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专题强化练
[分值：100 分]
1～6 题每题5 分，7～12 题每题6 分，共66 分
一、选择题(每小题只有一个选项符合题目要求。)
1．(2025·云南，15)黄酒是我国古老的发酵酒之一，传统酿制中，先用蒸煮过的小麦或麸皮
为原料，对之前发酵留存的少量酒曲(曲种)进行扩大制曲；再将酒曲和蒸煮后的糯米、大米
混合处理一段时间后，添加足量酒母(含酵母菌)完成发酵，压榨成品。下列说法错误的是(
)
A．小麦、麸皮等原料为酒曲中微生物的生长繁殖提供了碳源和氮源等营养物质
B．为避免制曲过程被杂菌污染影响黄酒品质，扩大制曲前需对留存的酒曲灭菌
C．糯米、大米蒸煮后立即与酒曲混合会导致酶空间结构改变而降低其催化效率
D．将酒曲混合糯米、大米处理一段时间，是为了获得酒母发酵时的底物葡萄糖
答案 B
解析 小麦、麸皮等原料含有蛋白质、糖类等多种营养成分，蛋白质可以为微生物生长提供
氮源，糖类等可以为微生物生长提供碳源，所以能为酒曲中微生物的生长繁殖提供碳源和氮
源等营养物质，A 正确；扩大制曲前对留存的酒曲不能灭菌，因为酒曲本身含有发酵所需的
菌种，若灭菌会杀死这些菌种，导致无法进行正常的发酵过程，B 错误；糯米、大米蒸煮后
温度较高，立即与酒曲混合，高温会使酶的空间结构改变，导致酶活性降低，从而降低其催
化效率，C 正确；酒曲中含有淀粉酶等，将酒曲混合糯米、大米处理一段时间，淀粉酶等可
将糯米、大米中的淀粉分解为葡萄糖，从而为后续酒母(含酵母菌)发酵提供底物葡萄糖，D
正确。
2．(2025·江苏，6)某同学利用红叶李果实制作果醋，如图为其操作的简易流程。下列相关叙
述正确的是( )
――→――→――→
A．果酒、果醋发酵所需菌种的细胞结构相同
B．过程①中添加适量果胶酶，有利于提高出汁率
C．过程②中，为使菌种充分吸收营养物质，需每日多次开盖搅拌
D．过程③发酵时会产生大量气泡，需拧松瓶盖放气
答案 B
解析 果酒发酵的菌种是酵母菌，属于真核生物，果醋发酵的菌种是醋酸菌，属于原核生物，
两者细胞结构不同，A 错误；过程①为榨汁，果胶酶能分解细胞壁中的果胶，添加适量果胶
酶有利于提高出汁率，B 正确；过程②为果酒发酵，酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵，若
多次开盖会引入氧气抑制无氧呼吸并增加杂菌污染的风险，C 错误；过程③为果醋发酵(保
持通气)，醋酸菌利用酒精产醋过程中不产生气体，不会产生大量气泡，也不需要拧松瓶盖
放气，D 错误。
3．(2025·河南，6)食醋和黄酒是我国传统的日常调味品，均通过发酵技术生产。下列叙述错
误的是( )
A．醋酸的发酵是好氧发酵，而酒精的发酵是厌氧发酵
B．以谷物为原料酿造食醋和黄酒时，伴有pH 下降和气体产生
C．食醋和黄酒发酵过程中，微生物繁殖越快发酵产物产率越高
D．使用天然混合菌种发酵往往会造成传统发酵食品的品质不一
答案 C
解析 发酵过程中，微生物繁殖速度与产物产率并非必然呈正相关，因为微生物的代谢途径
和产物积累受到多种因素的调控，过度繁殖可能会消耗过多营养物质，导致发酵产物的合成
受到影响，C 错误。
4．(2025·江苏，11)从种植草莓的土壤中分离致病菌，简易流程如下：制备土壤悬液、分离、
纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是( )
A．制备的培养基可用紫外线照射进行灭菌
B．将土样加入无菌水混匀，梯度稀释后取悬液加入平板并涂布
C．连续划线时，接上次划线的起始端开始划线
D．鉴定后的致病菌可接种在斜面培养基上，并在室温下长期保存
答案 B
解析 制备的培养基需用高压蒸汽灭菌锅灭菌，紫外线仅用于表面或空气消毒，无法达到灭
菌目的，A 错误；将土样加入无菌水制成悬液，经梯度稀释后，取各稀释度菌液涂布于培养
