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专题14 发酵工程和细胞工程
1、（2025 届河南省安阳市高三一模） 酸乳是牛奶在乳酸链球菌和保加利亚乳杆菌等作用下发酵形成的。
它具有爽口的酸味，且极易消化吸收，有调理肠道的作用，所以深受人们欢迎。其制备工艺为鲜乳→杀菌
→接种→发酵→后熟→成品。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 酸乳具有酸味的原因是含有乳酸，发酵产生乳酸的第二阶段伴随少量ATP 的生成
B. 酸乳有调理肠道的作用是因为后熟过程未经高温处理，活性乳酸菌可改善肠道微生态
C. 用于鲜乳的原液首先必须进行高温处理，其目的是消毒，以保证接种后的正常发酵
D. 平板划线法和稀释涂布平板法均可获得单一菌种，后者统计结果可能比实际值偏大
2、（2025 届河南省安阳市高三一模） 阿尔茨海默病（AD）是一种复杂的神经退行性疾病，β-淀粉样
蛋白在大脑中的积累和沉积是AD 发病和发展的主要因素。科研人员将蛋白酶与单克隆抗体结合制备了催
化性抗体，同时它还具有免疫活性，微量使用对AD 就有一定的治疗效果。下列相关叙述正确的是
（ ）
A. 杂交瘤细胞制备时可使用灭活病毒、高Ca2+—高pH 诱导细胞融合
B. 杂交瘤细胞产生的单克隆抗体只能从生物体的腹腔中大量提取
C. 催化性抗体效果显著的原因为单克隆抗体特异性强、酶有高效性
D. 杂交瘤细胞传代培养过程中会发生细胞贴壁现象及接触抑制现象
3、（2025 届河南省部分学校高三一模联考）影印接种法是一种用于研究微生物抗药性和筛选突变体的实
验技术。为检测某种氨基酸缺陷型菌株，实验人员的实验过程如图所示，其中基本培养基中缺乏某种氨基
酸，而完全培养基中含有该种氨基酸。下列叙述正确的是( )
A. 影印接种法和稀释涂布平板法相似，每个菌落都由单个菌体发育而来
B. 过程②培养时丝绒布先转印至完全培养基上再转印到基本培养基上
C. 应从完全培养基上挑选出氨基酸缺陷型菌株用于后续的培养和研究
D. 实验结束后对培养皿进行消毒处理后即可再次使用或者废弃
4、（2025 届河南省部分学校高三一模联考）成纤维细胞生长因子20(FGF20)可作为肿瘤标记物，为制备
抗FGF20 单克隆抗体以用于癌症早期诊断筛查，科研人员设计的流程如图所示。下列分析正确的是( )
A. 抗原甲为FGF20，一般从正常人体细胞的细胞表面获取
B. ①过程获得的B 淋巴细胞均能合成抗FGF20 抗体
C. ③过程的选择培养基对于未融合的亲本细胞和融合的异种核细胞的生长有抑制作用
D. 将抗FGF20 单克隆抗体与抗原甲进行杂交，可以用于检测该单克隆抗体的特异性
5、（2025 届河南省洛阳市三校联考一模） 耐高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大
实用性。嗜热菌
可以在高温环境中生存，其产生的淀粉酶最适温度较高。筛选能产生耐高温淀粉酶的嗜热菌过程如图1 所
示，其中I 号培养基用碘液处理的结果如图2 所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 图2 中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种
B. 倒平板后对培养皿进行高压蒸汽灭菌
C. 淀粉是图2 所示固体培养基的唯一碳源
D. 甲乙试管中均为选择培养基
6、（2025 届河南省洛阳市三校联考一模） 为了分离某种微生物，实验室配制的培养基成分如下：葡萄
糖、氯化钠、K2HPO4、酚红、琼脂糖、水和尿素溶液。下列叙述错误的是（ ）
A. 葡萄糖的作用是提供碳源并调节渗透压
B. 配制该培养基时，必须使用无菌水
C. 加入尿素溶液之前，需先调好PH
D. 培养基能用于分离以尿素为氮源的微生物
7、（2025 届河南省新高中创新联盟高三下学期模拟卷一） 下列关于传统发酵技术的叙述，正确的是（
）
A. 在果酒发酵的基础上进行果醋发酵，只需开盖通入氧气即可
B. 泡菜发酵过程中需每隔一段时间打开盖，以排出产生的CO2
C. 腐乳发酵是在无氧条件下利用毛霉产生的蛋白酶将蛋白质分解为肽和氨基酸
D. 酱油是利用黑曲霉菌产生的蛋白酶将原料中的蛋白质分解为肽和氨基酸，经淋洗、调制而成的
8、（2025 届河南省新乡市高三一模）噬菌体能专一性感染细菌，进入宿主细胞的噬菌体不会被杀病毒剂
灭活，在裂解宿主细胞后能继续感染并裂解周围细菌。在培养基平板上，一个被感染的细菌最终会形成一
个噬菌斑。利用这一原理可以检测受污染水样中目标菌的数量，具体操作步骤如图所示，实验统计的平均
噬菌斑数量为56 个。下列叙述正确的是（ ）
A. 对培养基、培养皿灭菌都要用到高压蒸汽灭菌锅
B. 步骤3 常使用的接种工具是接种环或涂布器
