，具有
不同类型特异性受体的B 细胞就已经存在，D 正确。
23．（2026·辽宁·一模）我国研究团队将由iPS 细胞分化而来的胰岛移植到一名糖尿病患者体内，1 年
内随访发现该患者不再需要外源胰岛素治疗，恢复了自身的血糖调控功能。下列叙述正确的是（
）
A．iPS 细胞属于胚胎干细胞的一种，具有分裂和分化的潜能
B．该治疗案例的成功说明细胞分化具有稳定性
C．iPS 细胞的培养液应添加糖类、氨基酸等营养物质
D．iPS 细胞在治疗多种疾病方面前景广阔，且不会产生任何不利影响
【答案】BC
【解析】A、iPS 细胞是通过体外诱导已分化的细胞获得的类似胚胎干细胞的一种细胞，即诱导多能干细
胞，并不属于胚胎干细胞，A 错误；
B、iPS 细胞分化而来的胰岛可持续产生胰岛素，说明细胞分化具有稳定性和持久性，B 正确；
C、iPS 细胞的培养液应添加糖类、氨基酸等营养物质从而使iPS 细胞保持未分化状态，C 正确；
D、iPS 细胞在治疗多种疾病方面前景广阔，如阿尔茨海默症、心血管疾病等，但iPS 细胞具有不断增殖
的特性，临床使用时还需关注其致癌的风险，D 错误。
24．（2026·北京昌平·一模）TMUV 是一种可引起鸭严重疾病的RNA 病毒。研究人员使用BHK-21 细胞
（仓鼠肾细胞）作为模型，开展对该病毒感染机制的研究。
(1)科研人员向培养液中加入一种天然成分________，接种BHK-21 细胞后转移至_____________仪器中培
养。
(2)将提取的BHK-21 细胞所有膜蛋白分离纯化后，与TMUV 一起孵育一段时间后洗脱，再利用
______________进行杂交。结果发现，膜蛋白中的G 蛋白可与之形成杂交带，推测G 蛋白在TMUV 与细胞
结合中发挥作用。
(3)G 蛋白由两个结构域组成，分别位于氨基端和羧基端。科研人员将BHK-21 细胞分别与不同类型抗体共
孵育一段时间，去除未结合抗体后，进行TMUV 感染，一段时间后提取病毒RNA 并进行检测，结果如下图。
①对照组需加入______与BHK-21 细胞共孵育。
②该实验结果说明_________。
(4)基于上述研究，请提出两条预防鸭感染TMUV 的方法：________。
(5)研究人员利用与G 基因mRNA 互补的siRNA 及无关siRNA 开展实验，实验结果表明前者只能部分抑制病
毒感染，请提出后续研究方向：___________。
【答案】(1) 动物血清 CO2培养箱
(2)特异性识别病毒的抗体
(3) 无关抗体 TMUV 通过G 蛋白的氨基端与BHK-21 细胞结合
(4)敲除或修饰鸭的G 蛋白基因，开发针对G 蛋白氨基端的单克隆抗体药物
(5)可进一步筛选TMUV 的其他候选受体
【解析】（1）动物细胞培养液中通常需添加天然成分-血清，提供生长因子、激素、蛋白质等必需营养
物质。BHK-21 细胞为哺乳动物细胞，需在恒温、恒湿、含5%CO 的环境中培养，以维持培养液
₂
pH 稳定，
因此接种BHK-21 细胞后转移至CO2培养箱仪器中培养。
（2）该步骤为免疫印迹或免疫共沉淀实验，目的是检测G 蛋白是否与TMUV 结合。通过加入特异性识别病
毒的抗体，可识别并结合目标蛋白，形成杂交带，从而验证其参与病毒结合过程。
（3）①对照组需加入等量无关抗体与BHK-21 细胞共孵育。这是为了排除非特异性结合或操作本身对实
验结果的影响，确保实验组与对照组唯一变量为“抗体类型”。
②抗G 蛋白氨基端抗体组TMUV，RNA 相对表达量最低，说明该抗体能最有效阻断病毒侵入；抗G 蛋白羧基
端抗体组表达量较高，阻断效果较弱；对照组最高，无抗体干预时病毒复制最强。结论：TMUV 通过G 蛋
白的氨基端与BHK-21 细胞结合，是病毒侵入的主要功能域。
（4）研发靶向G 蛋白氨基端的中和抗体药物或疫苗，阻断病毒与宿主细胞受体结合；筛选小分子抑制剂
或肽类化合物，特异性干扰G 蛋白氨基端结构域功能，抑制病毒吸附与入侵。则预防鸭感染TMUV 的方法
可以是敲除或修饰鸭的G 蛋白基因，开发针对G 蛋白氨基端的单克隆抗体药物。
（5）研究人员利用与G 基因mRNA 互补的siRNA 及无关siRNA 开展实验，实验结果表明前者只能部分抑制
病毒感染，筛选并验证其他参与TMUV 侵染的关键宿主因子；即可进一步筛选TMUV 的其他候选受体。
25．（2026·云南·一模）激活特异性杀伤癌细胞的T 细胞需要两个信号：第一信号是特异性识别信号，