基表面，分离并计数，B 正确；连续划线时，每次应从上次划线的末端开始，以逐步稀释菌
体，若从起始端开始无法有效分离出单菌落，C 错误；斜面培养基保存菌种需置于4 ℃短
期保存，长期保存需用甘油管或冷冻干燥法，D 错误。
5．(2025·四川，8)微塑料由塑料废弃物风化形成，难以降解，会危害生态环境和人体健康。
有人分离到X 和Y 两种微塑料降解菌，将总菌量相同的X、Y、X＋Y(X∶Y＝1∶1)分别接
种于含有等量微塑料的蛋白胨液体培养基中，培养一段时间后测定微塑料的残留率(残留率
＝剩余量/添加量×100%)，结果如图。下列叙述正确的是( )
A．用平板划线法能测定X 菌组中的活菌数
B．Y 菌组微塑料残留率较高，故菌浓度也高
C．混合菌种对微塑料的降解能力高于单一菌种
D．能在该培养基中生长繁殖的微生物都能降解微塑料
答案 C
解析 平板划线法主要用于微生物的分离和纯化，不能用于测定活菌数，测定活菌数常用稀
释涂布平板法，A 错误；由题意知，三组含菌液体培养基中的含菌量相同，Y 菌组微塑料残
留率较高，说明Y 菌对微塑料的降解能力相对较弱，而不是菌浓度高，B 错误；由图可知，
X＋Y 混合菌种组的微塑料残留率低于X 菌组和Y 菌组，说明混合菌种对微塑料的降解能力
高于单一菌种，C 正确；该培养基中含有蛋白胨，能在该培养基中生长繁殖的微生物可能利
用蛋白胨作为碳源和氮源等，不一定都能降解微塑料，D 错误。
6．(2025·黑吉辽蒙，4)科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素
(C22H23ClN2O8)能力强的菌株，旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述
错误的是( )
A．以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基
B．逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株
C．配制选择培养基时，需确保pH 满足实验要求
D．用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面
答案 D
解析 稀释涂布平板法需用涂布器将菌液均匀涂布在培养基表面，而接种环用于平板划线法
(分离单菌落)。用接种环无法保证菌液涂布均匀，D 错误。
7．(2025·长沙模拟)科研人员通过改良发酵工艺“把玉米变成衣服”，即利用大肠杆菌将玉
米转化为戊二胺，再将戊二胺转化为尼龙布，流程如图所示。其中，戊二胺不能从大肠杆菌
体内排出，且对细胞有毒害作用。下列分析错误的是( )
A．该工业生产中要使用淀粉酶、纤维素酶等酶制剂
B．发酵过程中，应将培养液置于pH 中性或接近中性的条件下培养
C．发酵时定期更换培养液，能解决戊二胺对大肠杆菌的毒害
D．发酵结束后，可采用提取、分离和纯化措施来获得戊二胺
答案 C
解析 玉米籽粒主要含淀粉，非粮原料(秸秆、玉米芯)主要含纤维素和果胶，淀粉酶、果胶
酶和纤维素酶等酶制剂可以把玉米原料分解为葡萄糖，以利于后续发酵过程的进行，A 正确；
发酵过程利用的菌种是大肠杆菌(一种细菌)，大肠杆菌适宜在pH 中性或接近中性的条件下
培养，B 正确；根据题意可知，戊二胺因不能排出大肠杆菌而对其有毒害作用，所以可能需
要通过基因工程改造大肠杆菌，使其能够耐受或排出戊二胺，仅定期更换培养液不能解决戊
二胺对大肠杆菌的毒害作用，C 错误；发酵产品戊二胺是大肠杆菌的代谢产物，不是大肠杆
菌细胞本身，所以需根据戊二胺的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得戊二胺，D
正确。
8．(2025·淄博三模)硅酸盐细菌能分解硅酸盐矿物，使土壤矿物中的难溶性钾转化为可被植
物吸收的可溶性钾。研究人员从土壤中分离硅酸盐细菌的过程如图。下列叙述正确的是(
)
A．含钾长石的培养基中应含可溶性钾
B．土壤稀释液的接种方法为平板划线法