C. 待检测受污染水样中目标菌的浓度为1120 个
D. 噬菌体感染并裂解细菌的特性有利于减少污水中细菌的数量
9、（2025 届河南省新乡市高三一模） 野天麻是一种名贵的药用植物，具有镇静、抗癫痫等作用，对神
经系统疾病有很好的治疗效果，其主要活性成分是天麻素。利用植物细胞工程可以生产天麻素，相关过程
如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 过程①表示脱分化过程，过程②常用胰蛋白酶进行处理
B. 对茎段和培养基都要进行灭菌处理以防止杂菌污染
C. 图示过程主要运用的是植物组织培养技术，依据的原理是植物细胞的全能性
D. 利用图示过程生产天麻素既能提高产量又不会破坏野生植物资源
10、（2025 届河南省郑州市郑东新区高三一模）小鼠体细胞克隆胚胎着床后胎盘发育显著异常可能是与
克隆胚胎中H3K27me3 印记基因过度表达有关，H3K27me3 印记基因敲除极大提高了体细胞克隆的成功率。
科学家分别测量H3K27me3 印记基因敲除的克隆小鼠（甲组）、H3K27me3 印记基因不敲除的克隆小鼠
（乙组）和受精卵来源的小鼠（丙组）的体重和胎盘直径，结果如下图所示。下列相关分析错误的是（
）
A. 克隆胚胎过大可能是克隆胚胎着床后成活率低的原因
B. 克隆胚胎过大的原因可能是克隆胚胎的胎盘过大
C. H3K27me3 印记基因过度表达抑制胎盘的发育
D. H3K27me3 印记基因的表达产物可能影响早期胚胎滋养层细胞的发育
11、（2025 届河南省郑州市郑东新区高三一模）人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层
细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG 单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG 单克隆抗体制备流程
示意图，下列叙述正确的是（ ）
A. 制备抗HCG 单克隆抗体的动物细胞工程技术有细胞核移植、动物细胞培养和动物细胞融合
B. 将纯化HCG 注入小鼠的目的是为了从产生免疫反应小鼠的脾脏中获得杂交瘤细胞
C. 杂交细胞经过筛选、克隆培养后，即可以获得产生抗HCG 抗体的杂交瘤细胞
D. 腹水中制备抗HCG 单克隆抗体时，需要注射免疫抑制剂，使小鼠易于接纳杂交瘤细胞
12、（河南省名校联盟2025 届高三第六次联考一模）甘薯病毒病造成了薯类品种保种难的问题，因此脱
毒技术被广泛应用于薯类品种防病毒、防退化。下列有关甘薯脱毒技术的说法，正确的是（ ）
A. 培育脱毒苗的外植体要依次用酒精和次氯酸钠消毒
B. 一般应选用植物成熟的组织作为外植体进行组织培育
C. 植株脱毒率主要取决于生长素和细胞分裂素的浓度比
D. 可通过接种病毒在个体水平检测
否成功获得脱毒苗
13、（河南省名校联盟2025 届高三第六次联考一模） 实验小组为了检测某化学药物是否会诱发基因突
变，在特定选择培养基上培养组氨酸缺陷型细菌，并在培养基中间放置一张浸润一定浓度该药物的圆纸片，
一段时间后实验结果如图所示，下列有关说法错误的是（ ）
A. 该特定的选择培养基上应不含有组氨酸
B. 内侧无细菌生长说明内侧细菌没有发生突变
C. 该实验应设置不含该药物的培养基作为对照组
D. 若适当提高该药物的浓度，则菌落范围可能会变大
14、（2025 届河南省创新发展联盟高三下学期春季模拟检测）. 质检人员利用由琼脂、无机盐、酵母粉
和蛋白胨等配制的培养基，从新鲜牛奶中分离并计数细菌，进行食品卫生检测。下列叙述错误的是（
）
A. 质检人员配制的该培养基是一种选择培养基
B. 蛋白胨为细菌的生长主要提供碳源、氮源和维生素
C. 设置一组未接种的平板倒置培养以检测培养基的灭菌状况
D. 平板上长出的一个菌落可代表鲜牛奶稀释液中的一个活菌
15、（2025 届河南省多地高三下学期3 月模拟联考） 用SIX1 基因缺陷的猪胎儿成纤维细胞和猪去核卵
母细胞构建重构胚，敲除SALL1 基因后形成早期胚胎，其中一组注入人源干细胞，再植入代孕母猪，最
后可得到肾脏缺陷或人源肾脏嵌合胚胎，操作过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 图中猪的去核卵细胞不能用去核体细胞替代
B. 人源肾脏嵌合胚胎中肾脏的遗传物质完全来自人源干细胞
C. SIX1 基因和SALL1 基因与肾脏的形成有关
D. 该项研究有助于解决肾脏移植中的器官短缺及自身排斥反应问题
16、（2025 届河南省多地高三下学期3 月模拟联考）为筛选能高效分解淀粉的芽孢杆菌，进行了如下实
验操作。下列关于该实验的叙述正确的是（ ）
土壤取样
↓
制备土壤稀释液：1g 土壤+99mL 无菌水，振荡得10-2稀释液，依次10 倍梯度稀释得10-3、10-4、10-5等