即T 细胞表面的TCR 识别癌细胞表面的MHC 分子复合物；第二信号是共刺激信号，即T 细胞表面的共刺激
分子（如CD3）接收的激活信号。研究人员以CD3 和BCMA（一种多发性骨髓瘤细胞表面特有的、高表达的
蛋白质）为抗原，制备了CD3×BCMA 双特异性抗体用于治疗多发性骨髓瘤。该研究项目的部分任务如下，
回答下列问题。
任务一：杂交瘤细胞A-B 的获取
(1)图甲表示制备鼠源双特异性抗体的过程。图中物质X 是_______，杂交瘤细胞A 的特点是_______。
(2)获得杂交瘤细胞B 需要进行两步筛选：第一步筛选获得杂交瘤细胞，第二步经多次筛选获得足够数量
的杂交瘤细胞B。需进行第二步筛选的原因是小鼠除了接触CD3 外，还可能接触其他抗原，导致小鼠体内
产生_______，经细胞融合后会获得多种杂交瘤细胞。诱导杂交瘤细胞A 与杂交瘤细胞B 融合的常用方法
有_______融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。
任务二：CD3×BCMA 双特异性抗体的制备及应用
(3)抗体由两条H 链和两条L 链组成。杂交瘤细胞A 产生的特异性抗体由两条H1链和两条L1链组成（如图
乙）；杂交瘤细胞B 产生的特异性抗体由两条H2链和两条L2链组成。杂交瘤细胞A-B 能合成H1、H2、L1、
L2四种多肽链，其中任意2 条H 链与2 条L 链随机结合形成10 种抗体，要筛选出图丙中的双特异性抗体，
应使用的抗原是________，其原理是_______。
(4)图丙是双特异性抗体与癌细胞和T 细胞结合的示意图。根据题目信息推测该双特异性抗体治疗多发性
骨髓瘤的原理是：该双特异性抗体能与T 细胞表面的CD3 特异性结合，______。
任务三：鼠源双特异性抗体的改造
(5)抗体包括可变区和恒定区两个部分。可变区负责特异性识别并结合抗原；恒定区是被异种生物的免疫
系统识别为“非己”的关键区。将上述获得的鼠源双特异性抗体注射到人体后，会引发免疫应答，进而
将该鼠源抗体清除使其失去疗效。为解决此问题，下列思路合理的有______（填序号）。
A．从被相应抗原反复免疫过的小鼠体内提取B 淋巴细胞，与人骨髓瘤细胞融合，筛选出相应的杂交
瘤细胞来生产抗体
B．制备转入人源抗体基因的转基因小鼠，用相应抗原反复免疫该转基因小鼠，然后从其体内提取B
淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，筛选出相应的杂交瘤细胞来生产抗体
C．从小鼠体内获取抗相应抗原的抗体可变区的基因片段，将该基因片段与人源抗体恒定区的基因片
段连接并构建基因表达载体，最终获得抗相应抗原的人鼠嵌合抗体
【答案】(1) BCMA 既能迅速大量增殖，又能产生抗BCMA 的抗体
(2) 多种B 淋巴细胞 PEG（聚乙二醇）
(3) BCMA 和CD3 只有该双特异性抗体既能与BCMA 特异性结合又能与CD3 特异性结合
(4)还能与多发性骨髓瘤细胞表面的BCMA 特异性结合，有利于T 细胞表面的TCR 识别癌细胞表面的MHC，
进而激活T 细胞杀伤癌细胞
(5)BC
【解析】（1）研究人员以CD3 和BCMA（一种多发性骨髓瘤细胞表面特有的、高表达的蛋白质）为抗原，
CD3 注射在下面一只鼠中，因此注射在上面一只鼠中的X 物质为BCMA；杂交瘤细胞A 为B 细胞与骨髓瘤细
胞融合后筛选而成，既能迅速大量增殖，又能产生抗BCMA 的抗体。
（2）除了接触CD3 外，小鼠接触过多种抗原，因此能产生多种B 淋巴细胞；诱导动物细胞融合的方法有
PEG（聚乙二醇）融合法（化学方法）、电融合法（物理方法）和灭活病毒诱导法（生物方法）等。
（3）图丙中的抗体为双特异性抗体，既能结合BCMA 也能结合CD3，因此应使用的抗原是BCMA 和CD3。
（4）该双特异性抗体能与T 细胞表面的CD3 特异性结合，还能与多发性骨髓瘤细胞表面的BCMA 特异性结
合，有利于T 细胞表面的TCR 识别癌细胞表面的MHC，进而激活T 细胞杀伤癌细胞，达到治疗多发性骨髓
瘤的目的。
（5）A、不能使用人的骨髓瘤细胞进行实验，A 错误；
B、制备转入人源抗体基因的转基因小鼠，可以减弱人的免疫应答，避免抗体被清除，B 正确；
C、可变区负责特异性识别并结合抗原，恒定区是被异种生物的免疫系统识别为“非己”的关键区，将鼠
的可变区基因片段与人源抗体恒定区的基因片段连接并构建基因表达载体，可减弱人的排斥反应，C 正确。