C．甲菌落对钾长石的分解能力大于乙菌落
D．该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目多
答案 C
解析 根据“硅酸盐细菌能分解硅酸盐矿物，使土壤矿物中的难溶性钾转化为可被植物吸收
的可溶性钾”可推知，含钾长石的培养基中含有的钾是以化合物的形式存在的，不是可溶性
的，A 错误；土壤稀释液的接种方法为稀释涂布平板法，B 错误；甲菌落中透明圈的直径与
菌落直径的比值大于乙，说明甲菌落对钾长石的分解能力大于乙菌落，C 正确；稀释涂布平
板法得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落的情况，故该方法统计得到的结
果往往会比实际活菌数目少，D 错误。
二、选择题(每小题有一个或多个选项符合题目要求。)
9．(2025·河北，18)隐甲藻是一种好氧的异养真核微藻。多在海水中腐烂的植物叶片上生长
繁殖，是工业生产DHA(一种功能性脂肪酸)的藻类之一、从海洋中筛选获得的高产油脂隐
甲藻，可用于DHA 的发酵生产。下列叙述正确的是( )
A．隐甲藻可从腐烂的叶片获得生长必需的碳源
B．采集海水中腐烂的叶片，湿热灭菌后接种到固体培养基，以获得隐甲藻
C．选择培养基中可加入抑制细菌生长的抗生素，以减少杂菌生长
D．适当提高发酵时的通气量和搅拌速率均可增加溶氧量，以提高DHA 产量
答案 ACD
解析 隐甲藻是一种好氧的异养真核微藻，多在海水中腐烂的植物叶片上生长繁殖，由此可
知，隐甲藻可从腐烂的叶片获得生长必需的碳源，A 正确；采集海水中腐烂的叶片进行湿热
灭菌后，会杀死其中的微生物，此时接种到固体培养基上无法获得隐甲藻，B 错误；隐甲藻
为真核生物，抑制细菌生长的抗生素可通过抑制细菌细胞壁的合成或影响代谢过程发挥作用，
不会影响真核生物的生命活动，因此在筛选或培养隐甲藻时，加入抑制细菌生长的抗生素可
有效减少细菌杂菌生长，C 正确；隐甲藻为好氧生物，因此利用隐甲藻进行DHA 发酵生产
时，适当提高发酵时的通气量和搅拌速率均可增加溶氧量，以提高DHA 产量，D 正确。
10．(2025·滨州二模)PAHs 是一种不溶于水的碳氢化合物，在土壤中的降解速率很慢，并会
致癌和致畸。科研人员欲从被PAHs 污染的土壤中分离出降解PAHs 的菌株并计数，过程如
图，已知培养基中PAHs 被降解后会形成透明圈。下列叙述错误的是( )
A．培养皿中的培养基应以PAHs 为唯一碳源
B．可用细菌计数板对试管3 中PAHs 分解菌进行计数
C．挑取单菌落时应选择透明圈与菌落直径比值大的菌落
D．1 g 样品土壤中约含7×107个PAHs 分解菌
答案 B
解析 该实验的目的是从被PAHs 污染的土壤中分离出高效降解PAHs 的菌株，所以培养基
应以PAHs 为唯一碳源，A 正确；试管3 中菌体不一定都是PAHs 分解菌，不能用细菌计数
板对试管3 中PAHs 分解菌进行计数，B 错误；透明圈直径与菌落直径比值越大，说明降解
PAHs 的效果越好，所以挑取单菌落时应选择透明圈与菌落直径比值大的菌落，C 正确；根
据平板菌落数可知1 g 样品土壤中约含(66＋76＋68)÷3÷0.1×105＝7.0×107(个)PAHs 分解菌，
D 正确。
11．(2025·聊城二模)使用时间过长的玩具表面可能会滋生细菌，容易导致儿童患接触性皮炎。
为了检测某玩具表面是否存在大肠杆菌，某团队进行了如图所示实验：使用伊红—亚甲蓝染
液(用于鉴别大肠杆菌，能使其菌落呈深紫色，并带有金属光泽)对培养基C 进行染色，初步
统计大肠杆菌的数量，图中1～6 表示不同菌落。下列叙述正确的是( )
A．对菌液进行系列梯度稀释，菌落数为30～300 时适合进行计数
B．配制平板A 时只需要加入碳源、氮源、水、无机盐这几类物质即可
C．图中平板B 的接种方法为稀释涂布平板法，初步判断3 是大肠杆菌的菌落
D．为保护儿童健康，平时可用75%的酒精对玩具进行擦拭消毒
答案 ACD