↓
接种：取不同稀释度土壤稀释液0.1mL，涂布于以淀粉为唯一碳源的固体培养基
↓
培养：适宜条件培养
↓
挑选菌落：挑选周围有透明圈的菌落
A. 该实验也可用平板划线法，多次划线是为了使细菌在培养基上均匀分布
B. 碘液有抑菌作用，为了使透明圈更明显，在接种前向培养基中滴加适量碘液
C. 本实验采用稀释涂布平板法接种，将土壤样品进行梯度稀释是因为土壤中微生物数量多，直接涂布难
以形成单菌落
D. 若在10-5稀释液下涂布的三个平板上，菌落数分别为210、230、250，则每克土壤中能分解淀粉的芽孢
杆菌数量约为2.3×106个
17、（2025 届河南省开封市等3 地高三下学期二模）. 马丁达比犬肾脏细胞（简称MDCK 细胞）是流感
病毒感染研究使用最多的细胞系，也是分离、扩增和纯化的流感病毒较理想的细胞系。有关MDCK 细胞
培养的叙述正确的是（ ）
A. 在培养MDCK 细胞过程中会出现细胞贴壁和接触抑制的现象
B. 流感病毒侵染MDCK 细胞后利用自身遗传物质和原料合成子代
C. 培养MDCK 细胞，需要为其创造95%O2和5%CO2的气体环境
D. 培养MDCK 细胞时需要定期更换培养液，目的是减少杂菌污染
18、（2025 届河南省开封市等3 地高三下学期二模） 《齐民要术》中描述用酒糟（酿酒产生的副产品，
主要由粮食经过酵母发酵后剩余的残渣组成）酿醋的过程：“春酒糟则酽（浓烈），颐酒糟亦中用。然欲
作酢（醋）者，糟常湿下，压糟极燥者，酢味薄。作法：用石砲子辣（研磨）谷令破，以水拌而蒸之。熟
便下，掸去热气，与糟相拌，必令其均调。…夏日作者，宜冷水淋；春秋作者，宜温卧，…。”下列叙述
错误的是（ ）
A. “压糟极燥（干燥）者”导致酒糟中酒精含量减少，使醋酸产量降低
B. “石铠子辣谷令破”的操作，有利于淀粉酶与淀粉接触而发生糖化
C. “掸去热气，与糟相拌”的操作可以防止高温杀死酒糟中的微生物
D. “夏日作者，宜冷水淋”的目的是使发酵温度保持在18~30℃之间
19、（2025 届河南省名校学术联盟高三下学期模拟冲刺） 科研人员将复苏128 代含血清冻存的非洲绿猴
肾（Vero）细胞传代至136 代后，用无血清冻存液制备成无血清Vero 细胞库，随后从中取出1mL 细胞补加
9mL 无血清培养基进行培养，结果如图。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 使用无血清培养可保证实验的连续性
B. ②处细胞的生长速率较①处细胞慢
C. 潜伏期的大部分细胞贴壁后开始分裂
D. 更换培养基对衰退期细胞数量下降无影响
20、（2025 届河南省名校学术联盟高三下学期模拟冲刺）为从高粘度原油（主要是含碳有机物）中筛选
得到高效降解石油污染物的细菌，研究者以山东原油污染污泥为研究对象进行如图所示实验。下列叙述正
确的是（ ）
A. 培养基①的作用是增加目的菌株的种类
B. 图示表明，油泥混合液被稀释了105倍
C. 只有培养基②要以原油为唯一碳源
D. 培养基③采用的接种方法不能用于统计活菌的数量
21、（2025 届河南省名校学术联盟高三下学期模拟冲刺）研究表明，组蛋白H3 赖氨酸4 甲基转移酶
（SMYD3）能通过使染色体组蛋白H3K4 发生甲基化来促进细胞增殖，具有促进牛体细胞重编程的作用，
shRNA 能下调其作用。为探讨其在猪体细胞核移植过程中的重编程作用，研究者进行有关实验（见图，
Fbs 是成纤维细胞；GFP 表达的绿色荧光蛋白可发出绿色荧光）。下列叙述正确的是（ ）
A. 利用Ca2+处理Fbs，可增大其吸收质粒的效率
B. 在传代培养猪卵母细胞时，要定期更换培养液
C. SMYD3 使囊胚染色体组蛋白甲基化来影响转录
D. 只能用shRNA 基因替换SMYD3 基因作为实验对照
22、（2025 届河南省豫西北教研联盟（洛平许济）高三下学期3 月二模）. 泡菜汁中乳酸菌的分离与计
数可采用稀释涂布平板法。下列叙述错误的是（ ）
A. 培养基要维持正常的pH，一般应在灭菌前调pH
B. 完成接种后，培养乳酸菌的平板需要放置在无氧环境下培养
C. 稀释涂布平板法计数时，需将泡菜汁中的乳酸菌稀释至30～300 个/mL
D. 用稀释涂布平板法统计活菌数目可能会比用细菌计数板统计的数目少
23、（2025 届河南省豫西北教研联盟（洛平许济）高三下学期3 月二模） 植物甲抗旱、抗病性强，植物
乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程
如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 过程①用纤维素酶和果胶酶处理时间的差异，可能与两亲本细胞壁结构差异有关
B. 过程②用PEG 诱导原生质体融合和细胞壁再生，杂种细胞含有亲本的2 个细胞核