解析 对菌液进行系列梯度稀释，培养出的菌落数要在30～300 的范围内，否则会导致结果
误差大，A 正确；平板A 为固体培养基，配制时还需要加入琼脂作为凝固剂，B 错误；用伊
红—亚甲蓝染液对培养基C 进行染色，根据平板D 的结果，可判断平板B 中3 是大肠杆菌
菌落，C 正确；可用75%的酒精对玩具进行擦拭消毒，从而达到保护儿童健康的目的，D 正
确。
12．(2025·济南一模)青霉素发酵生产工艺流程如图所示，发酵前的工作主要是选育菌种和菌
种在种子罐中扩大培养。头孢霉素和青霉素的合成过程中有一个共同的前体。头孢霉素可抑
制乙醛脱氢酶的活性，造成乙醛代谢受阻，导致乙醛中毒。下列叙述正确的是( )
A．菌种可通过从土壤中分离、筛选获得，一般采用深层通风搅拌发酵罐进行发酵
B．种子制备从孢子制备开始，通过固体或液体培养基使孢子大量形成菌丝或菌体
C．可在发酵过程中引入能分泌青霉素酶的菌将青霉素分解从而只得到头孢霉素
D．患者使用头孢霉素后应避免饮酒或进食含酒精制品的主要原因是避免出现酒精中毒
答案 AB
解析 在工业生产中，青霉素生产菌种可从土壤中分离、筛选获得，深层通风搅拌发酵过程
提供充足的氧气等条件，有利于青霉素的发酵生产，A 正确；种子制备从孢子制备开始，在
固体或液体培养基上，孢子会大量繁殖形成菌丝或菌体，为后续的发酵提供足够数量的优良
菌种，B 正确；若在发酵过程中引入能分泌青霉素酶的菌，青霉素会被分解，这样不仅无法
得到青霉素，整个发酵过程也会受到极大干扰，不能只得到头孢霉素，C 错误；因为头孢霉
素可抑制乙醛脱氢酶的活性，造成乙醛代谢受阻，导致乙醛中毒，患者使用头孢霉素后饮酒
或进食含酒精制品，酒精代谢产生的乙醛不能正常代谢，会出现乙醛中毒，而不是酒精中毒，
D 错误。
三、非选择题
13．(16 分)(2025·云南，21)我国研究人员发明了生产维生素C 的两步发酵法，流程如图甲。
为了减少氧化葡糖杆菌竞争性消耗山梨糖，需要进行灭菌以结束第一步发酵。
在两步发酵法的基础上，我国研究人员进一步尝试用三菌混菌体系建立一步发酵法。在氧化
葡糖杆菌(原始菌MCS)中利用基因工程技术导入大肠杆菌基因ccdB，得到工程菌IR3C。
MCS 和IR3C 单菌培养时，活菌数变化曲线如图乙，MCS、IR3C 分别与普通生酮基古龙酸
菌和巨大芽孢杆菌进行三菌混菌发酵时，产物含量变化曲线如图丙。
回答下列问题：
(1)要使基因ccdB 在IR3C 中稳定遗传、表达并发挥作用，构建的基因表达载体除启动子外，
还必须有________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(2)绘制图乙需统计活菌数，常用方法是____________________________。当活菌达到一定
数量时，基因ccdB 编码的蛋白质开始发挥作用，推测该蛋白质的作用是
____________________________________，开始发挥作用的时间是____________，判断理由
是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)(6 分)基于图丙，利用IR3C 三菌混菌发酵的产量__________(填“高于”或“低于”)MCS
三菌混菌发酵的产量，其原因是________________________________________________
________________________________________________________________________。
答案 (1)标记基因、目的基因、终止子、复制原点 (2)稀释涂布平板法 抑制工程菌IR3C
的生长增殖或诱导其凋亡 约15 h 培养15 h 后，IR3C 活菌数量开始下降，而MCS 活菌数
量上升 (3)高于 基因ccdB 编码的蛋白质抑制了工程菌IR3C 的生长增殖或诱导其凋亡，
减少了其对山梨糖的竞争性消耗，更多的山梨糖用于合成2酮L古龙酸
解析 (1)基因工程中构建的基因表达载体，除启动子外，还要有标记基因、目的基因、终
止子、复制原点等。(2)统计活菌数目常用稀释涂布平板法，从图乙看出，随着时间推移，
活菌数量不断增加，在15 h 后，IR3C 活菌数量开始下降，而MCS 活菌数量仍在上升，所
以推测转入的基因ccdB 编码的蛋白质能抑制工程菌IR3C 的生长增殖或诱导其凋亡，发挥作
用的时间大约在15 h。(3)从图丙看出，IR3C 三菌混菌发酵产生的2酮L古龙酸含量比MCS
三菌混菌发酵高，因此可以推测，IR3C 三菌混菌发酵，维生素C 的产量更高，可能的原因
是IR3C 转入了ccdB 基因，抑制工程菌IR3C 生长增殖或诱导其凋亡，减少氧化葡糖杆菌竞
争性消耗山梨糖，从而更多的山梨糖被用于合成维生素C。
14．(18 分)(2025·长沙一模)活性黑5 是一种低毒性、难褪色的含氮染料。欲利用生物酶处理
染料废水中的活性黑5，具体操作流程如图。从染料废水堆积池的污泥中获得优势菌群，采
用浓度梯度驯化法，进一步培养获得具备强分解活性黑5 能力的假单胞杆菌，并进行基因表
达分析。回答下列问题：
(1)培养基Ⅰ和培养基Ⅱ均以________________为唯一氮源，从用途上来看均属于________
培养基，该类培养基的特点是_______________________________________________
________________________________________________________________________。
培养基Ⅱ是利用____________________法将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得
到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的____________________。
(2)假单胞杆菌中，BVU5 蛋白分解活性黑5 的场所最可能为______________________(填
“细胞质基质”“溶酶体”或“核糖体”)；据题推测，驯化后的假单胞杆菌增强了
__________________________________过程。
(3)(4 分)假单胞杆菌分解活性黑5 能力的强弱可能与______________________________
________________________________________________________________________( 答出2
点)等因素有关。
答案 (1)活性黑5 选择 允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生
长 平板划线 纯培养物 (2)细胞质基质 BVU5 基因的转录和翻译(或表达) (3)BVU5 蛋
白的含量、BVU5 蛋白对活性黑5 的分解速率、BVU5 蛋白的空间结构
解析 (1)培养基Ⅰ和培养基Ⅱ均以活性黑5 为唯一氮源，能筛选到可以利用活性黑5 的微生
物，从用途上来看均属于选择培养基；选择培养基是指一类根据特定微生物的特殊营养要求
或其对某理化因素抗性的原理而设计的培养基。具有只允许特定的微生物生长，而同时抑制
或阻止其他微生物生长的功能；据图可知，培养基Ⅱ是利用平板划线法(用接种环在平板表
面上做多次由点到线的划线)将单个微生物分散在固体培养基上；一般由单个微生物繁殖形
成的一团肉眼可见的纯培养物称为菌落。(2)假单胞杆菌为原核生物，没有溶酶体，核糖体
是合成蛋白质的场所，没有分解蛋白质的功能，细胞质基质中存在多种酶，因此细胞质基质
最可能为BVU5 蛋白分解活性黑5 的场所；驯化后的假单胞杆菌增强了BVU5 基因的转录和
翻译过程，使得BVU5 蛋白的含量大大提高。(3)BVU5 蛋白的含量、BVU5 蛋白对活性黑5
的分解速率、BVU5 蛋白的空间结构都可能会影响到假单胞杆菌分解活性黑5 的能力。