C. 过程④一般不需要光照，脱分化形成的愈伤组织是不定形的薄壁组织团块
D. 过程④和⑤的培养基中添加生长素和细胞分裂素的浓度、用量比例有差异
24、（河南省部分名校2024-2025 学年高三下学期3 月联考） 甲醇蛋白是巴斯德毕赤酵母的胞内蛋白，
可用甲醇作碳源来培养巴斯德毕赤酵母生产甲醇蛋白。毕赤酵母无毒性，甲醇对大多数微生物有毒性。下
列叙述错误的是（ ）
A. 筛选能高效利用甲醇的毕赤酵母时，培养基应以甲醇为唯一碳源
B. 甲醇对其他微生物有毒，因此用于生产微生物饲料的培养基不需要灭菌
C. 发酵时，发酵温度、培养液的渗透压和pH 都可能影响甲醇蛋白产量
D. 发酵结束后可采用过滤、沉淀的方法将菌体分离和干燥
25、（河南省部分名校2024-2025 学年高三下学期3 月联考） 猪繁殖与呼吸综合征（又称“猪蓝耳
病”）是造成养猪业重大损失的主要疾病之一，CD163 基因表达的蛋白质是猪繁殖与呼吸综合征病毒感染
的关键受体，某团队通过基因工程和细胞核移植技术成功培育了CD163 基因敲除大白猪。下列有关说法错
误的是（ ）
A. 基因敲除应选择猪胚胎成纤维细胞的连续细胞系作为重组DNA 的受体细胞
B. 对经筛选的阳性转化细胞进行克隆化培养后作为供体细胞进行细胞核移植
C. 采用电融合方法可促进核供体和受体细胞的融合及重组细胞的分裂发育
D. 可从克隆猪仔耳组织提取DNA 进行相关检测确定CD163 基因是否成功敲除
26、（河南省部分学校2024-2025 学年高三下学期2 月联合性检测） 从土壤中混杂的微生物群体中获得
只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离纯化。如图是从土壤中分离纯化能产生几丁质酶的
微生物的操作流程。下列叙述错误的是（ ）
采集样品→步骤X→梯度稀释→将样品布到培养基A 上→挑选菌落
A. 配制培养基时应先灭菌再调pH
B. 步骤X 所用的培养基中应以几丁质作为唯一碳源
C. 在培养基A 上形成的菌落数一般小于实际活菌数
D. 以菌落为中心形成的透明圈越大，该菌产几丁质酶的能力越强
27、（河南省部分学校2024-2025 学年高三下学期2 月联合性检测） 用猕猴桃制作果酒、果醋的发酵工
艺包括打浆、酶解、酒精发酵、醋酸发酵等步骤，制作过程中需控制温度、糖度、接种量等参数。下列叙
述错误的是（ ）
A. 加入果胶酶进行酶解可分解细胞壁、提高果汁产量
B. 果酒发酵时可接种酵母菌，控制温度
18～30℃
C 适当增加接种量可以提高发酵速率，抑制杂菌繁殖
D. 果酒和果醋发酵过程中均需控制发酵罐处于密闭状态
28、（河南省部分学校2024-2025 学年高三下学期2 月联合性检测） 幼畜体外胚胎移植（JIVET）技术
可利用幼畜对外源激素敏感的生理特点，采用外源激素诱导幼畜卵泡超数发育，再结合胚胎工程技术产生
后代，从而快速扩繁良种畜群。下列叙述正确的是（ ）
A. 结合的胚胎工程技术主要指体内受精、胚胎移植等
B. 成熟卵子与获能后的精子受精形成受精卵，即可进行移植
C. 诱导幼畜卵泡超数发育的外源激素通常是促性腺激素
D. JIVET 技术体系充分发挥了优良公畜的繁殖潜能，扩繁良种
29、（河南省部分学校2024-2025 学年高三下学期阶段测试（五））A 型塞内卡病毒（SVA）会导致猪患
水疱传染病，VP1 蛋白是SVA 核衣壳的主要成分，可作为SVA 诊断的靶蛋白。VP1 单克隆抗体检测是一
种快速、准确地检测SVA 病毒的方法，如图为VPI 单克隆抗体的制备过程。下列叙述错误的是（ ）
A. 过程①形成的融合细胞包括3 种，仅1 种可产生抗体且能无限增殖
B. 过程②所用选择培养基加入动物血清可补充合成培养基缺乏的物质
C. 过程③需进行克隆化培养和抗体检测，后者利用了抗原—抗体杂交
D. 培养骨髓瘤细胞时会出现接触抑制现象，过程①前需用胰蛋白酶处理
30、（河南省部分学校2024-2025 学年高三下学期阶段测试（五））. 聚乙烯醇（PVA）是难降解的大分
子有机物，PVA 分解菌能产生PVA 酶降解PVA。PVA 可与碘形成蓝绿色复合物，复合物被降解后蓝绿色
消失；形成透明圈。下图为PVA 分解菌的筛选过程，其中SG 培养基为一种分离培养基，①~⑤表示过程，
I~Ⅲ表示菌落。下列叙述正确的是（ ）
A. 甲培养基为添加PVA 和碘的选择培养基，可筛选出PVA 分解菌
B. 过程③应选菌落Ⅱ中的菌种进行接种，该菌种分解PVA 的能力最强
C. 过程①和③所用接种方法可准确计数菌液中的PVA 分解菌的活菌数
D. 利用以PVA 为唯一碳源的丙培养基对筛选出的PVA 分解菌进行扩大培养
31、（河南省部分重点高中九师联盟2024-2025 学年高三下学期2 月开学考试）不同的乳酸菌具有不同的
代谢特征，从而产生不同口味和风味的发酵产品。复合乳酸菌发酵剂可以生产理想品质的泡菜，但构建复
合发酵剂的前提是菌种间不存在拮抗作用（指一种微生物活动抑制或杀死另一种微生物）。两两相交划线
接种法可鉴定菌种间有无拮抗作用。从不同的自然发酵酸菜中筛选出三种乳酸菌，采用两两相交划线接种
的实验结果如表所示。下列叙述错误的是（ ）
菌株
LP
菌株F
菌株DR3-6
菌株LP
/
+
+
菌株F
+
/
+
菌株DR3-
6
+
+
/
注：+表示两两相交划线处的培养基上有两种数量相等，生长旺盛的菌落；/表示没有进行两两相交划线接
种。
A. 在无氧条件下，乳酸菌能将葡萄糖分解成乳酸或乙酸
B. 制作传统泡菜时，利用蔬菜表面天然的乳酸菌进行发酵
C. 两两相交划线时，取菌液前和划线后均需要灼烧接种环
D. 据表可知，3 种乳酸菌能作为发酵剂菌株进行复配研究
32、（河南省部分重点高中九师联盟2024-2025 学年高三下学期2 月开学考试） 科学家以人乳头瘤病毒
18 型（简称HPV18）的核衣壳蛋白为抗原，制备了单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 先用HPV18 的核衣壳蛋白饲喂小鼠，再从小鼠脾脏中分离出相应的B 淋巴细胞
B. 将等量B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞
C. 用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可以传代培养，但不能冷冻保存
D. 制备过程中涉及了肿瘤细胞在体外培养时可以无限增殖的生物学原理
33、（河南省部分重点高中九师联盟2024-2025 学年高三下学期2 月开学考试）. 技术人员攻克了供体的
超数排卵、采胚、受体的选择、同期发情、发情鉴定、非手术移植、胚胎的冷冻和解冻等技术环节的难点，
成功培育出浙江首例遗传改良胚胎牛。下列叙述正确的是（ ）
A. 从卵巢中采集的卵母细胞可直接与获能的精子进行体外受精
B. 选择受体时，需要进行免疫检查，以防止其对植入胚胎产生排斥反应
C. 为了进一步扩大繁殖规模，可对发育良好的囊胚或原肠胚进行胚胎分割
D. 可用外源促性腺激素诱发供体卵巢排出比自然情况下更多的成熟卵子
34、（河南省项城市2024-2025 学年高三下学期3 月联考） 从传统发酵技术到发酵工程，经历了漫长的
历史过程。下列叙述错误的是（ ）
A. 自制泡菜时泡菜坛装八成满可防止发酵液溢出
B. 发酵工程需要严格控制温度、pH 和罐压等条件
C. 发酵获得的单细胞蛋白可用于生产微生物饲料
D. 啤酒生产过程中，加入啤酒花可提供发酵菌种
35、（河南省项城市2024-2025 学年高三下学期3 月联考） 真菌原生质体融合是先通过酶解法等去除细
胞壁，再在高渗环境中释放出原生质体并使它们混合、凝集，从而实现遗传重组的过程。如图为A、B 菌
株杂交得到重组体的过程，下列分析错误的是（ ）
A. 图中去除细胞壁时不宜选择纤维素酶和果胶酶
B. 可用电融合法或PEG 融合法诱导原生质体融合
C. 重组体的形成需要经过两个亲本菌株的核融合
D. 重组体形成的标志是再生出新的核膜和细胞膜
36、（河南省驻马店市2024-2025 学年高三下学期2 月质量检测） 利用甘蔗制作甘蔗酒时可加入少许糯
米，传统制作流程包括将新鲜甘蔗去皮榨汁后酶解、灭菌和加酒曲发酵等过程。下列叙述错误的是（
）
A. 新鲜甘蔗去皮榨汁后酶解可去除细胞壁，提高出汁率
B. 甘蔗汁和糯米均能为酒曲中的菌体提供碳源等营养物质
C. 若拌酒曲时被醋酸杆菌污染，甘蔗酒表面可能出现白膜
D. 甘蔗汁装罐不宜太满，结束发酵时发酵液中残糖量为零
37、（河南省驻马店市2024-2025 学年高三下学期2 月质量检测）藿香是一种重要的中草药，科研人员利
用藿香的叶片为外植体进行植物组织培养，过程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. ①②过程为脱分化，期间可能会发生基因突变或基因重组
B. 经②过程诱导形成的愈伤组织是排列规则的薄壁组织团块
C. ③过程中生长素与细胞分裂素的比值高时有利于诱导生芽
D. 先诱导生芽后诱导生根有利于试管苗独立进行光合作用
38、（河南省驻马店市2024-2025 学年高三下学期3 月模拟）某地区实施了玉米、小麦秸秆综合利用方案：
①小麦秸秆粉碎还田，②制沼气，③推广玉米秸秆青贮技术（切碎后发酵，可长期保存且保持营养和新鲜
度），④培育菌菇食品。下列叙述正确的是（ ）
A. ①应用了生态学的整体原理
B. ②实现了能量的多级利用，可提高能量的传递效率
C. ③玉米秸秆在青贮中能量全部流向分解者
D. ②④可以使能量持续高效地流向对人类有益的方向
39、（河南省驻马店市2024-2025 学年高三下学期3 月模拟）尿素分解菌会使培养基中的酚红指示剂变红。
为了从土壤中分离出尿素分解菌，使用以尿素为唯一氮源的选择培养基进行筛选，实验的具体分组和操作
如下表所示。下列有关叙述错误的是（ ）
组别
具体组
别
具体操作
实验
组
实验组1
涂布接种的选择培养基
实验组2
涂布接种的选择培养基
实验组3
涂布接种的选择培养基
实验组4
涂布接种的牛肉膏蛋白胨培养基
对照
组
对照组1
不涂布接种的选择培养基
对照组2
不涂布接种的牛肉膏蛋白胨培养
基
A. 对照组1 与实验组1、2、3 组对比以验证选择培养基是否被杂菌污染
B. 实验组4 与实验组1、2、3 组对比以验证选择培养基是否具有选择作用
C. 实验组1、2、3 可分离得到尿素分解菌，实验组4 菌落最多，理论上对照组无菌落
D. 选择培养基中菌落的红色环带直径与菌落直径比值越小，分解尿素的能力越强
40、（河南省驻马店市2024-2025 学年高三下学期3 月模拟）青蒿素是传统的中药材，是治疗疟疾的重要
药物。研究人员利用青蒿细胞悬浮培养技术进行工厂化生产青蒿素，实验流程和培养装置如下图所示。下
列有关叙述错误的是（ ）
A. 实验流程中可用果胶酶处理愈伤组织，解离细胞间的连接，有利于制备悬浮细胞
B. 此装置可不受季节、耕地限制，生产原理是细胞增殖
C 装置中可增加排气管，充气管和排气管都置于溶液中
D. 青蒿素是一种小分子有机物，属于次生代谢物
41、（河南省驻马店市2024-2025 学年高三下学期3 月模拟）我国科学家成功培育了体细胞克隆猴。在处
理重构胚时，将组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA、组蛋白去甲基化酶KDM4D 的mRNA 注入了重构胚，促进囊
胚的发育，提高代孕母猴的妊娠率。下列叙述错误的是（ ）
A. 灭活的仙台病毒可以诱导细胞融合，体现了细胞膜的流动性
B. TSA 能够抑制组蛋白脱乙酰酶的作用从而降低组蛋白的乙酰化水平
C. 组蛋白去甲基化酶KDM4D 能够降低组蛋白的甲基化水平
D. 培育克隆猴对研究人类疾病致病机制和研发新药有重要意义
42、（河南省驻马店市重点高中联考2024-2025 学年高三下学期3 月月考）. 为从高粘度原油（主要是含
碳有机物）中筛选得到高效降解石油污染物的细菌，研究者以山东原油污染污泥为研究对象进行如图所示
实验。下列叙述正确的是（ ）
A. 培养基①的作用是增加目的菌株的种类
B. 图示表明，油泥混合液被稀释了105倍
C. 只有培养基②要以原油为唯一碳源
D. 培养基③采用的接种方法不能用于统计活菌的数量
43、（河南省驻马店市重点高中联考2024-2025 学年高三下学期3 月月考）CD47 是一种跨膜糖蛋白，它
可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌。结肠癌等多种肿瘤细胞表
面的 CD47 含量比正常细胞高 1．6-5 倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为证明抗 CD47
的单克隆抗体可以解除CD47 对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验：
下列叙述正确的是（ ）
A. 过程②中可用的诱导因素有灭活的病毒、聚乙二醇（PEG）、紫外线照射
B. 在乙、丙及骨髓瘤细胞中，乙、丙经培养后均可获得大量的抗CD47 的单克隆抗体
C. 对照组应在巨噬细胞＋正常细胞共培养体系中加入单克隆抗体
D. 过程①中给实验小鼠注射的CD47 是能与抗 CD47 的单克隆抗体特异性结合的抗原
44、（2025 届河南省洛阳市三校联考一模）回答下列（一）、（二）小题：
（一）葡萄柚汁多且营养丰富，在减肥、美容养颜、降低胆固醇、增强发质等方面都有功效，其鲜果和加
工品都深受消费者喜爱。
（1）柚子皮富含果胶，欲从柚子皮上分离纯化高产果胶酶的菌种，可在超净台上用接种环刮取柚子皮
（腐烂并长有霉菌）表面的菌体，用_________法将菌体接种到_________培养基上筛选纯化。
（2）以葡萄柚为原料采用混合菌发酵技术制作柚子醋的过程：葡萄柚去皮→榨汁→接种→果酒发酵→果
醋发酵→柚子醋。发酵过程中接种的是_________菌，需提供的氧气条件是_________，影响其产物风味的
因素除温度等环境因素外还有_________（至少写两点）。
（3）利用固定化细胞技术发酵效率更高，因为与固定化酶技术相比，该技术对酶活性的影响更小，原因
是_________。
（4）发酵结束后，发酵液常需进行_________处理，若滤液浑浊，可采取静置沉淀、加热或_________等
物理方法获得澄清果醋。
（二）新冠疫情威胁着人类的生命健康，疫苗的研制及病毒的检测在疫情防控中起着重要作用。新冠病毒
表面的S 蛋白是主要的病毒抗原。我国研发的腺病毒载体疫苗已获批上市。
（5）HEK 细胞是一种特殊的人胚胎肾源细胞，在该细胞中，质粒I 和质粒Ⅱ可进行同源重组，形成含S
蛋白基因的复制缺陷重组腺病毒。对获得的重组腺病毒除用PCR 检测S 蛋白基因外，还需用_________方
法检测S 蛋白。
（6）使用非洲绿猴肾（Vero）细胞进行病毒培养扩增，然后将病毒灭活，再经过一系列处理得到灭活疫
苗。
经灭活的病毒保留了抗原成分，能诱导机体产生免疫应答。
①非洲绿猴肾（Vero）细胞培养通常需在合成培养基中加入_________。
②把新冠病毒毒株接种于Vero 细胞培养液，在适宜条件下培养，细胞出现病变时收获_________（填“细
胞培养液”或“Vero 细胞”），纯化后灭活。
（7）若机体接种腺病毒载体疫苗前感染过腺病毒，可能会减弱疫苗的免疫效果，其原因是_________。
（8）为能更早地在人群中发现病例，除核酸检测外，利用抗原检测试剂盒可居家自行检测。抗原检测试
剂盒的制备：取新冠病毒免疫过的动物B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，经_________、克隆等途径获得单
克隆抗体，该单抗作为_________用于病毒抗原检测试剂盒。抗原检测虽然快速，但是检出率不及核酸检
测，原因是核酸检测有一个_________的过程，因此哪怕只有少量的病毒核酸也能被发现。
45、（2025 届河南省豫西北教研联盟（许洛平）高三上学期第一次质量检测）碳青霉烯类抗生素具有作
用效果稳定以及毒性低等特点，已经成为治疗严重细菌感染最主要的抗菌药物之一。随着碳青霉烯类抗菌
药物的广泛应用，细菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率逐年升高。回答下列问题。
（1）细菌耐药性变异主要是通过______产生的。用进化的观点分析，细菌对碳青霉烯类抗生素的耐药性
增强的原因是______。
（2）某学生为研究碳青霉烯类抗生素对细菌的选择作用，做了如下实验：
①取大肠杆菌菌液均匀涂布在已灭菌的培养基平板上，并将平板划分为三个大小一致的区域，各放入一个
经碳青霉烯类抗生素处理的相同圆形滤纸片，在适宜条件下培养12—16h，观察结果如图所示，测量各抑
菌圈的直径，并取平均值。
②挑取该平板上位于______的菌落，配成菌液，重复上述实验，培养多代，记录每一代培养物抑菌圈的直
径。
③预期实验结果：根据抑菌圈大小可判定碳青霉烯类抗生素的抑菌效果，随着培养代数增加，抑菌圈越小，
细菌的耐药性越______。
（3）人类在不断研发和使用新的抗生素，细菌对新药的耐药性也在不断提高，两者之间仿佛发生了一场
竞赛。作为这场竞赛的参与者，你的做法是______（写出1 点即可）。
46、（2025 届河南省郑州市郑东新区高三一模） 几丁质酶可以催化真菌细胞壁的重要成分——几丁质的
水解，从而抑制真菌的生长繁殖，提高植物的抗真菌能力。通过基因工程将几丁质酶基因转入杨树体内，
可增强其抵抗真菌的能力。回答下列问题：
（1）为了便于目的基因与Ti 质粒的连接，在利用PCR 技术扩增目的基因时，需要在引物的____端（填
“5”或“3”）增加特定的限制酶切割位点。在两种引物上增加不同限制酶识别序列的主要目的是____（答
出两点即可）。
（2）受体农杆菌细胞在导入重组Ti 质粒前，需要先用Ca2+处理，其目的是____。形成的重组Ti 质粒需要
先导入农杆菌细胞，再侵染杨树的愈伤组织，理由是____。
（3）外植体（幼嫩的茎段）经过_____形成愈伤组织。在愈伤组织形成的过程中，导致外植体被污染的原
因可能是____（答出一点即可）。
（4）目的基因进入受体细胞后，是否稳定维持和表达其遗传特性，首先需要通过分子水平的检测，其次，
还需要进行____水平的鉴定。
47、（2025 届河南省郑州市郑东新区高三一模）化学除草剂在控制杂草、保障农作物的同时会抑制圆褐
固氮菌的生长、繁殖和固氮作用（分子态氮被还原成氨和其他含氮化合物的过程）。市场上的除草剂种类
很多，为探究除草剂对圆褐固氮菌的影响，科学家进行了相关实验，实验步骤如下。回答下列问题：
（1）圆褐固氮菌的分离和鉴定
①土样的采集：选用___________的花生地或者菜园作为采土地点。
②培养基的配制：培养基不需要添加的营养组分是___________，原因在于___________。
③圆褐固氮菌的分离和鉴定：
a．分离前，先将制备好的培养基放入恒温箱中1～2d;然后选择___________的平板进行接种实验。
b．接种培养：待鉴定的菌落活化时，取少量菌体采用平板划线法在培养基表面进行连续划线，连续划线
的目的是___________。
c．菌落的观察：观察菌落的___________。
（2）探究除草剂对圆褐固氮菌的影响：探究的方向有___________。
48、（2025 届河南省郑州市郑东新区高三一模） I、中国科学家团队成功构建了世界首例人猴嵌合胚胎，
即同时具有人和猴细胞来源的胚胎，为解决异种嵌合效率低下等问题提供新的思路，对器官再生研究具有
指导意义。如图是嵌合胚胎培育的部分过程，回答下列问题：
（1）嵌合胚胎早期发育所依据的原理是_____。图中①为扩展潜能干细胞（EPSCs），其功能与胚胎干细
胞相似，都具有_____性。培养EPSCs 时，需要定期更换培养液，目的是_____
（2）图中②时期胚胎发育是在最外层的_____内进行的，沿其内壁扩展和排列的、个体较小的是_____细
胞，它们将来发育成_____。
（3）研究嵌合胚胎的目的是培养与人类似的同种器官，以缓解器官移植供体不足的困境。目前器官移植
中的最大技术难题是_____。
（4）研究人员将图中嵌合胚胎在体外进行培养时，科研人员观察到了嵌合现象，但科研人员并未进行体
内胚胎移植实验，这是为了规避人们最担心的类似于克隆人的_____问题。
Ⅱ、回答关于PCR 技术的相关问题
（5）为确保检测
准确性，在设计PCR 引物时必须注意：用于PCR 的引物长度通常为20~30 个核苷酸，
过短会导致_____，过长则会使反应体系有关步骤温度提高，从而超过_____酶的最适温度；引物3'端的碱
基最佳选择是_____（填“G 和C 或“A 和T），这样形成的碱基配对比较稳定，引物的“_____”端（用
5'或3'作答），可以被修饰，如附加限制酶位点等；PCR 时一般需要加入4 种脱氧核苷三磷酸（dNTP）而
不是脱氧核苷酸，其原因是在子链延伸过程中dNTP 提供_____ ；连续扩增5 次后需要引物至少_____ 个。
49、（2025 届河南省豫西北教研联盟（洛平许济）高三下学期3 月二模）. 我国科研人员利用多种现代
生物技术，在猪的体内培育出了一个“人-猪嵌合中期肾”，且维持到胚胎第28 天（实验过程如图1 所
示），该研究实现了世界首例人源化肾脏异种再生的壮举。回答下列问题。
（1）据图1 分析，在“人源化中肾”的培养过程中，运用了_______等动物细胞工程的技术（答出3 点即
可）。
（2）过程②常用的去核方法为_______，所谓的“核”实际上是_______。过程③中，获得单细胞悬液时，
猪胚胎剪碎后需用_______处理。
（3）过程④运用基因编辑技术（见图2，Cas9 蛋白在向导RNA 引导下，切割目标DNA 双链）敲除成纤
维细胞中的猪肾发育的关键基因SIX1，可以为后续人iPS 细胞的生长和分化提供更合适的生存环境。下列
对于该过程的分析，正确的有_______。
A. Cas9 蛋白由相关基因指导在核糖体上合成，向导RNA 可在逆转录酶催化下合成
B. Cas9 蛋白识别并切割SIX1 基因特定位点的磷酸二酯键，其作用方式与限制酶相同
C. 向导RNA 的部分序列是根据SIX1 基因设计的，其双链区遵循碱基互补配对原则
D. 敲除SIX1 基因的猪胚胎可避免猪细胞与人iPS 细胞竞争肾脏发育的环境
（4）过程⑧中，选用iPS 细胞作为肾脏供体细胞的原因是_______。在早期胚胎阶段，猪胚胎的细胞尚未
完全分化成各种类型的细胞和组织，细胞之间的连接较松散，这使得导入的人iPS 细胞较容易在猪胚胎中
整合，胚胎的可塑性也较强，据此判断在构建嵌合胚胎过程中，可在猪胚胎发育至_______（填“桑葚
胚”或“囊胚”）期注射人源供体细胞。合适的培养基是提高iPS 细胞嵌合能力的关键，下列有关叙述错
误的是_______。
A.培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等营养物质
B.为保证体外培养细胞处于无菌、无毒的环境，除无菌操作外，培养液还需定期更换
C.动物细胞应放入含5%CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是刺激细胞呼吸
D.维持动物细胞体外生存必须有适宜的温度、pH 和渗透压等环境条件
50、（河南省部分学校2024-2025 学年高三下学期2 月联合性检测） 铁皮石斛具有益胃生津、滋阴清热
的功效，其主要成分石斛多糖具有提高机体免疫力的功能。自然条件下其繁殖力很低，利用植物组织培养
技术快速繁殖铁皮石斛是解决其资源短缺的有效途径。相关的培育流程如图所示，数字代表相关过程。回
答下列问题：
（1）过程①是_____，该过程进行前一般需要用_____法对使用的培养基进行灭菌。
（2）继代培养是继初代培养之后连续数代的扩培过程，旨在繁殖出相当数量的无根苗，最后能达到边繁
殖边生根的目的。该过程_____（填“需要”或“不需要”）光照，所用的培养基与②过程的主要区别是
_____。
（3）通过植物组织培养技术繁殖铁皮石斛，属于_____繁殖，这种繁殖方式的优点是_____。
（4）若要通过植物细胞培养技术生产石斛多糖，需将外植体培养到_____（填结构名称）阶段。该技术不
占用耕地，几乎不受_____等的限制，因此对于社会、经济、环境保护具有重要意义。
